导读:本文包含了人胸腺素毕赤酵母论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胸腺,酵母,层析,蛋白,亲和,超氧化物,浸膏。
人胸腺素毕赤酵母论文文献综述
刘敏,张晨瑶,王飞,翟彦生,肖颖[1]（2017）在《融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定》一文中研究指出猪干扰素α(IFN-α)是在特定条件下由细胞产生的一种具有广谱、高效抗病毒活性的可溶性糖蛋白,胸腺素α1(Tα1)是一种具有免疫调节的活性肽.本研究中将Tα1基因与去掉信号肽序列的猪IFN-αN端融合,构建酵母表达载体PHBM-Tα1-IFNα,同时构建单独表达IFNα的重组质粒PHBM-IFNα,重组质粒电转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株,甲醛诱导表达.利用SDS-PAGE法检测融合蛋白的表达,并用细胞病变抑制法测定干扰素的效价.实验结果表明,酵母表达上清中IFNα的效价为2.916×10~6U/m L;Tα1-IFNα的效价为2.860×10~7U/m L,该结果证实胸腺素α1可提高融合表达蛋白猪干扰素的活性,因此,通过酵母表达体系获得高活性胸腺素-猪干扰素融合蛋白,可为高效、低成本获得抗病毒药物提供一种新的模式.(本文来源于《湖北大学学报(自然科学版)》期刊2017年04期）
周宇飞,袁汉英,吕红[2]（2012）在《人超氧化物歧化酶-胸腺素α1在毕赤酵母中的表达、纯化与活性检测》一文中研究指出胸腺素α1(Thymosin alpha-1,Thyα1)是一种小分子活性多肽。体内外实验表明,Thyα1能够影响细胞因子的分泌和淋巴细胞的功能,具有增强抗病毒、抗分支杆菌、抗真菌的能力,诱导抑制肿瘤的免疫活性,被认为是具有良好疗效的免疫调节剂和生物反应调节物(Biological Response Modifier,BRM)。Thyα1作为免疫调节剂已广泛用于各种疾病的治疗,病的治疗,如肝炎、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、传染性疾病、感染、变(本文来源于《2012年中国青年遗传学家论坛会议文集》期刊2012-06-07）
周宇飞[3]（2012）在《人超氧化物歧化酶—胸腺素α1在毕赤酵母中的表达、纯化与活性检测》一文中研究指出胸腺素al (Thymosin alpha-1, Thyal)是一种小分子活性多肽。体内外实验表明,Thyal能够影响细胞因子的分泌和淋巴细胞的功能,具有增强抗病毒、抗分支杆菌、抗真菌的能力,诱导抑制肿瘤的免疫活性,被认为是具有良好疗效的免疫调节剂和生物反应调节物(Biological Response Modifier, BRM)。Thyal作为免疫调节剂已广泛用于各种疾病的治疗,如肝炎、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、传染性疾病、感染、变态反应、自身免疫病、神经内分泌疾病、各类肿瘤的治疗以及化疗后的免疫功能的恢复等。目前生产Thyal方法有组织提取、化学合成和基因工程方法合成。临床使用的Thyal多为从动物组织提取出的天然产物,纯度和活性难以控制,且生产成本昂贵。基因工程生产重组蛋白药物具有低成本、产物高活性等优势,但是由于Thyal只有28个氨基酸,用基因工程方法重组表达时有一定的难度。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD),在体内催化超氧阴离子自由基(O2-·)转化为H2O2和O2的反应,是生物体内防御氧化损伤、抗氧化的生物酶,具有抗衰老、增加机体免疫等特点,对机体具有重要的保护作用。SOD分子量较大,且在酸碱、热条件下较为稳定不易降解。大量试验和临床应用表明,在各种给药方式下,SOD毒性和不良反应均很小,除罕见的超敏反应外,SOD对人体无毒性。因此,超氧化物歧化酶被广泛应用于食品、保健品、化妆品、药品领域,成为理想的对人体有益无害的添加剂。超氧化物歧化酶的基因工程产品也相继在世界各国被成功开发生产。考虑到胸腺素α1在体内半衰期较短、稳定性较差的缺点,同时胸腺素与SOD具有协同增效作用,为了增强胸腺素α1的稳定性和免疫功能,本研究采用了胸腺素α1(Thyal)与人超氧化物歧化酶(hSOD)融合的策略,构建了6His-hSOD-(G4S)1-thyα1和6His-hSOD-(G4S)2-thyα1两个融合基因,并分别实现了在毕赤酵母表达系统中的高水平表达。重组表达的融合蛋白经过Ni-NTA亲和层析纯化,获得纯度达到80%以上重组蛋白。用邻苯叁酚自氧化法和E-玫瑰花法分别测定了人超氧化物歧化酶活性和胸腺素活性。活性分析结果表明,融合蛋白6His-hSOD-(G4S)1-thyαl和6His-hSOD-(G4S)2-thyαl的超氧化物歧化酶比活性分别为120998U/mg和31279U/mg;融合蛋白在1×10-7mol/L浓度下的E玫瑰花结率分别为38.4%和36.6%。结果说明融合蛋白中由5个氨基酸(G4S)构成的连接肽能有效地保障两个蛋白各自的结构特征,使融合蛋白既有超氧化物歧化酶的活性,又具有胸腺素的活性。纤维素资源是地球上分布最广、含量最丰富的可再生性碳水化合物,为发展可再生生物燃料的提供了无尽的原料。木聚糖酶作为半纤维素酶的一种,其应用涉及纸浆漂白,动物饲料,生物能源等多个方面的工业、农业生产活动,因此,对木聚糖酶的研究与工业应用开发一直广为关注。天然木聚糖酶往往在耐温性、最适pH等条件上难以满足工业化生产的需要,利用基因工程手段进行酶的改造可以改善和提高酶的应用价值。11家族木聚糖酶是研究较为广泛的一类木聚糖酶,目前已有很多不同来源的木聚糖酶基因被克隆、重组表达,并被解析了叁维晶体结构,针对其特点进行的蛋白结构改造也被报道。本课题组游淳曾经通过定向进化和定点突变技术,获得并鉴定了该家族来源于Neocallimastixpatriciarum的木聚糖酶C (XynC)的一株突变体。该突变体内部疏水核心含有一个点突变(G201C),导致了突变体的热稳定性明显提高,同时酶的比活也显着提高。在该突变体中,201位和50位的半胱氨酸所形成的疏水结合是导致热稳定性提高的主要原因。在基于XynC的突变体研究中,又得到了热稳定性和酶比活均比原突变体得到提高的新突变体C60A-G201C。本论文以游淳获得的突变体C60A-G201C为基础,利用随机突变技术以及DNA Shuffling技术获得了8株突变体；构建了含有突变体蛋白基因载体的表达菌株,成功实现了高水平表达,并对突变体蛋白进行了Ni-NTA亲和层析纯化；对突变体蛋白进行了热失活常数的测定,使用圆二色谱技术对突变体蛋白Tm值进行了测定,结果发现了一株热稳定性得到提高的突变体37,其热失活常数要优于未突变蛋白,Tm值要高于未突变蛋白6.12℃。通过同源建模对突变体37进行了生物信息学分析,其序列在20位由Lys突变为Glu,而20位突变的Glu与同位于蛋白Fingers区域的29位的Tyr恰好产生了一个氢键,从而稳定了蛋白的结构,实现了突变体蛋白热稳定性的提升。(本文来源于《复旦大学》期刊2012-05-01）
周宇飞,周峻岗,袁汉英,吕红[4]（2011）在《人超氧化物歧化酶-胸腺素α1融合蛋白在毕赤酵母中的表达与活性检测》一文中研究指出为了增强胸腺素α1(Thyα1)的稳定性和免疫功能,采用胸腺素α1与人超氧化物歧化酶(hSOD)融合的策略,构建了6His-hSOD-(G4S)1-Thyα1和6His-hSOD-(G4S)2-Thyα1 2个融合基因,并分别在毕赤酵母中实现了高水平表达.重组表达的融合蛋白经过Ni-NTA亲和层析纯化后,纯度达到80%以上.用邻苯叁酚自氧化法和E-玫瑰花法分别测定了人超氧化物歧化酶酶活性和胸腺素活性.结果表明,融合蛋白6His-hSOD-(G4S)1-Thyα1和6His-hSOD-(G4S)2-Thyα1的超氧化物歧化酶比活性分别为120 998±5 206 U/mg和31 279±1 121 U/mg;融合蛋白在1×10-7mol/L浓度下的E玫瑰花结率分别为(38.4±1.6)%和(36.6±0.2)%.结果说明:融合蛋白中由5个氨基酸G4S构成的连接肽能有效地保障2个蛋白质各自的结构特征,使融合蛋白既有超氧化物歧化酶的活性,又具有胸腺素的活性.(本文来源于《复旦学报(自然科学版)》期刊2011年02期）
曹俊霞,金礼吉,段延龙,安利佳[5]（2003）在《人胸腺素α1基因在毕赤酵母中的分泌表达》一文中研究指出根据质粒pPIC9K中信号肽基因和质粒pPIC3 5K/hTα1-RP ,构建表达质粒pPIC9K S -hTα1-RP ,通过电激法转化到毕赤酵母GS115菌株中。甲醇诱导表达融合蛋白 ,SDS -PAGE和Westernblot结果证明 ,重组基因hTα1-RP在酵母中得到了表达(本文来源于《生物技术》期刊2003年02期）
黄雯,李兆育,金礼吉,安利佳[6]（2002）在《人胸腺素α1基因在毕赤酵母中的融合表达》一文中研究指出根据已知人胸腺素1(humanThymosinα1,hTα1)的氨基酸序列和毕赤酵母偏爱密码子,人工合成了hTα1基因。用合成的hTα1基因取代核糖体蛋白(ribosomalprotein,RP)基因5′端的84个碱基,组成重组基因hTα1-RP,连接到质粒pPIC3.5K上,构建表达质粒pPIC3.5K/hTα1-RP。表达质粒用电激法转化到毕赤酵母GS115菌株中。甲醇诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western印迹结果证明,重组基因hTα1-RP在酵母中得到了表达,表达量约为25mg/L。(本文来源于《遗传》期刊2002年06期）
黄雯[7]（2002）在《人胸腺素α_1基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中表达的研究》一文中研究指出人胸腺素α1(human thymosin alpha 1，hTα1)是一种免疫增强剂，具有良好的临床疗效。用生物工程手段正确和高效表达hTα1，是降低hTα1的成本、提高使用普及率的重要方式之一。本文探索并实现了hTα1在毕赤酵母中的表达。 挑选毕赤酵母偏爱密码子人工合成hTα1基因，并将其重组到核糖体蛋白(ribosom protein，RP)基因的5′端获得重组基因hTα1-RP。将HTα1基因和hTα1-RP基因分别连接到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3.5K和分泌表达载体pPIC9K上。将四种重组质粒分别转化到组氨酸缺陷型毕赤酵母菌株GS115中，通过4mg／ml G418筛选出高拷贝整合菌株，从而获得胞内、胞外表达hTα1、hTα1-RP的酵母工程菌株。 甲醇诱导胞内融合表达型的转化菌株表达蛋白。经分离提纯、SDS-PAGE、Western blot鉴定分析，表达的为hTα1-RP融合蛋白，表达量可达25mg／L。(本文来源于《大连理工大学》期刊2002-04-01）
人胸腺素毕赤酵母论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
胸腺素α1(Thymosin alpha-1,Thyα1)是一种小分子活性多肽。体内外实验表明,Thyα1能够影响细胞因子的分泌和淋巴细胞的功能,具有增强抗病毒、抗分支杆菌、抗真菌的能力,诱导抑制肿瘤的免疫活性,被认为是具有良好疗效的免疫调节剂和生物反应调节物(Biological Response Modifier,BRM)。Thyα1作为免疫调节剂已广泛用于各种疾病的治疗,病的治疗,如肝炎、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、传染性疾病、感染、变
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人胸腺素毕赤酵母论文参考文献
[1].刘敏,张晨瑶,王飞,翟彦生,肖颖.融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定[J].湖北大学学报(自然科学版).2017
[2].周宇飞,袁汉英,吕红.人超氧化物歧化酶-胸腺素α1在毕赤酵母中的表达、纯化与活性检测[C].2012年中国青年遗传学家论坛会议文集.2012
[3].周宇飞.人超氧化物歧化酶—胸腺素α1在毕赤酵母中的表达、纯化与活性检测[D].复旦大学.2012
[4].周宇飞,周峻岗,袁汉英,吕红.人超氧化物歧化酶-胸腺素α1融合蛋白在毕赤酵母中的表达与活性检测[J].复旦学报(自然科学版).2011
[5].曹俊霞,金礼吉,段延龙,安利佳.人胸腺素α1基因在毕赤酵母中的分泌表达[J].生物技术.2003
[6].黄雯,李兆育,金礼吉,安利佳.人胸腺素α1基因在毕赤酵母中的融合表达[J].遗传.2002
[7].黄雯.人胸腺素α_1基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中表达的研究[D].大连理工大学.2002
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