间歇性循环张力对人间充质干细胞成软骨分化的影响

间歇性循环张力对人间充质干细胞成软骨分化的影响

论文摘要

目的:研究间歇性循环张力(ICMT)对人间充质干细胞(h MSCs)成软骨分化的影响。方法:取人间充质干细胞建立体外软骨分化的模型,将人间充质干细胞以8×104/cm2的密度接种于被Ⅰ型胶原覆盖处理过的Bio Flex TM六孔加力板中,置于37℃、5%CO2培养箱中培养,待细胞贴壁后加入成软骨诱导液培养。根据间歇性循环张力的影响分为加力组和对照组,加力组:细胞通过Flexcell FX-5000TM应变加载系统在培养箱中(37℃、5%CO2)给予力学刺激(10%伸长率、0. 5 Hz、8 h/d)处理;对照组:不加以力学刺激放在相同环境下一起培养。两组细胞分别在加成软骨诱导液后1、3、6、8、10 d用CCK-8法检测细胞增殖。第14天用番红O染色观察细胞成软骨变化,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用Real-time PCR的方法检测细胞成软骨基因ACAN、COLⅡ、SOX9的表达变化。结果:间歇性循环张力可以抑制间充质干细胞的增殖。第14天的加力组细胞明显凋亡,番红O染色比对照组浅,软骨基因的表达被抑制。结论:间歇性循环张力抑制人间充质干细胞成软骨分化。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 培养人间充质干细胞
  •     1.2.2 用CCK-8试剂检测细胞增殖
  •     1.2.3 用流式细胞术检测细胞凋亡
  •     1.2.4 番红O染色检测成软骨情况
  •     1.2.5 RNA的提取及Real-time PCR
  •     1.2.6 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 CCK-8检测细胞增殖结果
  •   2.2 流式细胞术检测细胞凋亡情况
  •   2.3 番红O染色检测成软骨结果
  •   2.4 Real-time PCR检测软骨基因表达结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨必敬,汪靖,葛鑫,徐子昂,徐宏光

    关键词: 人间充质干细胞,间歇性循环张力,软骨分化

    来源: 皖南医学院学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科

    基金: 国家自然科学基金项目(81572185),安徽省自然科学基金项目(1708085MH185),安徽省自然科学基金青年项目(1708085QH205)

    分类号: R329.2

    页码: 25-28

    总页数: 4

    文件大小: 169K

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