导读:本文包含了噬菌体随机肽库筛选论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:噬菌体展示随机肽库,PD-L1,病毒粒子,免疫荧光技术
噬菌体随机肽库筛选论文文献综述
何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏[1]（2019）在《利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽》一文中研究指出研究目的:癌症是致犬死亡的常见病之一。目前治疗犬肿瘤的方法有手术、化疗和放疗。除此之外现已开发出了一些针对免疫检查点的靶向抗体药物,并在体外和体内进行了测试,如程序性细胞死亡受体1(Programmed cell death protein 1,PD-1),它是一种重要免疫抑制分子。PD-L1(programmed death ligand 1,CD274)是PD-1的天然配体。PD-1/PD-L1结合激活通路后,在癌症、病毒感染、器官移植方面会抑制免疫系统发挥功能。阻断PD-1和PD-L1(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
逯晓青[2]（2018）在《利用噬菌体随机肽库筛选膀胱癌EJ细胞导向肽的实验研究》一文中研究指出目的:利用噬菌体随机七肽库体外筛选能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供理论基础。方法:以膀胱癌细胞系EJ为靶细胞,人正常膀胱移行上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体随机七肽库进行3轮体外减性筛选;随机挑取30个阳性噬菌体克隆,用ELISA法鉴定其与EJ细胞结合的特异性;对阳性噬菌体克隆进行测序分析;采用固相化学合成法制备EJ细胞导向肽及其对照肽;通过MTT试验和细胞损伤修复实验研究该膀胱肿瘤导向肽对EJ细胞生长的影响。结果:1、经过3轮“筛选-扩增-再筛选”,与EJ细胞特异结合的噬菌体得到高度富集,回收率也增加了近200倍。2、ELISA法鉴定结果显示,特异性结合系数≥2的阳性噬菌体克隆共有17个。3、测序结果显示,其中R2、R5、R9、R12、R16、R17、R21、R24八个噬菌体克隆的序列均为AVEAAKT,该肽段重复率最高且无同源性。4、制备了EJ细胞导向肽AVEAAKT及其对照肽,纯度达95%。5、MTT试验结果显示,该膀胱肿瘤导向肽及其对照肽的相对抑制率均低于30%,细胞损伤修复实验结果显示,单位时间内,各组细胞表现出相同的生长趋势,从而证实了该膀胱肿瘤导向肽对EJ细胞的生长几乎无影响。结论:本实验利用噬菌体展示技术体外筛选获得了能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽AVEAAKT,并证实了该多肽对EJ细胞的生长几乎无影响。经查该肽段与已知蛋白尚无同源性,因此它很有可能为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供新的思路。(本文来源于《山西医科大学》期刊2018-06-15）
吴凡,庄乃保,张印则,徐华,周华友[3]（2016）在《随机噬菌体肽库筛选血型D抗原模拟多肽方案的建立及初步验证》一文中研究指出目的探讨随机噬菌体十二肽库筛选血型D抗原模拟多肽的影响因素,以建立最佳筛选方案。方法对比洗脱时间分别为4、8、12、16和30 min的洗脱液滴度;3轮清洗缓冲液中Tween 20浓度分别为0.1%、0.2%、0.5%和分别为0.1%、0.5%、0.5%时每轮淘洗的投入/产出比,以及3轮封闭缓冲液均为0.5%BSA和分别为0.5%BSA、1%明胶、5%脱脂奶时每轮淘洗的投入/产出比,以分析筛选效果,得出最佳筛选方案。对采用最佳筛选方案筛选得到的阳性克隆测定其DNA序列和做抗体竞争抑制试验检测D抗原模拟表位。结果洗脱8 min时洗脱液滴度为(2.31±0.25)×10~6pfu/m L,洗脱4、12、16和30 min时的洗脱液滴度与之相比明显下降(P<0.01)。当洗脱时间为8 min且3轮封闭缓冲液均为0.5%BSA时,3轮淘洗清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.5%、0.5%时投入/产出比分别为1.69×10~7、4.95×10~5、9.58×10~2,与清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.2%、0.5%时投入/产出比分别为2.70×10~7、4.57×10~5、1.14×10~3相比,对筛选效果影响不大。当洗脱时间为8 min且3轮淘洗清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.5%、0.5%时,3轮封闭缓冲液分别为0.5%BSA、1%明胶、5%脱脂奶时投入/产出比分别为1.93×10~7、6.44×10~3、6.23×10~1,明显优于3轮淘洗封闭缓冲液均为0.5%BSA时的投入/产出比(分别为1.94×10~7、1.66×10~5、8.23×10~2)。通过优化方案筛选得到1个抑制率约为50%的十二肽序列"VHWDFRQWWQPS"。结论洗脱时间、清洗缓冲液成分以及封闭缓冲液类型对筛选效率有一定影响。洗脱时间为8 min,3轮淘洗的清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.5%、0.5%和3轮淘洗的封闭缓冲液分别为0.5%BSA、1%明胶、5%脱脂奶粉时,筛选效果较优,可获得较理想的血型D抗原模拟多肽。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2016年08期）
叶存栋,胡静思,贾坤,李陆涛,刘荣昌[4]（2015）在《从噬菌体随机七肽库中筛选抗H3N2亚型犬流感病毒多肽的研究》一文中研究指出【目的】以纯化的H3N2亚型犬流感病毒HA1蛋白为作用靶点,从噬菌体随机七肽库中筛选出具有抗流感病毒活性的亲和多肽.【方法】运用噬菌体展示技术,以纯化的H3N2亚型犬流感病毒HA1蛋白为作用靶点,从噬菌体随机七肽库中筛选HA1蛋白亲和多肽,并对获得的多肽进行鸡胚水平和细胞水平抗H3N2亚型流感病毒活性验证.【结果和结论】经过4轮体外亲和筛选获得了6条HA1蛋白亲和多肽,6条多肽对H3N2亚型流感病毒有不同程度的抗病毒活性,其中以HA-4的抗病毒活性最强.试验结果表明噬菌体随机肽库技术能够应用于抗病毒研究.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2015年05期）
尹可欣,迟象阳,任军,房婷,刘树玲[5]（2015）在《应用噬菌体随机肽库技术筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原中和性表位》一文中研究指出目的:筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原的中和性表位,构建基于鞭毛蛋白佐剂的重组表位疫苗。方法:利用鼠疫菌F1抗原的中和抗体F2H5筛选噬菌体随机12肽库,对得到的阳性克隆采用ELISA进行特异性鉴定,采用竞争抑制ELISA确定具有竞争性的噬菌体单克隆并对其DNA测序,重组表达并纯化获得肽序列与截短型鞭毛蛋白Fli Cdel的融合蛋白,并通过Western印迹和ELISA鉴定重组蛋白与F2H5的结合。结果:获得了2株能够与F1抗原竞争结合F2H5的噬菌体单克隆12-1和12-14,其中12-14的竞争能力较强;通过序列比对,并没有发现这2株噬菌体克隆的插入肽序列与F1抗原序列存在一致性,但这2个插入肽序列与Fli Cdel的重组蛋白在Western印迹和ELISA结果中均显示出能够被抗F1的单克隆抗体识别。结论:F1中和性抗体筛选出的肽序列与截短的鞭毛蛋白融合表达后能够被F2H5特异性识别,为进一步对重组表位抗原进行免疫保护评价奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2015年04期）
邢锦城,张旭,马鸿翔,徐海,侯继波[6]（2015）在《运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段》一文中研究指出为获得与毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)高亲和力的特异性多肽,利用丁基硼酸封闭法制备DON人工抗原DON-HG-BSA,以其为靶分子筛选噬菌体肽库,对阳性克隆进行DNA序列测定与氨基酸推导,并进行亲和特异性验证。结果显示,经过4轮亲和肽段筛选与酶联免疫检测法鉴定,从M13噬菌体随机7肽库中得到15个DON人工抗原包被孔与牛血清白蛋白包被孔OD比值大于3.8的阳性克隆,其中10个与DON人工抗原高亲和力结合的阳性克隆经测序后共推导出4种多肽序列。经抗原梯度酶联免疫检测法验证,多肽MAPGWVP与DON人工抗原浓度的相关性高达0.99,对人工抗原具有高亲和力。该多肽的获得将为进一步开发高效的DON诊断试剂盒奠定基础。(本文来源于《植物保护学报》期刊2015年02期）
张晓雨[7]（2015）在《噬菌体随机肽库筛选亲铬噬菌体及其在Cr(Ⅲ)分离富集中的应用》一文中研究指出本研究首先利用Ni-NTA亲和树脂制备了不同金属离子的亲和树脂,以NEB噬菌体七肽文库为作用对象,通过多轮正筛选和负筛选,去除对其他金属离子(Fe、Zn、Cu、Cd、Hg)有结合作用的噬菌体,保留对Cr(Ⅲ)具有亲和能力的噬菌体并采用适当洗脱剂(0.5 MEDTA)洗脱,在亲铬噬菌体中随机挑选一定个数亲铬多肽序列,并通过免疫亲和法筛选得到最佳多肽序列。随后,将该亲铬噬菌体通过静电作用固定化于细胞培养微载体Cytopore上,以固定化亲铬噬菌体为固相吸附材料对Cr(Ⅲ)进行定量吸附,并以稀硝酸为洗脱剂进行洗脱,以实现对Cr(Ⅲ)的分离富集。在pH 7.0时,以Cytopore微珠去除Cr(Ⅵ),再利用固定化亲铬噬菌体对Cr(Ⅲ)进行富集,0.1 mol L-1的HN03进行洗脱后,ICP-MS进行检测。Cr(Ⅵ)通过预还原测总铬含量后差减法求得。在最佳条件下,当样晶体积为4000 μL,洗脱体积为400μL时,本方法测定Cr(Ⅲ)的检出限为0.015μgL-1(3σ,n =7),精密度为3.6%(0.25μgL-1,n=7),线性范围为0.05-0.50μgL-1,富集倍率为7.1。对国家一级标准物质GBW08608(模拟水样)中的铬进行测定,测量值与标准值相符,对实际水样中的铬进行形态分析及加标回收,结果令人满意,证明此方法准确可靠。(本文来源于《东北大学》期刊2015-06-01）
刘美红[8]（2015）在《随机噬菌体12肽库筛选宫颈癌患者血清肿瘤标志物的初步研究》一文中研究指出背景宫颈癌在发展中国家上升为第2位女性常见的恶性肿瘤,仅次于乳腺癌。据世界卫生组织估计,在宫颈癌每年新发病例数中,中国约占世界总发病数的28%。已严重威胁中国女性健康,造成社会的重大负担。但宫颈癌早期发现后及时治疗效果显着、预后良好。有文献报道早期宫颈癌的5年生存率可达92%,因此宫颈癌的早发现、早期诊断和治疗是非常重要的。目前宫颈癌的诊断方法包括传统的宫颈涂片细胞学检查、阴道镜检查和组织学检查。一定程度上提高了宫颈癌在早期的诊断,但这些方法依然仍有各自的缺陷,如巴氏涂片检查灵敏度低,阴道镜检查难以检查到细小的病灶,组织活检的依从性差等。近年血清肿瘤标志物如糖链抗原199(CA199)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)、血清糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)已作为宫颈癌的辅助检测项目,但其总的灵敏度和特异度并不高。所以寻找一种针对早期宫颈癌其灵敏度和特异度都高的血清肿瘤标志物非常重要。Smith发明的噬菌体展示技术(PDT)对寻找肿瘤血清标志物提供了条件,本研究利用PDT,以早期宫颈癌患者血清为靶分子,可能筛选出与宫颈癌患者血清特异性结合的短肽。目的用随机噬菌体12肽库对宫颈癌患者血清进行叁轮差异性淘选,找出能与宫颈癌患者血清特异性结合的阳性噬菌体株,通过扩大样本和与不同种类的肿瘤患者血清进行再鉴定,挑出与早期宫颈癌患者血清特异结合且亲和力最高的噬菌体株,将其提取单链DNA后进行测序得到相应短肽,为宫颈癌的早期诊断提供新的肿瘤标志物,为进一步寻找宫颈癌相关肿瘤标志物奠定了基础。方法 1.采取6例正常人血清及6例早期宫颈癌患者新鲜血清分别混合包被在96孔酶标板中(两孔正常人血清,一孔宫颈癌患者血清),进行叁轮差异性筛选,每轮都先将噬菌体肽库与前两孔正常人血清结合,再将剩余未结合噬菌体移至第叁孔与早期宫颈癌患者血清结合,结合后用洗脱液洗脱第叁孔与早期宫颈癌患者血清结合的噬菌体,并对其进行扩增,通过叁轮的筛选与扩增,与早期宫颈癌患者血清亲和力高的噬菌体得到富集,得到特异性结合的阳性噬菌体。2.用最后一轮筛选所得的噬菌体划板培养。在每块板上选取多个相对距离较远的单克隆噬菌体株,对其扩增,然后用筛选时的6例正常人血清及6例早期宫颈癌患者血清用ELISA法检测所选取的各单克隆噬菌体株与早期宫颈癌患者血清的亲和力,选取出颜色稳定且差别明显的几株阳性噬菌体。3.再扩大样本含量检测所筛选出的噬菌体对早期宫颈癌患者血清的亲和力,挑选出与早期宫颈癌患者血清结合亲和力最好的噬菌体株。4.对挑选出的阳性噬菌体株提取其单链DNA进行测序,再根据遗传密码表得到相应的短肽。结果 通过叁轮筛选,与宫颈癌患者血清结合的噬菌体富集率逐轮提高,提高近100倍。挑取单个噬菌体株后经反复ELISA验证后得到特异性较好的7号噬菌体株。7号噬菌体克隆行ELISA检测6例正常人血清及6例宫颈癌患者血清,结果显示正常人组OD值为0.056±0.010,宫颈癌组为0.151±0.040,P<0.05,差异有统计学意义；7号噬菌体克隆行ELISA检测50例正常人血清及50例宫颈癌患者血清,结果显示正常人组OD值为0.070±0.023,宫颈癌组为0.157±0.040,P<0.05,差异有统计学意义；ELISA验证7号噬菌体克隆分别与8例宫颈癌患者血清、8例CIN患者血清、8例卵巢癌患者血清及8例正常人血清行ELISA检测,结果显示宫颈癌患者组OD值为0.174±0.018,卵巢癌组为0.052±0.007,CIN组为0.076±0.010,正常人组为0.052±0.006,宫颈癌组与其他组差异有统计学意义。分析7号噬菌体ROC曲线下面积为0.956,P<0.0001,有统计学意义,ROC曲线下面积95%的可信区间为[0.896,0.987]；Medcalc软件分析其特异度为94%及敏感性为84%;7号噬菌体测序结果为：5'-ATG CAC CGG ACG CGT CAG CGA ACC ATT CGT AGC CGA-3',氨基酸序列为：SATNGSLTRPVH。7号噬菌体克隆的DNA序列与鼠类、人类行同源核酸比对,未见其同源序列；将7号噬菌体克隆的氨基酸序列进行比对,未发现与该氨基酸同源的蛋白结构,与已知的蛋白多肽序列的相似性也不高。结论：可能淘选出与早期宫颈癌患者血清特异结合且高亲和力的短肽,为以后研究宫颈癌肿瘤标志物及宫颈癌的早期诊断、预后及复发监测奠定了基础,也有助于宫颈癌发生发展机制的研究。(本文来源于《广西医科大学》期刊2015-05-01）
杨森[9]（2014）在《应用噬菌体随机肽库筛选阴道毛滴虫特异性B细胞表位》一文中研究指出背景与目的阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis, Donne1837),是一种主要寄生于人体泌尿生殖道的鞭毛虫,它所引起的阴道毛滴虫病是常见的性传播疾病之一,据WHO统计,全球每年约有1.8亿人感染阴道毛滴虫,同时阴道毛滴虫的广泛流行还增加了HIV病毒和支原体的感染率。目前对于阴道毛滴虫病的快速诊断方法的灵敏度及特异度有限,阴道毛滴虫疫苗的研发工作也相对滞后。本研究运用分子生物学、免疫学和生物信息学的方法技术,运用噬菌体随机7肽库淘选阴道毛滴虫的特异性B细胞表位,并对淘选结果进行免疫原性,敏感性及特异性检测,旨在为阴道毛滴虫病的快速诊断方法及未来疫苗的研发提供理论基础。材料与方法1.将采集到的阴道毛滴虫临床分离株(取自于郑州大学第五附属医院检验科)接种于TYM培养基进行连续培养,达到纯培养后将虫体分别制作为全虫抗原和冻存。2.将全虫抗原经背部皮下多点注射免疫实验用兔(购自于河南省实验动物中心),每隔2w加强免疫2次,末次免疫后ELISA检测抗体效价,达标后采集、分离并纯化免疫血清,并进一步经Western-Blot和间接免疫荧光检测其免疫原性。3.以纯化后兔抗阴道毛滴虫IgG对噬菌体随机7肽库(购自于美国NEB公司)进行3轮的亲和淘选,ELISA检测淘选结果,并将阳性噬菌体克隆送往生物公司进行测序,将测序结果分别与Genbank上的阴道毛滴虫已知蛋白序列进行比对,并在Protscale在线服务器进行相关生物信息学分析。4.将选取的阳性噬菌体克隆经背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠(购自于河南省实验动物中心),并同时设立阳性对照、阴性对照及溶剂对照,每隔7d免疫1次,共免疫3次。末次免疫后采集并分离免疫血清,进行ELISA和Western-Blot检测免疫原性,并通过间接免疫荧光试验研究阳性噬菌体展示肽的虫体定位。5.建立阴道毛滴虫小鼠皮下感染模型,每日观察脓肿形成情况及脓液中活虫的数量。以感染血清通过ELISA的方法检测阳性噬菌体克隆的敏感性及特异性。6. ELISA检测阳性噬菌体表位肽免疫小鼠血清中细胞因子IL-4和IFN-y的水平。结果1.阴道毛滴虫在48h左右达到最高生长密度,36～48h为其对数生长期,连续培养3代后即达到纯培养。SDS-PAGE结果表明全虫抗原的蛋白条带分布在10～150kDa之间,其中30-70kDa之间的蛋白条带最为密集。2. ELISA检测的结果显示阴道毛滴虫全虫抗原经免疫实验用兔后可引起较强的免疫反应,产生的抗体滴度大于1：106。Western-Blot发现共有15条的全虫抗原的蛋白成分可被兔免疫血清识别,比小鼠免疫血清多出3条。免疫荧光染色的结果表明虫体可与全虫抗原的兔免疫血清发生免疫反应,呈现红色荧光。3.经过3轮的亲和淘选,共得到14个阳性噬菌体克隆,P1～P14。P1～P14与Genbank上已知的阴道毛滴虫蛋白序列无一级结构的相似性。综合噬菌体ELISA及Protscale在线服务器的生物信息学分析结果,P3、P5和P11的免疫原性相对较强。4. ELISA结果表明P3、P5、P11免疫BALB/c小鼠后都能够引起较强的免疫反应,差异有统计学意义(P<0.05)。Western-Blot的结果显示P11噬菌体克隆的免疫血清可以特异性识别全虫抗原在42kDa左右的蛋白条带。免疫荧光染色结果表明P3和P5免疫血清组的虫体呈现出较弱的绿色荧光,而P11免疫血清组则在虫体的膜部呈现出亮绿荧光。5.皮下接种活虫的小鼠可出现脓肿,在脓液中10d内可检出活虫。ELISA结果表明P3、P5和P11均具有较强的特异性(P<0.05),P11的敏感性为1μg/ml,P3的敏感性为2μg/ml,P5的敏感性为3μg/ml。6. ELISA结果表明P3、P5和P11免疫完成后1w时小鼠血清中IL-4和IFN-γ的水平均高于M13组和PBS组(P<0.05),IL-4的升高较为显着,P3、P5和P11这3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.阴道毛滴虫全虫抗原具有良好的免疫原性,其兔免疫血清具有较高的抗体滴度。2.应用噬菌体随机7肽库淘选出14个阴道毛滴虫模拟B细胞表位。其中P3、P5和P11具有良好的免疫原性,并具有较强的特异性及敏感性,提示这些模拟表位在研制特异性诊断试剂方面可能有潜在应用价值。3.P3、P5和P11免疫小鼠后可以使小鼠产生体液免疫及细胞免疫,以体液免疫为主。(本文来源于《郑州大学》期刊2014-05-01）
冯倩,刘燕倩,孙航,刘杞[10]（2014）在《利用噬菌体随机肽库筛选人肝再生增强因子特异结合肽及其抗肝癌作用的研究》一文中研究指出目的利用噬菌体随机肽库筛选人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)特异结合肽并研究其抗肝癌作用。方法以hALR为靶分子,利用Ph.D.TM噬菌体肽展示系统筛选出与hALR特异性结合的单克隆噬菌体,ELISA法鉴定筛选出的单克隆噬菌体与hALR的结合性,对特异性结合噬菌体DNA中插入片段进行PCR扩增、测序及短肽合成,MTS法检测特异结合肽对人HepG2肝癌细胞增殖的影响,观察特异结合肽对裸鼠人HepG2肝癌移植瘤生长的影响。结果经过3轮生物淘筛,特异性结合噬菌体得到富集;筛选到的单克隆噬菌体与hALR结合具有特异性(与对照组比较P<0.05);特异结合肽在体外能抑制人HepG2肝癌细胞增殖(24 h抑制率为46.2%vs 6.5%,P<0.01;48 h抑制率为23.6%vs 5.9%,P<0.05),在体内能抑制裸鼠人HepG2肝癌移植瘤生长[(1.250±0.512)cm3vs(4.590±0.398)cm3,P<0.01;(1.100±0.453)g vs(3.794±0.299)g,P<0.01];该特异结合肽免疫小鼠后机体内无相应抗体检出,且对裸鼠的重要脏器组织结构及功能无明显损害。结论利用噬菌体肽库筛选到hALR特异结合肽,该短肽通过阻断hALR促肝癌细胞增殖作用,能抑制人HepG2肝癌细胞在体内外增殖,达到抗肝癌的作用,同时产生较低的免疫原性及毒性损害。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2014年06期）
噬菌体随机肽库筛选论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:利用噬菌体随机七肽库体外筛选能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供理论基础。方法:以膀胱癌细胞系EJ为靶细胞,人正常膀胱移行上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体随机七肽库进行3轮体外减性筛选;随机挑取30个阳性噬菌体克隆,用ELISA法鉴定其与EJ细胞结合的特异性;对阳性噬菌体克隆进行测序分析;采用固相化学合成法制备EJ细胞导向肽及其对照肽;通过MTT试验和细胞损伤修复实验研究该膀胱肿瘤导向肽对EJ细胞生长的影响。结果:1、经过3轮“筛选-扩增-再筛选”,与EJ细胞特异结合的噬菌体得到高度富集,回收率也增加了近200倍。2、ELISA法鉴定结果显示,特异性结合系数≥2的阳性噬菌体克隆共有17个。3、测序结果显示,其中R2、R5、R9、R12、R16、R17、R21、R24八个噬菌体克隆的序列均为AVEAAKT,该肽段重复率最高且无同源性。4、制备了EJ细胞导向肽AVEAAKT及其对照肽,纯度达95%。5、MTT试验结果显示,该膀胱肿瘤导向肽及其对照肽的相对抑制率均低于30%,细胞损伤修复实验结果显示,单位时间内,各组细胞表现出相同的生长趋势,从而证实了该膀胱肿瘤导向肽对EJ细胞的生长几乎无影响。结论:本实验利用噬菌体展示技术体外筛选获得了能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽AVEAAKT,并证实了该多肽对EJ细胞的生长几乎无影响。经查该肽段与已知蛋白尚无同源性,因此它很有可能为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供新的思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体随机肽库筛选论文参考文献
[1].何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏.利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[2].逯晓青.利用噬菌体随机肽库筛选膀胱癌EJ细胞导向肽的实验研究[D].山西医科大学.2018
[3].吴凡,庄乃保,张印则,徐华,周华友.随机噬菌体肽库筛选血型D抗原模拟多肽方案的建立及初步验证[J].中国输血杂志.2016
[4].叶存栋,胡静思,贾坤,李陆涛,刘荣昌.从噬菌体随机七肽库中筛选抗H3N2亚型犬流感病毒多肽的研究[J].华南农业大学学报.2015
[5].尹可欣,迟象阳,任军,房婷,刘树玲.应用噬菌体随机肽库技术筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原中和性表位[J].生物技术通讯.2015
[6].邢锦城,张旭,马鸿翔,徐海,侯继波.运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段[J].植物保护学报.2015
[7].张晓雨.噬菌体随机肽库筛选亲铬噬菌体及其在Cr(Ⅲ)分离富集中的应用[D].东北大学.2015
[8].刘美红.随机噬菌体12肽库筛选宫颈癌患者血清肿瘤标志物的初步研究[D].广西医科大学.2015
[9].杨森.应用噬菌体随机肽库筛选阴道毛滴虫特异性B细胞表位[D].郑州大学.2014
[10].冯倩,刘燕倩,孙航,刘杞.利用噬菌体随机肽库筛选人肝再生增强因子特异结合肽及其抗肝癌作用的研究[J].第叁军医大学学报.2014