甜菜碱醛脱氢酶基因论文_李春枝,潘彩霞,刘宏伟,刘冰,罗晓明

导读:本文包含了甜菜碱醛脱氢酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:基因,脱氢酶,甜菜碱,转基因,花粉管,甘蓝,北美。

甜菜碱醛脱氢酶基因论文文献综述

李春枝,潘彩霞,刘宏伟,刘冰,罗晓明[1](2018)在《转甜菜碱醛脱氢酶基因增强羽衣甘蓝的耐盐性研究》一文中研究指出羽衣甘蓝(Brassica oleracea L.var.accephala DC.)是目前常用观赏植物。该研究中,菠菜BADH(甜菜碱醛脱氢酶)基因用农杆菌介导转入了羽衣甘蓝中,共获得了7株转基因植株,并经PCR、Southern blot和实时荧光定量PCR分析。结果表明:BADH基因已整合到羽衣甘蓝基因组并在转基因植物中表达。在盐胁迫下,转基因植物中的BADH酶活性明显高于野生型植物,而转基因植株的MDA含量及相对电导率明显低于野生型植物。表明BADH活性增加,膜的渗透性保护能力也增强,转基因植物的抗逆性增加。同时,在盐胁迫下转基因羽衣甘蓝植株平均主根长、鲜质量、成活率和叶绿素含量均显着高于野生植株,而干质量/鲜质量明显低于野生植株。转基因羽衣甘蓝耐盐性明显增强,该转基因植物可以为羽衣甘蓝抗性育种提供分子基础。(本文来源于《北方园艺》期刊2018年05期)

郑贞贞,李佳,叶广继,黄含,王芳[2](2017)在《马铃薯青薯九号甜菜碱醛脱氢酶基因(StBADH)克隆及进化分析》一文中研究指出本研究利用同源克隆,从马铃薯青薯9号中克隆到2个甜菜碱醛脱氢酶基因,分别命名为St BADH-504和St BADH-505。St BADH-504为1 631 bp,CDS为1 515 bp,编码504个氨基酸蛋白,编码蛋白亚细胞定位于线粒体;St BADH-505为1 709 bp,CDS为1 518 bp,编码505个氨基酸蛋白,编码蛋白亚细胞定位于叶绿体或过氧化物酶体,二个蛋白都有醛脱氢酶高度保守的十肽(VSLELGGKSP)结构。进化分析表明,St BADH-504和St BADH-505蛋白与茄科植物中BADH蛋白聚为一类,但二者分属不同分支。盐胁迫表达特征分析表明,马铃薯叶片中St BADH-504表达受盐胁迫的诱导,而St BADH-505为组成型表达,不受盐胁迫诱导。本研究有助于了解马铃薯耐盐机理,为耐盐马铃薯资源创制提供理论参考。(本文来源于《分子植物育种》期刊2017年09期)

喻时周,杨成龙,郭建春,段瑞军[3](2016)在《海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析》一文中研究指出在许多渗透调节剂中,甜菜碱是最理想的有机小分子渗透调节物质。甜菜碱在植物体内大量积累不会带来危害,同时能提高植物对环境胁迫的抗性。将海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到表达载体p ET-28a(+)上,获得重组载体p ET-Sp BADH并将其成功地转化到BL21(DE3)中得到重组工程菌,经IPTG诱导能高效表达55 k D目的蛋白,表达量可以达到301μg m L–1。酶学特征分析表明,该蛋白最适p H值为7.2,在偏碱条件下能维持较高的催化活性;Sp BADH蛋白对高温敏感,且温度对催化活性影响较大,超过55℃时酶活性只有20%,最适酶催化活性温度为37℃;而有机小分子醇类对酶的催化活性有保护作用,可以通过自身特征维持酶催化活性的微环境。(本文来源于《作物学报》期刊2016年10期)

尚丽霞,蔡勤安,于志晶,杨向东,孟凡钢[4](2016)在《甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化大豆的研究》一文中研究指出本研究利用农杆菌介导法将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入大豆,以提高大豆的耐盐性。对132棵转化植株进行了PCR检测,获得64棵阳性植株,阳性率达到48%。对PCR阳性植株进一步进行Southern杂交分析,证明BADH基因已经整合到大豆基因组中。(本文来源于《东北农业科学》期刊2016年02期)

刘增美,朱天艺,龚一富,王何瑜,章丽[5](2015)在《北美海蓬子甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及表达载体构建》一文中研究指出以北美海蓬子种子为材料,采用RACE技术获得北美海蓬子BADH基因的c DNA全长序列.结果表明:BADH基因c DNA全长为1 836 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 503 bp,编码500个氨基酸,预测蛋白的分子量为54.5 k Da,理论等电点为5.31.推测出BADH氨基酸中含有甜菜碱醛脱氢酶家族高度保守的十肽序列(VTLELGGKSP)及与酶功能相关的半胱氨酸残基(Cys).序列比对和系统进化树显示,北美海蓬子与盐节木和盐穗木的亲缘关系最近,同源性达94%.并构建了植物表达载体p CAMBIA3301-BADH,将其成功导入到农杆菌EHA105中,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.(本文来源于《宁波大学学报(理工版)》期刊2015年04期)

陈世龙[6](2015)在《矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因(AnBADH)转化烟草及其对耐旱和耐盐性的改良》一文中研究指出干旱和土壤盐渍化等非生物逆境,严重制约了作物生长发育和地理分布,是造成农作物产量下降甚至绝收的原因之一。提高作物抵抗逆境胁迫的能力,具有重要的理论和现实意义。植物为了适应或抵抗不利环境,在进化过程中逐步形成了一定的抗逆机制来减轻胁迫伤害。矮沙冬青(Ammopiptanthus nanus)与蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongollcus)同属豆科沙冬青属,是第叁纪古地中海消失后,在气候旱化过程中逐渐适应,并在塔里木盆地西部幸存下来的残遗物种。对其干旱瘠薄的恶劣环境有极强的适应性,是我国西部荒漠地区唯一常绿阔叶灌木。克隆矮沙冬青抗逆相关基因,异源转化表达验证其功能,可为抗逆转基因育种提供基因资源。本实验用前期克隆的矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因AnBADH,构建双子叶植物表达载体,通过农杆菌介导法转化野生型烟草品系“W38”,对转基因烟草株系进行抗逆相关测定,得到如下结果:1.通过农杆菌介导法转化烟草,经潮霉素初步筛选后获得58个抗性植株,PCR检测鉴定,其中20个植株为阳性,扩增条带大小和质粒一致,说明AnBADH基因插入到烟草基因组中。2.选取H13、H16和H22叁个阳性转基因烟草T1株系的种子,在含有20 mg·L-1潮霉素的MS培养基上做发芽试验,分别并移栽至含有200 mmol·L-1 NaCl和200 mmol·L-1甘露醇的MS固体培养基上,模拟高盐、干旱胁迫,观察测定其形态变化。结果表明,转AnBADH基因烟草株系的幼苗在干旱和高盐胁迫胁迫条件下均能够正常生长,与野生型对照相比,植株健壮,侧根发达,根系更长,具有一定抵抗干旱和高盐胁迫的能力。3.经抗生素筛选和PCR检测的H13、H16和H22的T1代阳性株系,用10%的聚乙二醇6000和300 mmol·L-1的NaCl模拟干旱和高盐胁迫,测定叶片的相对电导率,以及叶片中甜菜碱、游离脯氨酸、丙二醛和可溶性糖的含量。结果表明,干旱胁迫下转基因和野生型植株甜菜碱含量差异不明显,转基因株系可溶性糖含量明显增加,转基因H13和H16两个株系的游离脯氨酸含量增加,H22株系的丙二醛含量在胁迫之后明显降低,转基因株系相对电导率在干旱胁迫第2d和第3d显着低于野生型对照。高盐胁迫下,转基因和野生型植株甜菜碱含量变化差异不明显,转基因株系可溶性糖含量明显增加,游离脯氨酸含量均有所上升,而丙二醛含量明显减少。转基因株系相对电导率在高盐胁迫第2d显着低于野生型对照。4.在自然干旱条件下,转基因烟草株系耐受能力强于野生型,在干旱处理28d后,上部叶片仍然保持绿色,而野生型对照呈现严重脱水症状。复水后转基因株系能够迅速恢复正常生长,叶片挺立,但野生型植株叶片仍呈萎焉状态。从上述几方面的试验结果看,转化AnBADH基因的烟草株系在干旱和高盐胁迫下,细胞能迅速积累渗透调节物质,细胞膜过氧化程度减轻,透性降低,植物耐受性增强,说明克隆的矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因AnBADH具有较好的抗逆功能,进一步验证后可用于作物转基因改良。(本文来源于《四川农业大学》期刊2015-05-01)

蒋玉蓉,袁俊杰,陈国林,祝水金[7](2015)在《转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因棉花的获得及其耐盐性鉴定》一文中研究指出甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase,BADH)是合成甜菜碱的关键酶,广泛用于植物的耐盐转基因研究。为获得耐盐性提高的棉花植株,本研究通过花粉管通道法将山菠菜甜菜碱醛(BADH)基因转化到陆地棉品种——中棉所35。经卡那霉素田间抗性鉴定、标记基因NPT-Ⅱ和目标基因BADH的PCR检测,以及Southern杂交检测,结果表明BADH已整合到棉花的基因组中,并获得转标记基因NPT-Ⅱ和目标基因BADH棉株5株。通过对T2种子在0.6%Na Cl盐池发芽实验结果表明,转化植株的出苗率高达63.4%,对照材料出苗率2.4%,转化植株耐盐性较对照有明显提高。本研究获得转基因植株可作为抗逆育种的种质材料。(本文来源于《分子植物育种》期刊2015年01期)

孙淑霞,陈栋,李靖,涂美艳,江国良[8](2014)在《桃甜菜碱脱氢酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出本研究以泸定香桃和皮球桃为供试材料,利用同源克隆及实时荧光定量PCR,分析桃基因组2个同源甜菜碱醛脱氢酶基因及其在果肉中的表达。结果表明,2基因p Badh1和p Badh2全长分别为4749和3026 bp,都包含1512 bp的CDS序列,编码503个氨基酸,都分别由15个外显子和14个内含子组成;p Badh1和p Badh2序列在泸定香桃和皮球桃中未发现核苷酸变异。2基因在成熟桃果肉中的表达水平不一致,在泸定香桃中的表达量都明显高于在皮球桃中的表达,且p Badh2基因的表达量显着高于p Badh1,由此可推测,p Badh2基因在桃物种中的表达调控功能强于p Badh1基因,为进一步验证2基因功能奠定理论基础。(本文来源于《西南农业学报》期刊2014年06期)

杨成龙,刘姣,周扬,李瑞梅,段瑞军[9](2014)在《海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达》一文中研究指出本研究利用从海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到高效表达载体p GEX-4T-1上,构建重组载体p GEX-4T-Sp BADH,并对GST-Sp BADH融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-Sp BADH融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD为0.6左右,诱导5 h GST-Sp BADH融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导GST-Sp BADH融合蛋白的表达。本研究结果以期解析Sp BADH基因的功能以及在海马齿抗盐过程中的作用机理。(本文来源于《分子植物育种》期刊2014年06期)

杨成龙[10](2014)在《海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆及功能验证》一文中研究指出植物在受到胁迫时,迅速合成并积累大量的渗透调节物质来维持植物细胞内正常生理功能,免受胁迫伤害。在许多渗透调节剂中,甜菜碱是最理想的有机小分子渗透调节物质。植物在正常生长条件下,甜菜碱在植物体内积累量很少,而当受到胁迫时,甜菜碱的含量量会迅速增加。由于甜菜碱在植物体内大量积累不会带来危害,同时能提高植物对环境胁迫的抗性。目前,对植物甜菜碱参与抗逆的分子机理的研究,已成为当前研究植物抗盐机理和培育抗盐新品种的热点。海马齿作为海滨盐生植物具有很强的抗盐能力,因此研究海马齿中的甜菜碱合成途径,及相关基因的分子特性等,对揭示甜菜碱抗盐机理具有重要意义。甜菜碱醛脱氢酶是调控甜菜碱合成的关键酶,本论文对甜菜碱脱氢酶基因在海马齿植物中的表达特性、酶的生物学特性,以及其功能和与其相关的基因调控进行了系统的研究,以期解析SpBADH基因的功能以及在海马齿抗盐过程中作用机理。主要研究结果如下:1.从海马齿中成功分离到甜菜碱醛脱氢酶基因(SpBADH登录号:JN192464)全长序列。该基因全长1947bp,包含一个1503bp的开放阅读框和57bp的5’端非编码区和387bp的3’端非编码区。编码500个氨基酸的蛋白质,分子量为55KDa。生物信息学分析表明,SpBADH蛋白质具有一个保守的蛋白醛脱氢酶催化结构域,具有保守的醛脱氢酶催化活性位点VTLELGGKSP十肽和C残基;海马齿蛋白SpBADH与千穗谷中AhBADH、菠菜SoBADH、盐爪爪KfBADH及拟南芥AtBADH有较高的同源性,分别为90%、81%、87%、79%。2..SpBADH基因在海马齿植物中的根、茎和叶中均表达,在叶中表达量最高,而在茎中表达量最低;盐胁迫能提高海马齿SpBADH基因在叶、茎中的表达,其中叶片最为敏感,茎次之,而抑制基因在根中表达;脱落酸、双氧水、PEG对海马齿植物根、茎、叶中的甜菜碱醛脱氢酶基因的表达在诱导48h后对均表现为显着提高,其中茎中甜菜碱醛脱氢酶基因的表达受脱落酸、双氧水的诱导明显高于根和叶中,而根中甜菜碱醛脱氢酶基因的表达受PEG的影响明显高于茎和叶;低温在处理0-24h,对SpBADH基因在海马齿植物根、茎、叶中的表达影响不大,低温处理48h时,基因在根、茎、叶中的表达均上升;SpBADH基因的表达受高温诱导,特别在根中,其次在叶中,而在茎中基因的诱导受高温的影响较小。600mmol/L NaCl、海水、20%PEG、H2O2和4℃胁迫均能使海马齿植物各个组织中甜菜碱的含量增加;而42℃和ABA胁迫海马齿植物,其各个组织中甜菜碱的没有显着差异。3.海马齿叶绿体中的甜菜碱醛脱氢酶的活性最高,其次细胞质,在过氧化物酶体和微粒体也能检测到,但活性较低,推测在海马齿植物中可能存在多个BADH基因。海马齿植物SpBADH基因为N-端信号肽,在转基因原生质体的叶绿体中具有强的绿色荧光,从而可以推测海马齿SpBADH基因定位于叶绿体。4.SpBADH以pET大肠杆菌表达载体,在大肠杆菌受体菌BL21(DE3)中能高效表达。它们的最优表达条件为菌体培养温度37℃,蛋白质诱导表达菌体起始OD600为0.6,诱导剂IPTG最佳浓度为0.2mmol/L,诱导时间为6h,重组菌株SpBADH表达量可以达到301μg/mL5.SpBADH基因表达大肠杆菌中分离纯化物能催化甘氨酸甜菜碱醛,生成甜菜碱,SpBADH全长基因表达的蛋白质其酶活性可以达到87U/mg,而其他叁种突变体测不到酶活,从而说明我们从海马齿植物中分离的SpBADH基因具有催化甘氨酸甜菜碱醛的功能,且其保守十肽和Cys残基在SpBADH酶催化过程中起着重要的作用。SpBADH酶活的最适pH值为7.2;最适反应温度为37℃;SpBADH对高温十分敏感,温度超过55℃时酶活性只有20%;SpBADH在K+和Na+存在的条件下活性较高,而Zn2+对SpBADH有抑制作用,Cu2+对SpBADH有强抑制性,醇类物质对该酶热稳定有保护作用。6SpBADH基因表达大肠杆菌工程菌株对金属离子的耐性Na+>K+>Mn2+>Zn2+和Cu2+;对低温有一定的抵抗能力。在酵母菌缺失载体中表达进一步证明SpBADH在离子渗透作用中取到一定的作用。7.SpBADH基因在拟南芥中过量表达,在正常生长条件下和盐胁迫后,BADH酶活性和甜菜碱的含量均明显高于野生型拟南芥,提高3-6倍,转基因拟南芥的抗盐、抗旱能力明显提高。在正常生长条件下,SpBADH转基因和野生型拟南芥中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT),脯氨基(Pro)等清除ROS的酶活性和丙二醛(MDA)和过氧化氢(H202,的含量差异不显着,而在盐和干旱处理后,POD、SOD、CAI、Pro在转基因植物中明显高于野生型拟南芥,但MDA和H2O2含量在野生型拟南芥植物中要高于转基因植物中的含量。8.SpBADH转基因拟南芥中基因表达谱芯片的差异基因按照参与的生物过程,细胞中的定位和生物学功能进行了分类。从T vs W和TS vs WS基因生物学功能比较分析NaCl胁迫条件下,上调的差异表达基因主要是参与抗逆胁迫途径当中的相关基因和参与清除ROS酶系统的基因,如:氧化还原反应、氧胁迫应答系统、应答金属离子和非生物胁迫应答等;从T vs W和TS vs WS基因细胞定位比较分析发现,NaCl胁迫条件下,上调的差异表达基因主要细胞质膜和质膜表层锚定的蛋白相关基因和组成质膜结构的差异基因;从T vs W和TS vs WS基因生物学功能比较分析NaCl胁迫条件下,上调的差异表达基因主要是离子通道相关基因和转录调控基因。9.由此推断:海马齿植物中SpBADH基因在植物耐盐和抗旱过程中,清除植物体内的ROS和离子渗透作用中取到一定的作用。(本文来源于《海南大学》期刊2014-05-01)

甜菜碱醛脱氢酶基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本研究利用同源克隆,从马铃薯青薯9号中克隆到2个甜菜碱醛脱氢酶基因,分别命名为St BADH-504和St BADH-505。St BADH-504为1 631 bp,CDS为1 515 bp,编码504个氨基酸蛋白,编码蛋白亚细胞定位于线粒体;St BADH-505为1 709 bp,CDS为1 518 bp,编码505个氨基酸蛋白,编码蛋白亚细胞定位于叶绿体或过氧化物酶体,二个蛋白都有醛脱氢酶高度保守的十肽(VSLELGGKSP)结构。进化分析表明,St BADH-504和St BADH-505蛋白与茄科植物中BADH蛋白聚为一类,但二者分属不同分支。盐胁迫表达特征分析表明,马铃薯叶片中St BADH-504表达受盐胁迫的诱导,而St BADH-505为组成型表达,不受盐胁迫诱导。本研究有助于了解马铃薯耐盐机理,为耐盐马铃薯资源创制提供理论参考。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

甜菜碱醛脱氢酶基因论文参考文献

[1].李春枝,潘彩霞,刘宏伟,刘冰,罗晓明.转甜菜碱醛脱氢酶基因增强羽衣甘蓝的耐盐性研究[J].北方园艺.2018

[2].郑贞贞,李佳,叶广继,黄含,王芳.马铃薯青薯九号甜菜碱醛脱氢酶基因(StBADH)克隆及进化分析[J].分子植物育种.2017

[3].喻时周,杨成龙,郭建春,段瑞军.海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析[J].作物学报.2016

[4].尚丽霞,蔡勤安,于志晶,杨向东,孟凡钢.甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化大豆的研究[J].东北农业科学.2016

[5].刘增美,朱天艺,龚一富,王何瑜,章丽.北美海蓬子甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及表达载体构建[J].宁波大学学报(理工版).2015

[6].陈世龙.矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因(AnBADH)转化烟草及其对耐旱和耐盐性的改良[D].四川农业大学.2015

[7].蒋玉蓉,袁俊杰,陈国林,祝水金.转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因棉花的获得及其耐盐性鉴定[J].分子植物育种.2015

[8].孙淑霞,陈栋,李靖,涂美艳,江国良.桃甜菜碱脱氢酶基因的克隆及表达分析[J].西南农业学报.2014

[9].杨成龙,刘姣,周扬,李瑞梅,段瑞军.海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达[J].分子植物育种.2014

[10].杨成龙.海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆及功能验证[D].海南大学.2014

论文知识图

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