导读:本文包含了百日咳毒素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:百日咳,毒素,细胞,血凝素,丝状,疫苗,内毒素。
百日咳毒素论文文献综述
王巍巍,刘波,王治伟,程会欣,马国涛[1]（2019）在《CHO细胞法检测百日咳毒素毒性的影响因素》一文中研究指出目的考察不同培养基、不同牛血清、血清灭活与否及生产过程中添加的各外源物质对百日咳毒素(pertussis toxin, PT)在中华仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary cell, CHO)簇集试验中的影响。方法分别使用3种培养基F-12K、DMEM/F12和1640培养CHO细胞,并进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及PT引起细胞簇集的敏感性;分别选取2个厂家的牛血清(对2种血清进行灭活和不灭活处理)培养CHO细胞,观察4种牛血清对细胞生长及簇集的影响;选用生产过程中添加的物质进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及是否出现簇集,确定不影响细胞生长的最高浓度,同时使用不影响细胞生长的各添加物质最高浓度进行小鼠组胺致敏试验,观察与CHO细胞簇集试验结果是否一致。结果 3种培养基对CHO细胞生长及CHO细胞簇集存在明显差异,F-12K培养基培养的细胞形态规则、典型,其他2种培养基培养的细胞生长缓慢,且对PT的敏感性均低于F-12K培养基;4种牛血清中胎牛血清培养的细胞生长最快且形态规则,簇集试验敏感性优于其他3组血清;添加的各外源物质均会导致细胞生长缓慢或死亡,在稀释至一定浓度后可以排除添加物质对CHO细胞簇集试验的影响,同时在小鼠组胺致敏试验中不会引起动物死亡。结论 F-12K培养基最适宜实验室CHO细胞生长,不同血清对细胞生长和簇集的敏感度有一定差异,添加的外源物质残留量应进行控制以保证试验结果的稳定可靠。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2019年02期）
程会欣,王丽婵,张立志,卫辰,骆鹏[2]（2018）在《百日咳毒素抗原检测系统的建立及其应用》一文中研究指出目的建立吸附无细胞百白破联合疫苗中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的ELISA测定方法,并进行验证及应用。方法以PT作为检测抗原,用高效价鼠单抗和相应的兔多抗建立双抗体夹心ELISA,确定方法的线性范围、重复性、准确性、专属性等,并进行初步应用。结果 PT质量浓度在2.5～80.0 ng/m L时线性良好,决定系数R2>0.98。该方法与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒原液、甲肝疫苗原液、乙肝疫苗原液、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、百日咳丝状血凝素(filamantous hemagglutinin,FHA)、黏着素(pertactin,PRN)均无明显交叉反应,重复性好,专属性较强,其他均符合常规质控要求。该抗原检测系统对生产具有指导意义,并可以正确反映原液及成品中PT的稳定性。结论建立了PT双抗体夹心ELISA检测方法,为吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中PT含量的质量控制提供有效的技术手段。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2018年06期）
高娜,梁疆莉,姬秋彦,顾琴,马艳[3]（2018）在《CHO细胞簇集法与小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性的相关性》一文中研究指出目的比较CHO细胞簇集试验、小鼠体内检测法(小鼠组胺致敏试验、小鼠白细胞增多试验)检测不同脱毒条件下的百日咳类毒素残余毒性的应用效果和相关性。方法以不同脱毒条件百日咳类毒素作为研究对象,用CHO细胞簇集试验、小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性,并进行相关性分析。结果白细胞增多实验与组胺致敏实验结果存在显着的正相关(r=0.881,P=0.00),CHO细胞法与白细胞增多实验呈负相关(r=0.630,P=0.028),CHO细胞法与组胺致敏实验呈负相关(r=-0.613,P=0.034)。结论分析了无细胞组分百日咳疫苗脱毒工艺中CHO细胞簇集试验和小鼠体内检测法2种检测试验的差异性和相关性,为百日咳毒素脱毒工艺的便捷检测开发提供重要参考。(本文来源于《昆明医科大学学报》期刊2018年10期）
卫辰,晁哲,吴燕,王丽婵,骆鹏[4]（2018）在《第2代WHO百日咳毒素国际标准品的协作标定》一文中研究指出目的:建立第2代WHO百日咳毒素国际标准品。方法:以第1代WHO百日咳毒素国际标准品为协作标定的标准品,对英国国家生物制品检定所提供的待标品和中国食品药品检定研究院内部参考品进行国际单位值测定和稳定性测定。测定方法为组胺致敏试验、CHO细胞簇集试验以及3项生化试验方法。结果:中国食品药品检定研究院完成了组胺致敏、CHO细胞簇集2项试验以及1项生化试验。结论:NIBSC经过对来自12个国家的14个实验室的结果进行统计学处理后,赋值第2代WHO百日咳毒素国际标准品组胺致敏活性为每支1 813 IU、CHO细胞簇集活性为每支680 IU,储存和运输稳定性符合要求。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2018年16期）
周菲惠,李智高,王进昆,张申,刘畅[5]（2018）在《百日咳毒素减轻脑缺血后神经元钙内流的实验研究》一文中研究指出目的探讨百日咳毒素(PTx)对缺血性脑卒中后神经元的保护作用及其可能的机制。方法将C57BL6小鼠用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立卒中模型,随机分为两组,每组12只鼠。实验组卒中后予PTx 1000 ng溶于1 ml生理盐水腹腔注射干预;对照组予1 ml生理盐水腹腔注射。24 h后行TTC染色检测梗死面积,并行免疫组化检测细胞凋亡。在体外培养原代神经元,用谷氨酸兴奋刺激模拟卒中后神经元损伤模型。用MTT及乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测PTx对谷氨酸兴奋刺激后神经元的存活和损伤情况。然后,检测PTx对谷氨酸诱导神经元钙离子内流的影响。结果 PTx治疗可减小卒中后小鼠脑梗死面积,使之由(51±11)%降至(34±8)%(P<0.05)。免疫组化发现PTx可使脑内Caspase-3阳性细胞数由(677.7±117.8)个/mm2减少至(297.5±83.6)个/mm2(P<0.05),且较少细胞凋亡。体外结果提示,PTx可增加谷氨酸刺激后神经元的存活率,使MTT吸光值由(0.618±0.06)提升至(1.1±0.12)(P<0.05);同时,PTx还可减少LDH的释放,使吸光值由(1.31±0.11)降低至(0.76±0.08)(P<0.05)。PTx可减缓和减少钙离子进入神经元,经PTx治疗后钙内流可由基础值的5倍降低至基础值的2~3倍,且钙离子内流达到半峰值浓度的时间也由(18.5±2.5)s延长至(85.4±10.2)s。结论百日咳毒素可减少卒中后钙离子内流到神经元,继而减少神经元损伤,减小梗死面积。(本文来源于《国际神经病学神经外科学杂志》期刊2018年04期）
卫辰,晁哲,王丽婵,吴燕,张霖阳[6]（2018）在《第1代百日咳毒素国家参考品的标定》一文中研究指出目的标定第1代百日咳毒素国家参考品。方法以WHO第1代百日咳毒素国际参考品JNIH-5为标定标准品,组织6个实验室采用CHO细胞簇集试验的方法对百日咳毒素候选参考品C1进行协作标定,并给予国际单位值。由中国食品药品检定研究院通过CHO细胞簇集试验对4和37℃放置7、14、21、28 d的C1进行热加速稳定性检测,-20℃放置36个月的C1进行实时稳定性检测,将C1用不同稀释液(水、PBS、50%甘油)复溶,于4、-20、-80℃分别放置1、7及14 d,检测复溶稳定性。结果 C1经6个实验室的协作标定获得104个有效结果,最终确定候选参考品簇集活性为3 000 IU/支。C1的纯度、外观、水分、无菌、分装精度均合格,与JNIH-5的抗原抗体结合能力差异无统计学意义(P>0.05),具有良好的实时稳定性、热加速稳定性,C1经50%甘油复溶后2周内稳定性较好。结论该候选参考品符合国家参考品的各项要求,可用于百日咳毒素CHO簇集试验及组分百日咳疫苗原液抗原纯度、安全性和免疫原性的检测。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年08期）
姬秋彦,高娜,梁疆莉,胡文着,顾琴[7]（2018）在《去除百日咳毒素、丝状血凝素中内毒素的工艺探索》一文中研究指出目的探讨无细胞百日咳疫苗纯化工艺中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)的内毒素去除问题。方法选用Triton法和离子交换层析法,分别对百日咳杆菌发酵液上清和经Capto SP Imp Res柱纯化的发酵液进行内毒素去除,按《中国药典》叁部(2015版)相关方法检测纯化样品的蛋白含量、内毒素含量、抗原含量,并进行SDS-PAGE分析。结果使用Triton法和离子交换层析法均可以将FHA和PT这两种成分的内毒素在脱毒前阶段降低至200 EU/mg以下。在合适的纯化条件下使用离子层析去除内毒素的能力高于Triton法,而在对抗原的回收率上Triton法又稍占优势。结论使用Triton法和离子交换层析法均可解决FHA和PT去除内毒素的问题,两类工艺下对目的蛋白活性的影响有待进一步研究。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年05期）
周菲惠[8]（2018）在《百日咳毒素在脑卒中后对小胶质细胞作用及机制的研究》一文中研究指出[目的]探讨百日咳毒素(pertussis toxin,PTx)对缺血性脑卒中后小胶质细胞的调节作用及其可能的机制。[方法]分为体外、体内两部分实验。体内部分:建立小鼠大脑中动脉线栓(Middle Cerebral Artery Occlusion,MACO)卒中模型,随机分为叁组,每组12只鼠。治疗组:建立卒中模型后,予PTx400ng/d,溶于lml生理盐水腹腔注射干预,连续干预叁天;对照组:建立卒中模型后,每日予lml生理盐水腹腔注射;假手术组:每日予lml生理盐水腹腔注射。分别在24、48和72h进行行为学评分,统计分析小鼠神经功能的损伤和修复情况。72h进行TTC染色检测梗死面积,并行免疫组化检测细胞凋亡及小胶质细胞的分布和激活,同时,采用Western blot实验定量检测细胞凋亡及小胶质细胞。体外部分:培养原代小胶质细胞,用脂多糖(LPS)刺激模拟卒中后小胶质细胞状态。随机分为叁组,治疗组:LPS刺激后予PTx50ng/ml/d进行干预,连续干预叁天;对照组:LPS刺激后每日予相同体积细胞培养基,正常对照组:每日予相同体积细胞培养基。用MTT及SRB实验检测百日咳毒素对卒中后小胶质细胞的存活和损伤的调节。ELISA实验检测百日咳毒素对卒中后小胶质细胞毒性因子释放的影响;细胞免疫荧光法检测百日咳毒素对卒中后小胶质细胞CX3CR1表达的调节。[结果]百日咳毒素治疗可减轻卒中后小鼠脑梗死面积,使之由52±12%降至34±8%(P<0.05),并且可以加快神经功能损伤的修复,在72h时,LONGA评分由2.2分降至1.8分,而对照组仅由2.3分降至2.2分。免疫组织化学检测发现百日咳毒素可减轻脑卒中细胞凋亡,使Caspase-3阳性细胞数由对照组的83± 18个/mm2减少至52 ± 16个/Mm2(P<0.05)。免疫组织化学检测还发现百日咳毒素还可减少小胶质细胞在梗死区的聚集和活化,Ibal阳性细胞数由对照组的 183±46 个/m2减少至 63±22 个/mm2(P<0.05)。Western blot 也得到了与免疫组化实验一致的结果,在患侧鼠脑内,百日咳毒素的治疗显着降低了Caspase-3 的表达,条带灰度由 1.2±0.2 降至 0.78±0.06(p<0.05)。PTx的治疗也减少了小胶质细胞在梗死区的聚集,条带灰度由1.1 ±0.16降至0.79±0.09(p<0.05)。体外MTT结果提示百日咳毒素减少LPS刺激后小胶质细胞的增殖,吸光值由0.151±0.001降至0.088±0.001(P<0.05);SRB的检测也得出相似的结果,百日咳毒素治疗后,吸光值由0.462±0.018降至0.426±0.02。ELISA实验结果显示:PTx还可减少IL-1β和TNF-α的释放,使吸光值分别由0.165±0.001降至0.091±0.0004和0.75±0.003降至0.46±0.005(P<0.05)。并且PTx可减少CX3CR1在小胶质细胞上的表达,免疫荧光实验显示百日咳毒素治疗后,小胶质细胞CX3CR1表达的荧光强度减弱,由 0.043±0.003 降低至 0.025±0.003(p<0.05)。Western blot 结果也提示CX3CR1 的表达降低,灰度值由 0.38±0.05 降至 0.29±0.04(p<0.05)。[结论]用百日咳毒素治疗脑卒中,可通过降低趋化因子CX3CR1的表达,减少小胶质细胞在梗死区的聚集,减弱增殖能力,减少其对IL-1β和TNF-α的分泌,使卒中后脑梗面积缩小,神经功能恢复加快,对脑起到保护作用。(本文来源于《昆明医科大学》期刊2018-05-01）
陈元芬,马礼耕,吴强,王文,王宇[9]（2018）在《百日咳杆菌无动物源培养基的筛选及其对百日咳毒素和丝状血凝素产量的影响》一文中研究指出目的确定百日咳杆菌无动物源培养基最佳配方,并检测其对百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)产量的影响。方法分别按一定比例混合使用或单独使用无动物源蛋白Hy Pep5603(小米和小麦蛋白)、精选大豆胨,替代培养基中动物源性成分(酸水解酪蛋白)作为氮源,进行百日咳杆菌摇瓶培养,比较细菌生长密度和产物生产量。以最高PT和FHA产量为参考标准,确定最佳培养基配方。用该配方与动物源培养基对比,进行4批30 L百日咳杆菌发酵培养;发酵液处理后,用离子交换层析分离PT和FHA样品,ELISA法测定各样品中PT和FHA的蛋白含量,SDS-PAGE法检测产物的相对分子质量大小。结果由无动物氮源Hy Pep56034.0 g/L、精选大豆胨6.0 g/L加改良SS培养基组成的培养基,摇瓶培养百日咳杆菌后最高A550为3.8,发酵百日咳杆菌后最高A550为5.8,均能有效地供菌体生长,且优于单独使用动物源或无动物源培养基;用该配方发酵百日咳杆菌并纯化,获得PT的产量约为5.7 mg/L,FHA产量约为23.0 mg/L,均高于用动物源培养基培养后的产物,且相对分子质量大小一致。结论用含Hy Pep5603 4.0 g/L、精选大豆胨6.0 g/L的无动物源培养基培养百日咳杆菌,可替代动物源培养基,用于PT和FHA的生产。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年02期）
李鑫,张新创,谢贵林[10]（2018）在《百日咳毒素的研究进展》一文中研究指出百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)是鲍特菌属百日咳杆菌产生的一种主要毒力因子,具有多种生物学活性,其为引起百日咳众多临床症状的主要因素,同时也是无细胞百日咳疫苗(acellular pertussis vaccine,APV)中唯一不受争议的抗原成分。本文就PTX的分子结构、生物学活性及其在疫苗中的应用作一综述。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年02期）
百日咳毒素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立吸附无细胞百白破联合疫苗中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的ELISA测定方法,并进行验证及应用。方法以PT作为检测抗原,用高效价鼠单抗和相应的兔多抗建立双抗体夹心ELISA,确定方法的线性范围、重复性、准确性、专属性等,并进行初步应用。结果 PT质量浓度在2.5～80.0 ng/m L时线性良好,决定系数R2>0.98。该方法与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒原液、甲肝疫苗原液、乙肝疫苗原液、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、百日咳丝状血凝素(filamantous hemagglutinin,FHA)、黏着素(pertactin,PRN)均无明显交叉反应,重复性好,专属性较强,其他均符合常规质控要求。该抗原检测系统对生产具有指导意义,并可以正确反映原液及成品中PT的稳定性。结论建立了PT双抗体夹心ELISA检测方法,为吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中PT含量的质量控制提供有效的技术手段。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
百日咳毒素论文参考文献
[1].王巍巍,刘波,王治伟,程会欣,马国涛.CHO细胞法检测百日咳毒素毒性的影响因素[J].微生物学免疫学进展.2019
[2].程会欣,王丽婵,张立志,卫辰,骆鹏.百日咳毒素抗原检测系统的建立及其应用[J].微生物学免疫学进展.2018
[3].高娜,梁疆莉,姬秋彦,顾琴,马艳.CHO细胞簇集法与小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性的相关性[J].昆明医科大学学报.2018
[4].卫辰,晁哲,吴燕,王丽婵,骆鹏.第2代WHO百日咳毒素国际标准品的协作标定[J].中国新药杂志.2018
[5].周菲惠,李智高,王进昆,张申,刘畅.百日咳毒素减轻脑缺血后神经元钙内流的实验研究[J].国际神经病学神经外科学杂志.2018
[6].卫辰,晁哲,王丽婵,吴燕,张霖阳.第1代百日咳毒素国家参考品的标定[J].中国生物制品学杂志.2018
[7].姬秋彦,高娜,梁疆莉,胡文着,顾琴.去除百日咳毒素、丝状血凝素中内毒素的工艺探索[J].中国生物制品学杂志.2018
[8].周菲惠.百日咳毒素在脑卒中后对小胶质细胞作用及机制的研究[D].昆明医科大学.2018
[9].陈元芬,马礼耕,吴强,王文,王宇.百日咳杆菌无动物源培养基的筛选及其对百日咳毒素和丝状血凝素产量的影响[J].中国生物制品学杂志.2018
[10].李鑫,张新创,谢贵林.百日咳毒素的研究进展[J].中国生物制品学杂志.2018
论文知识图
