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雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的分离鉴定及表型耐药性分析

2020-12-02阅读(951)

雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的分离鉴定及表型耐药性分析

论文摘要

沙门氏菌（Salmonella）是一种经食物传播后能引起人类肠道疾病的最主要食源性致病菌。据资料显示,因沙门氏菌感染引发的食源性疾病长期占据世界各国疾病爆发成因榜首。在我国内陆地区,食源性疾病的爆发也以沙门氏菌为主要源头。为了预防和治疗沙门氏菌病,抗生素的使用是一种最普遍而有效途径。但抗生素的长期低剂量诱导使得沙门氏菌的耐药性不断增强,耐药谱逐渐拓宽,这不仅给沙门氏菌病的防治工作带来很大阻力,而且对社会公共卫生安全造成威胁。鸡作为沙门氏菌的天然宿主,是引起人类沙门氏菌感染的主要传播源之一,然而鸡肉又是老百姓餐桌上不可或缺的美味佳肴。因此,了解市售生鲜鸡肉中感染沙门氏菌的情况,研究鸡肉源沙门氏菌血清型分布情况并对其表型耐药性进行分析,是有效防控沙门氏菌病传播的重要前提,同时也为规范使用抗生素提供参考依据。主要研究内容及结果如下:1、雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的分离和鉴定本研究从雅安市48家超市、农贸市场、零售小商贩处共采集240份生鲜鸡肉样品,使用缓冲蛋白胨水（BPW）培养基对样品前增菌,在四硫磺酸盐肉汤（TTB）培养基和亚硒酸盐胱氨酸（SC）培养基上分别进行选择性增菌,再划线接种到木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）培养基和亚硫酸铋（BS）培养基,经过赖氨酸脱羧酶试验培养基和三糖铁（TSI）斜面培养后,共分离出85株疑似沙门氏菌。对疑似沙门氏菌进行生化鉴定和PCR鉴定,最终确认74株沙门氏菌。2、雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的血清型分型采用沙门氏菌属诊断血清和16S rDNA序列比对方法对74株沙门氏菌进行血清分型试验,试验结果为:B群有25株,占比33.78%,其中鼠伤寒沙门氏菌有16株（21.62%）,乙型副伤寒沙门氏菌有7株（9.46%）,阿哥纳沙门氏菌有2株（2.7%）;C1群有9株,占比12.16%,其中汤卜逊沙门氏菌有6株（8.1%）,布伦登卢普沙门氏菌有3株（4.05%）;D1群有38株,占比51.35%,其中肠炎沙门氏菌有25株（33.78%）,鸡伤寒沙门氏菌为13株（17.57%）;其他群有2株,占比2.7%,均为魁北克沙门氏菌。3、雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的表型耐药性分析选择8种常用抗生素,采用K-B纸片扩散法和微量肉汤稀释法对74株沙门氏菌的表型耐药性进行分析,试验结果为:所有菌株均表现出不同程度的耐药,多重耐药率为59.46%（44/74）。其中对青霉素类抗生素（氨苄青霉素、阿莫西林）耐药率为64.86%70.27%;对氨基糖苷类抗生素（庆大霉素、卡那霉素）耐药率为6.76%37.83%;对四环素类抗生素（四环素、米诺环素）耐药率为17.58%67.57%;对头孢类抗生素（头孢曲松）耐药率为10.81%;对喹诺酮类抗生素（萘啶酸）耐药率为20.27%。检测出沙门氏菌对8种抗生素半的抑制浓度MIC50值试验结果为:氨苄青霉素2 ug/mL、阿莫西林2/1 ug/mL、庆大霉素4 ug/mL、卡那霉素8 ug/mL、四环素4 ug/mL、米诺环素2 ug/mL、头孢曲松0.5 ug/mL和萘啶酸8 ug/mL。综上所述,本研究以雅安市生鲜鸡肉为样品,通过对样品中感染沙门氏菌的分离鉴定、血清分型及表型耐药性分析,掌握全市生鲜鸡肉中沙门氏菌的污染率、血清型分布和表型耐药性情况,为研究控制沙门氏菌病的传播、养殖鸡使用抗生素的管控提供基础数据和参考依据,研究成果具有一定的理论和实际应用价值。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 缩略词表
  • 1 文献综述
  •   1.1 沙门氏菌简介
  •     1.1.1 沙门氏菌的特征
  •     1.1.2 沙门氏菌的危害
  •   1.2 沙门氏菌的污染
  •   1.3 沙门氏菌的检测
  •     1.3.1 传统标准检测法
  •     1.3.2 免疫学方法
  •     1.3.3 分子生物学方法
  •     1.3.4 其他方法
  •   1.4 沙门氏菌的耐药性
  •     1.4.1 沙门氏菌的耐药情况
  •     1.4.2 沙门氏菌的耐药性检测方法
  •   1.5 研究目的和意义
  •   1.6 研究内容及路线
  •     1.6.1 研究内容
  •     1.6.2 技术路线
  • 2 试验材料与方法
  •   2.1 试验材料
  •     2.1.1 生鲜鸡肉样品
  •     2.1.2 主要试剂和培养基的配制
  •     2.1.3 主要仪器和设备
  •     2.1.4 参考菌株
  •   2.2 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的分离培养
  •     2.2.1 样品采集
  •     2.2.2 样品前处理
  •     2.2.3 选择性增菌
  •     2.2.4 分离培养
  •     2.2.5 初步筛选
  •   2.3 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的鉴定
  •   2.4 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的血清型分析
  •   2.5 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的表型耐药性分析
  • 3 结果与分析
  •   3.1 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的分离结果
  •     3.1.1 前增菌结果
  •     3.1.2 选择性增菌结果
  •     3.1.3 分离培养结果
  •     3.1.4 初步筛选结果
  •   3.2 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的鉴定结果
  •     3.2.1 生化鉴定结果
  •     3.2.2 革兰氏染色结果
  •     3.2.3 PCR鉴定结果
  •     3.2.4 不同采样地区和场所沙门氏菌的检出结果
  •   3.3 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的血清型分析结果
  •     3.3.1 沙门氏菌属诊断血清分析结果
  •     3.3.2 16S rDNA序列分析方法分析血清型分析结果
  •     3.3.3 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌血清型分布情况
  •   3.4 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的表型耐药性试验结果
  •     3.4.1 K-B纸片扩散法试验结果
  •     3.4.2 微量肉汤稀释法试验结果
  •     3.4.3 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的多重耐药情况
  • 4 讨论
  •   4.1 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的培养
  •   4.2 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的污染情况
  •   4.3 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的血清型分布情况
  •   4.4 雅安市生鲜鸡肉中沙门氏菌的表型耐药性
  • 5 结论
  • 6 展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简历

    • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 文昕

    导师: 韩国全,林华

    关键词: 雅安市,沙门氏菌,生鲜鸡肉,分离鉴定,表型耐药性

    来源: 四川农业大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 四川农业大学

    分类号: S852.61

    DOI: 10.27345/d.cnki.gsnyu.2019.000773

    总页数: 73

    文件大小: 1675k

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