导读:本文包含了子房注射法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:子房,转基因,杆菌,石斛,南瓜,胚囊,棉花。
子房注射法论文文献综述
张莉,王佳,郑枫,吴坤林,房林[1](2018)在《子房注射法转化‘紫宝石’蝴蝶兰的研究》一文中研究指出采用子房注射法对‘紫宝石’蝴蝶兰进行外源DNA导入研究,结果表明:不同时期注射和不同注射处理方式对‘紫宝石’蝴蝶兰的落果率影响不同,对胚座组织和种子的GUS染色率的影响也不同,在授粉后65 d时,以2%DMSO为缓冲液,注射400μg/mL浓度质粒,种子的GUS染色率最高达6.14%。选取各注射时期无菌播种后获得的1 000个原球茎,经系列浓度的潮霉素筛选,结果发现授粉后65 d注射时获得的抗性植株最多,为31株,转化率为3.1%。切取转化植株幼叶及幼根进行GUS检测,均为阳性;随机挑选7株幼苗进行PCR检测,均能扩增出GUS基因和HPT基因条带,说明外源基因已经整合到植株的基因组内。此研究为兰科植物育种提供了一种简单高效的途径。(本文来源于《热带作物学报》期刊2018年04期)
邓莹[2](2015)在《子房注射法转化金钗石斛初步研究》一文中研究指出金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)是兰科石斛属植物,具有重要的观赏和药用价值,在市场上十分畅销,同时还是许多观赏石斛的育种亲本。但从其试管苗移栽至开花的时间较长,为了缩短金钗石斛的幼年期并使其提早开花,本实验采用子房注射法进行了将调控植物开花的FT基因转入其中的遗传转化研究。主要研究结果如下:1.为了选择最适的子房注射期,对金钗石斛胚囊发育过程进行了研究。通过人工授粉实验,确定异株异交的授粉座果率最高,达到了24.57%,高于自交和同株异交。通过石蜡切片和半薄切片技术观察发现,授粉后30d左右孢原细胞分化;35d左右分化成大孢子母细胞,且内外珠被开始发育;43d左右大孢子母细胞开始第一次减数分裂,形成二分体;45d左右第二次减数分裂形成四分体;48d左右第一次有丝分裂形成二核胚囊。2.利用子房注射法在授粉后不同时期将外源基因转入金钗石斛子房内部,在授粉后48d~60d注射外源基因,其座果率保持不变,均为77.78%;金钗石斛在授粉后50d注射外源基因,对种子的活力影响最大,TTC染色率最低;金钗石斛在授粉后50d~60d注射外源基因,其种子萌发率较高,与未注射处理的种子萌发率相差不大。3.随机选取各处理种子用β-葡萄糖醛酸酶基因(GUS)化学染色液进行转基因检测,发现在授粉后46d和50d注射外源基因,种子GUS染色率高于其他处理;将各处理原球茎依次通过20μg/ml→40μg/ml→20μg/ml的3轮潮霉素筛选,对存活下来的203株幼苗进行GUS染色初步检测发现金钗石斛在授粉后注射外源基因所得幼苗的GUS最高的处理为48d,染色率为26.56%,其次是授粉后55d处理;通过PCR分子检测,金钗石斛在授粉后48d~60d注射外源基因,其幼苗GUS基因和HPT基因的转化率较高,均达到30%以上,其中授粉后55d处理的转化率最高,为36.4%;FT基因在所有处理中转化率为0。金钗石斛子房注射法的最佳注射时间是授粉后55d。(本文来源于《仲恺农业工程学院》期刊2015-04-27)
匡政成,张学文,肖才升,陈浩东,黄丽华[3](2014)在《农杆菌与质粒DNA子房注射法在棉花转基因研究中的应用》一文中研究指出为了研究农杆菌和质粒DNA两种子房注射法对普通棉花品种的转化效率,以8891棉花为材料,分别在叁亚和常德两地进行了转化试验。结果表明:与质粒DNA注射相比,叁亚地区农杆菌注射的转化效率高1.25个百分点;但农杆菌子房注射的落铃率高,获得的种子相对较少;而在不同的地点试验,常德地区的落铃率显着高于叁亚地区;而质粒DNA直接注射的成铃率更高,虽然转化率相对较低,但也能获得有效的转化植株。(本文来源于《湖南农业科学》期刊2014年04期)
邹颉,余婧,付强,李世升[4](2013)在《烟草子房注射法转基因试验》一文中研究指出为了快速获得转基因烟草,对烟株子房注射处于对数生长期的含有外源基因的根癌农杆菌菌液。结果表明:通过初步的50mg/L Kana抗性筛选及PCR检测,烟草子房注射法能成功获取转入的外源基因得到转基因烟草。烟草子房注射法与烟草叶盘转化法等常规转基因方法相比,子房注射法简化了试验过程,缩短了试验周期,提高了试验效率。(本文来源于《贵州农业科学》期刊2013年12期)
王佳,曾宋君,陈之林,吴坤林,张建霞[5](2013)在《子房注射法转化五唇兰的初步研究》一文中研究指出采用子房注射法成功地将外源DNA导入五唇兰。结果表明:外源DNA在转化植株成熟果实中种子的GUS染色率达6.7%,无菌播种后经潮霉素筛选,获得18株幼苗,每株幼苗切取幼叶及幼根进行GUS检测,均为阳性;随机挑选7株幼苗进行PCR检测,均能扩增出GUS基因和潮霉素抗性基因条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内。子房注射法在兰科植物转基因中的成功应用,可为兰科植物育种提供一种简单高效的途径。(本文来源于《热带作物学报》期刊2013年08期)
刘其府,董会,曾宋君,陈之林,吴坤林[6](2013)在《农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究》一文中研究指出对金钗石斛Dendrobium nobile进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60 d分别将工程化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明:子房注射对果实发育具有较大影响,在授粉后10~30 d进行子房注射后,果实脱落;在授粉后45 d进行子房注射,成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高,可达18%;无菌播种之后,经潮霉素筛选,获得11株幼苗,每株植株均表现出GUS染色反应;随机挑选4株幼苗进行PCR检测,发现均能扩增出预期条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用,可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2013年03期)
张言朝,葛宇,徐文龙,白玉娇,崔崇士[7](2012)在《南瓜子房注射法遗传转化的研究》一文中研究指出以南瓜品种银辉1号为受体材料,用子房注射法对148朵南瓜花进行了aiiA基因的遗传转化处理,共收获115个单瓜,结实率为77.7%。随机抽取56个单瓜,经0.2%Basta水溶液筛选和PCR鉴定,鉴定出7株阳性植株,均来自1个单瓜。再经PCR-SouthernBlot鉴定,结果显示均有杂交信号,表明aiiA基因已经整合到银辉1号南瓜基因组DNA中,转化率为0.25%,单瓜转化率为6.36%。(本文来源于《中国园艺学会南瓜分会籽用南瓜新品种展示及产业发展研讨会论文集》期刊2012-08-20)
张言朝,葛宇,于杨,徐文龙,白玉娇[8](2012)在《南瓜子房注射法遗传转化的研究》一文中研究指出以南瓜品种银辉1号为受体材料,用子房注射法对148个南瓜子房进行aiiA基因的遗传转化处理,共收获115个单瓜,结实率为77.7%。随机抽取56个单瓜,经0.2%Basta水溶液筛选和PCR鉴定,鉴定出7株阳性植株,均来自1个单瓜。再经PCR-Southern Blot鉴定,结果显示均有杂交信号,表明aiiA基因已经整合到银辉1号南瓜基因组DNA中,转化率为0.25%,单瓜转化率为6.36%。(本文来源于《中国蔬菜》期刊2012年16期)
彭珍子,赵燕,曾潜,黄丽华,陈浩东[9](2011)在《农杆菌子房注射法对棉花的活体转化》一文中研究指出采用根癌农杆菌直接注射子房,对8个棉花栽培品种进行活体方式的遗传转化。为了确立注射细菌的适宜时期,先采用含考马斯亮蓝染料的菌液对授粉前3d(-3 DPA,days post-anthesis)至授粉后2d(2DPA)的棉花子房进行注射,观察到细菌(染料)可以在-2 DPA至授粉后24 h之间进入子房。为了避免注射对花柱的损伤并影响授粉,选取授粉后24h已完成受精的子房,利用微量注射器经花柱将10μL约含1000个细菌细胞的农杆菌菌液注入子房。对8个棉花品种转化结果表明,该方法可以有效转化棉花。种子成熟后田间播种,经卡那霉素抗性筛选及PCR(Polymerase chain reaction)分子检测,转基因效率平均为2.78%,转化效率与受体的基因型无明显的相关性,相对组织培养的农杆菌转化法和DNA子房注射法有一定的优势。(本文来源于《棉花学报》期刊2011年04期)
樊继德,孔庆国,张梅,于喜艳[10](2006)在《子房注射法获得转基因甜瓜植株》一文中研究指出利用子房注射法将反义酸性转化酶基因(MAI)导入甜瓜果实,并对后代进行鉴定,PCR鉴定结果表明,330株甜瓜转化植株中,有2株扩增到了目的片段,转化率为 0.6%。转基因甜瓜生长势减弱,果实约比对照小30%左右,但果实糖含量比对照提高52%。(本文来源于《中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集》期刊2006-07-01)
子房注射法论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)是兰科石斛属植物,具有重要的观赏和药用价值,在市场上十分畅销,同时还是许多观赏石斛的育种亲本。但从其试管苗移栽至开花的时间较长,为了缩短金钗石斛的幼年期并使其提早开花,本实验采用子房注射法进行了将调控植物开花的FT基因转入其中的遗传转化研究。主要研究结果如下:1.为了选择最适的子房注射期,对金钗石斛胚囊发育过程进行了研究。通过人工授粉实验,确定异株异交的授粉座果率最高,达到了24.57%,高于自交和同株异交。通过石蜡切片和半薄切片技术观察发现,授粉后30d左右孢原细胞分化;35d左右分化成大孢子母细胞,且内外珠被开始发育;43d左右大孢子母细胞开始第一次减数分裂,形成二分体;45d左右第二次减数分裂形成四分体;48d左右第一次有丝分裂形成二核胚囊。2.利用子房注射法在授粉后不同时期将外源基因转入金钗石斛子房内部,在授粉后48d~60d注射外源基因,其座果率保持不变,均为77.78%;金钗石斛在授粉后50d注射外源基因,对种子的活力影响最大,TTC染色率最低;金钗石斛在授粉后50d~60d注射外源基因,其种子萌发率较高,与未注射处理的种子萌发率相差不大。3.随机选取各处理种子用β-葡萄糖醛酸酶基因(GUS)化学染色液进行转基因检测,发现在授粉后46d和50d注射外源基因,种子GUS染色率高于其他处理;将各处理原球茎依次通过20μg/ml→40μg/ml→20μg/ml的3轮潮霉素筛选,对存活下来的203株幼苗进行GUS染色初步检测发现金钗石斛在授粉后注射外源基因所得幼苗的GUS最高的处理为48d,染色率为26.56%,其次是授粉后55d处理;通过PCR分子检测,金钗石斛在授粉后48d~60d注射外源基因,其幼苗GUS基因和HPT基因的转化率较高,均达到30%以上,其中授粉后55d处理的转化率最高,为36.4%;FT基因在所有处理中转化率为0。金钗石斛子房注射法的最佳注射时间是授粉后55d。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
子房注射法论文参考文献
[1].张莉,王佳,郑枫,吴坤林,房林.子房注射法转化‘紫宝石’蝴蝶兰的研究[J].热带作物学报.2018
[2].邓莹.子房注射法转化金钗石斛初步研究[D].仲恺农业工程学院.2015
[3].匡政成,张学文,肖才升,陈浩东,黄丽华.农杆菌与质粒DNA子房注射法在棉花转基因研究中的应用[J].湖南农业科学.2014
[4].邹颉,余婧,付强,李世升.烟草子房注射法转基因试验[J].贵州农业科学.2013
[5].王佳,曾宋君,陈之林,吴坤林,张建霞.子房注射法转化五唇兰的初步研究[J].热带作物学报.2013
[6].刘其府,董会,曾宋君,陈之林,吴坤林.农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究[J].华南农业大学学报.2013
[7].张言朝,葛宇,徐文龙,白玉娇,崔崇士.南瓜子房注射法遗传转化的研究[C].中国园艺学会南瓜分会籽用南瓜新品种展示及产业发展研讨会论文集.2012
[8].张言朝,葛宇,于杨,徐文龙,白玉娇.南瓜子房注射法遗传转化的研究[J].中国蔬菜.2012
[9].彭珍子,赵燕,曾潜,黄丽华,陈浩东.农杆菌子房注射法对棉花的活体转化[J].棉花学报.2011
[10].樊继德,孔庆国,张梅,于喜艳.子房注射法获得转基因甜瓜植株[C].中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集.2006