论文摘要
目的评价轮状病毒（Rotaviruses,RVs）疫苗株Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白与组织血型抗原（histo-blood group antigens,HBGAs）基因融合的免疫效果。方法从GenBank获取Rotarix和RotaTeq两种疫苗VP8*蛋白基因序列,根据大肠埃希菌常用密码子进行序列优化后人工合成Rotarix和RotaTeqVP8*蛋白基因并采用PCR扩增合成的两种基因,引物上、下游分别引入Nde I和Xho I限制性内切酶酶切位点。将PCR产物及载体pET-30a用Nde I和Xho I双酶切,经1.5%琼脂糖凝胶电泳回收目的片段后在T4连接酶作用下连接,连接产物转化至DH5α感受态细胞并进行PCR鉴定,取阳性菌液提取质粒,经Nde I和Xho I双酶切鉴定正确后测序。将合成的基因序列与表达载体pET-30a连接后导入大肠埃希菌BL21（DE3）,加入IPTG诱导表达,经Ni2+beads亲和层析纯化得到VP8*-His融合蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析。利用寡糖结合试验检测目的蛋白与lea、lex、leb、ley、A、B、H1、H2 8种寡糖的结合特性,利用唾液结合试验检测VP8*蛋白与不同血型组织抗原表型唾液的结合特征。结果成功构建重组质粒,SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量约为26×103,与预期的分子质量相符合。寡糖结合试验显示Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白能与H1型HBGAs结合,唾液结合试验显示二者能与分泌型唾液结合而不与非分泌型唾液结合。结论成功克隆表达了轮状病毒疫苗株Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白,两种蛋白均有与H1型HBGAs结合的特性。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 邓中华,郭妮君,熊艺灿,谭超超,乐杨桦,陈杰,曹友德
关键词: 轮状病毒,组织血型抗原,蛋白
来源: 中国病原生物学杂志 2019年05期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,基础医学
单位: 湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院检验科,湖南省妇幼保健院检验科,湖南省人民医院胃肠小儿外科
基金: 湖南省自然科学基金项目(No.2017JJ2151)
分类号: R392
DOI: 10.13350/j.cjpb.190511
页码: 545-548+552
总页数: 5
文件大小: 504K
下载量: 52
相关论文文献
- [1].非活性人细胞依赖型血型抗原的研究及应用[J]. 中国免疫学杂志 2015(02)
- [2].组织血型抗原:轮状病毒可能的潜在受体[J]. 中国科学:生命科学 2015(05)
- [3].轮状病毒与人类组织血型抗原相关性的研究进展[J]. 病毒学报 2015(04)
- [4].人类组织血型抗原在小儿轮状病毒感染中的研究进展[J]. 临床儿科杂志 2015(08)
- [5].A血型抗原减弱的血清学和分子生物学分析[J]. 中国卫生检验杂志 2020(13)
- [6].贝类中3种组织血型抗原ELISA检测方法的建立与分型[J]. 中国水产科学 2013(01)
- [7].白血病引起ABO血型抗原表达改变1例[J]. 实用医学杂志 2009(09)
- [8].周口地区RhD阴性献血者血型抗原分析[J]. 中国误诊学杂志 2008(14)
- [9].Duffy血型抗原与疾病关系研究进展[J]. 中国实用医药 2018(05)
- [10].Globoside血型抗原研究进展[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2019(05)
- [11].白血病患者ABO血型抗原减弱的鉴定方法[J]. 中国实验诊断学 2013(08)
- [12].红细胞Kidd血型抗原研究现状及进展[J]. 中国实验诊断学 2020(02)
- [13].温州地区672名献血者Kidd血型抗原分布调查[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2015(01)
- [14].南京地区汉族人群Yt~b血型抗原基因频率的调查与分析[J]. 中国输血杂志 2014(10)
- [15].ABO血型抗原体减弱与配血输血的相关研究[J]. 临床医学工程 2011(06)
- [16].JMH血型抗原研究进展[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2020(05)
- [17].CD59-血型抗原的研究新进展[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2019(03)
- [18].血液病患者ABO血型抗原减弱的原因及其输血对策[J]. 中外医学研究 2013(11)
- [19].红细胞LW血型抗原研究进展[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2020(03)
- [20].组织血型抗原Lewis Y通过调控微管乙酰化水平促进细胞迁移[J]. 中国输血杂志 2020(09)
- [21].溶氧量及pH对太平洋牡蛎类A型组织血型抗原表达的影响研究[J]. 食品安全质量检测学报 2019(08)
- [22].幽门螺旋杆菌感染与血型抗原相关性研究[J]. 北华大学学报(自然科学版) 2017(02)
- [23].河南某医院12836例就诊人员Rh血型抗原表型分布[J]. 郑州大学学报(医学版) 2016(06)
- [24].人红细胞RhD血型抗原的甲氧基聚乙二醇修饰研究[J]. 中国输血杂志 2010(S1)
- [25].40例ABO血型抗原减弱的血清学表现及原因分析[J]. 中国医药指南 2020(20)
- [26].Rh血型抗原检测在精准化输血中的应用探讨[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2017(04)
- [27].分子生物学鉴定急性白血病患者ABO血型抗原[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2015(01)
- [28].Lewis血型抗原研究进展[J]. 临床血液学杂志(输血与检验) 2020(02)
- [29].冷凝集素综合征伴血型抗原减弱1例[J]. 临床检验杂志 2019(07)
- [30].人红细胞RhD血型抗原的甲氧基聚乙二醇修饰研究[J]. 临床血液学杂志(输血与检验版) 2011(03)