含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌

论文摘要

目的建立含内标的多重实时荧光PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法针对空肠弯曲菌特有hipO基因和结肠弯曲菌特有ceuE基因设计引物探针,设计并优化内标DNA添加量。测试了方法的特异性、灵敏度以及在鸡肉中的检出限。结果内标的最适添加量为10~4copies/PCR。所建立方法对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的灵敏度分别达到4.7copies/PCR和5.23copies/PCR;对115株空肠弯曲菌、49株结肠弯曲菌和42株非目标菌株在3种不同类型的实时荧光PCR仪上的特异性均达到100%;对鸡肉中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检出限达到10CFU/25g,与传统检测方法一致。采用所建立的方法对50份市售生鲜鸡肉进行检测发现,空肠弯曲菌阳性率为12%(6/50),结肠弯曲菌阳性率为4%(2/50);传统国标检测方法除了1份空肠弯曲菌阳性样品未得到分离确认,其余PCR阳性样品均在平板上分离确认。结论该方法特异性强、灵敏度高、开放性好、含有内标可防止"假阴性",可应用于食品中2种重要致病性弯曲菌的快速同步检测。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 申进玲,赵丽娜,蒋原,韩伟,袁辰刚

关键词: 弯曲菌,同步快速检测,内部扩增对照

来源: 食品安全质量检测学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心,上海海关,江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心

基金: 上海市技术标准专项(16DZ0500101),江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心资助~~

分类号: TS207.4

页码: 1844-1852

总页数: 9

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标签：弯曲菌论文;  同步快速检测论文;  内部扩增对照论文;