金属螯合色谱论文-刘承君,段蓿,韩欣欣,朱文强,周春梅

金属螯合色谱论文-刘承君,段蓿,韩欣欣,朱文强,周春梅

导读:本文包含了金属螯合色谱论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:尼龙66,金属螯合,色谱固定相

金属螯合色谱论文文献综述

刘承君,段蓿,韩欣欣,朱文强,周春梅[1](2017)在《金属螯合型膜色谱固定相的制备》一文中研究指出金属螯合型色谱在分离金属离子、生物分析与分离方面具有广泛的应用,其固定相基质主要包括硅胶,以及葡聚糖、琼脂糖、纤维素等聚合物[1-3]。聚己二酰己二胺(Nylon 66,尼龙66,简称PA66)具有良好的综合性能、强度高、耐热性好、抗冲击、耐油以及耐化学品,并且PA66的原料易得,成本较低[4,5]。目前,PA66进行物理改性后制备成的复合材料被广泛的应用在汽车制造业、电子工业、航空工业等许多领域,通过化学改性增强PA66性能的研究也有比较大的进展,但是,PA66及其改性材料在环境方面应用的研究还比较少。本文采用PA66纤维布为基质,以3-氯丙基叁氯硅烷(本文来源于《第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集》期刊2017-05-19)

白雷,卫引茂[2](2015)在《低Ni(Ⅱ)流失叁齿四唑型金属螯合亲和色谱固定相及性能》一文中研究指出金属螯合亲和色谱在蛋白质识别与检测、分离与纯化有重要用途。从金属螯合亲和色谱概念提出至今,该色谱模式获得了极大发展。但是,金属螯合亲和色谱固定相表面金属离子易流失的问题至今仍是金属螯合亲和色谱技术发展亟需解决的根本问题。基于前期工作,本文通过3-(2-氨基乙基)胺超支化键合,将强金属螯合配基2-(5-甲基四唑)氨(BMTA)键合到硅胶表面,制备了一种新型IMAC固定相,达到在不增加配基配位数的条件下,降低纯化蛋白过程中金属流失率的效果。(本文来源于《第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第四分册)》期刊2015-04-19)

王琳[3](2012)在《径向金属螯合亲和整体柱的制备和色谱性能研究》一文中研究指出整体柱(monolithic column)是通过管内原位聚合,然后根据用途,对整体高聚物材料进行衍生化处理,获得用于分析分离、富集或制备的整体色谱柱。与传统填充色谱柱相比,整体柱具有制备方法简单、渗透性好、柱前压低、活性位点利用率高、柱容量等优点,而且其分辨率及吸附量且不依赖于流速,以及高流速操作时,压降较低,尤其适合生物样品的制备分离。因此研究整体柱的制备、表征方法及应用具有十分重要的理论意义及应用价值。整体材料被誉为第四代色谱固定相,其内部具有相互贯通的通孔网络,由大孔(孔径>50nm)、介孔(50nm>孔径>2nm)及微孔(孔径<2nm)构成。大孔实现了整体固定相的对流传质运输,比传统颗粒填料的涡流扩散传质速率要高很多,而介孔及微孔提供了活性位点,同时也增大了整体材料的比表面积,提高了柱容量和色谱分离能力。本文首先关于整体柱的发展历史,整体柱的制备工艺、应用等进行了相关的综述。研究了整体柱的制备方法,制备金属螯合色谱整体柱,通过SEM、IR、EDS等手段对整体柱进行表征,针对单体、交联剂和致孔剂的比例,联合其表征,优化整体柱制备条件。通过SEM,观察到整体基质不同位置的微观形貌较为类似,其也呈现出通孔网络,进行红外表征,可知材料表面已修饰上IDA,并且通过EDS也可知材料成功地螯合了。对整体柱进行色谱性能研究,改变如缓冲液pH值、梯度、流速等参量的色谱条件,考察这些参量对整体固定相分辨率的影响,可以看出,pH值、流速等参量对整体柱的分辨率及保留时间的影响并不大,以迎头分析法测定整体固定相的动态柱容量,及流速对柱容量的影响,考察了不同批次所制备整体柱的重复性,均可证明整体材料的优越性,分析时间短,柱容量大,体现了分离生物大分子的方便快捷。(本文来源于《齐齐哈尔大学》期刊2012-03-21)

廖联明,杨渐,俞昌喜,许盈[4](2010)在《渗透压冲击预处理提高金属螯合亲和色谱纯化IGF-1融合蛋白的效率》一文中研究指出目的采用渗透压冲击预处理细菌以提高重组IGF-1融合蛋白纯化中金属螯合亲和色谱的效率。方法采用20%的蔗糖-EDTA缓冲液预处理经诱导表达的大肠杆菌,然后将表达产物经Ni-NTA-琼脂糖亲和色谱柱进行分离,观察蔗糖溶液处理对纯化效果的影响。结果经蔗糖-EDTA缓冲液预处理后Ni-NTA-琼脂糖色谱柱纯化蛋白的产量可以提高约2倍。结论渗透压冲击预处理可以有效提高金属螯合亲和色谱的效率。(本文来源于《中国生化药物杂志》期刊2010年04期)

王燕[5](2010)在《新型氨羧类多齿金属螯合Cu(II)柱的制备及其色谱特性的研究》一文中研究指出在竞争洗脱体系中,为了确保金属螯合Cu(Ⅱ)柱在低流失率的前提下,能使蛋白质得到很好的分离,我们从螯合配基与金属Cu2+的络合稳定常数以及同一系列配体齿数对色谱特性的影响出发,筛选出同一系列的氨羧类螯合剂。此类配体是一种多功能、多用途的螯合吸附剂,既可以应用于蛋白质的离子交换色谱,金属离子的去除,又可用于蛋白质的金属螯合色谱。因此,系统的研究蛋白质在此类络合型固定相上的色谱性能,尤其是其金属螯合特性,对拓展固定金属亲和色谱(IMAC)的应用范围、应用开发前景以及市场效益,均有着十分重要的意义。基于上述思路,本文以L-谷氨酸(L-Glu)、谷氨酸-溴乙酸(Glu-BAA)、谷氨酸-溴代丁二酸(Glu-BUSA)为配基,硅胶为基质,分别合成了具有阳离子交换特性的氨羧类多齿Glu-硅胶、Glu-BAA-硅胶和Glu-BUSA-硅胶柱。利用合成的系列多齿色谱柱分析和分离了标准蛋白质混合物;并以Glu-硅胶柱为例,与目前市场上常用的亚氨基二乙酸柱(IDA)进行比较。根据填料的理化性能以及流动相pH值和盐浓度对蛋白质保留值的影响,论证了合成的叁种多齿配体硅胶柱均具有离子交换的静电作用特征,并且配体的齿数对制备色谱柱的离子交换特性影响不大。此外,与传统的IDA柱相比,新筛选的Glu-硅胶配体对标准蛋白混合物的分离效果更好。将上述合成的叁种多齿配体硅胶柱引入金属Cu2+后,固定相均具有金属螯合特性。在Glu-Cu(II)柱上,考察了不同固定方法、不同pH值的铜溶液对键合量及其稳定性的影响,以及固定金属离子键合密度对金属螯合柱配位作用的影响。比较了螯合配体的齿数与键合量的关系。从固定金属离子、溶液pH、盐浓度、竞争剂的种类及其浓度出发,考察了蛋白质在这叁种多齿螯合Cu(Ⅱ)柱上的色谱行为以及金属Cu2+的流失情况。讨论了即能保证较低流失率又能有效分离蛋白质的最优洗脱条件。并以Glu-Cu(II)为例,与传统的IDA-Cu(II)柱进行比较,研究了配体络合稳定常数对金属螯合柱分离条件以及金属离子流失率的影响。结果表明,在pH 5.0的NaAc-HAc缓冲体系下动态法固定金属Cu2+的方法最为适宜。并且金属离子的键合量随着配体齿数的增加而增大。按照建立的色谱条件,叁种多齿螯合Cu(Ⅱ)柱均能有效地分离蛋白质混合物。比较而言,齿数最大的五齿的Glu-BSUA配基是最佳螯合剂的选择。证明了蛋白质的洗脱与分离好坏与配体的齿数相关,配体的齿数对制备的金属螯合柱色谱特性有较大影响。此外,与传统IDA-Cu(II)柱相比,并非配体的络合稳定常数越高就越好,蛋白质在Glu-Cu(II)柱上的分离性能更优,金属Cu2+的流失量更小。该研究对于解决固定金属Cu2+的流失问题,减少蛋白分离纯化过程中的重金属污染,以及扩展IMAC的应用具有重要的参考价值。(本文来源于《西北大学》期刊2010-06-30)

李蓉,王燕,陈国亮,王小刚,郑建斌[6](2010)在《蛋白质在金属螯合亲和色谱中的竞争洗脱》一文中研究指出以细胞色素C和溶菌酶为代表,研究了蛋白质在强亲和性金属螯合柱(IDA-Cu(Ⅱ))上的保留行为。考察了竞争剂、缓冲体系对蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上保留值的影响。发现在PBS和NaAc-HAc缓冲体系用咪唑(Imid)和甘氨酸(Gly)作竞争剂,可使蛋白质得到较好分离;在Gly和Imid竞争体系,分别研究了pH值变化对蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上保留值的影响。为使蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上得到有效分离且减少固定金属Cu2+的流失,对Gly体系,最好采用竞争置换和降低pH值相结合的方式进行洗脱。对Imid体系,溶液pH值应控制在6.0为宜,低pH值下蛋白质则不宜被洗脱。结果表明,竞争剂浓度与蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上的保留关系均符合计量置换模型。随着竞争剂浓度的增加,蛋白质的保留值减小。保留因子(k′)的对数与竞争剂浓度倒数(1/[D])的对数具有良好的线性关系,其线性相关系数分别在0.984和0.986以上。(本文来源于《分析化学》期刊2010年04期)

陈丽君[7](2008)在《金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助EGFP包含体蛋白质复性》一文中研究指出在基因工程表达中,为了表达后纯化的需要,常常将融合标签(6×his)与目标蛋白质进行共表达,以利于金属螯合色谱(IMAC)对其进行分离复性。然而,在纯化和复性中,常会因样品局部浓度过高引起蛋白质聚集沉淀,而阻塞色谱柱及影响蛋白质的纯化和复性。为了减轻这些不利因素,开发有效和实用的包含体蛋白质的复性技术,本文将金属螯合色谱和人工伴侣系统相耦合,利用基因工程表达产物6×his标记的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)包含体,系统研究了耦合辅助复性作用,并与传统复性法进行了比较讨论。研究结果表明,稀释复性仅能使较低浓度(0.05 mg·mL-1~0.2 mg·mL-1)的包含体蛋白达到较好的复性效果(30%~40%),但当蛋白终浓度为0.6 mg·mL-1时,荧光复性收率仅为14%;人工伴侣辅助复性虽然可使复性收率有所提高,但蛋白终浓度为0.6 mg·mL-1~0.8 mg·mL-1时,也只能达到25%左右的荧光复性收率;IMAC可以使高浓度包含体蛋白复性收率明显提高,在复性蛋白终浓度为0.6 mg·mL-1时,荧光复性收率可达60%,质量收率达80%;若将IMAC与人工伴侣耦合,相同条件蛋白质的复性结果可进一步提高为荧光复性收率80%,质量收率82%。进一步对耦合辅助复性中关键操作参数进行优化后,即变性蛋白与CTAB的摩尔浓度比为1:5,结合时间为20min,复性缓冲液的流速为0.4 mL·min-1,复性缓冲液中脲浓度为1.5 mol·L-1,洗脱液中脲浓度为2.5 mol·L-1时,可使终浓度为0.8 mg·mL-1~1.0 mg·mL-1的目标蛋白质达到87%的荧光复性收率和91%的质量收率,并且即使在更高的进样蛋白浓度(5 mg·mL-1)下,仍可获得69%的荧光复性收率和66%的质量收率,充分显示了耦合辅助复性的优势和在实际应用中的潜力。此外,本文还通过体积排阻色谱和圆二色光谱对耦合辅助复性的产物进行了分析。结果表明,复性产物大多为单体EGFP,且产品的二级结构和天然态绿色荧光蛋白相近。而其它复性方法则含有较多的多聚体,且二级结构与天然蛋白有较大差异。(本文来源于《天津大学》期刊2008-06-01)

冯薇[8](2008)在《金属螯合效应在高效液相色谱分析中的影响》一文中研究指出高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)在医药领域有着极其广泛的应用,其定性定量的准确性,对于药物研发、质量控制、指纹图谱等方面的工作有着极其重要的意义。然而,HPLC分析中的金属螯合效应可造成峰形严重拖尾,甚至形成新的杂峰,改变色谱峰形、积分面积,干扰其重现性,进而降低图谱的定性定量的准确度和可信度。已有报道从概念和基本现象上阐述HPLC中的金属螯合效应,但未见金属量与色谱峰形间的量效关系研究。本文力图从简单的模式化合物入手,以向样品溶液中定量添加金属离子的方式模拟样品在分析前和进入色谱柱时接触金属离子后发生反应,通过设计一系列色谱学实验考察由此产生的色谱行为变化。建立了以峰对称度为指标考察峰形变化的量化评价方法,旨在考察HPLC体系中金属离子的存在对色谱峰的影响程度、可能环境等问题,进而探索可能的预防和纠正办法,为提高HPLC应用水平提供重要参考。本研究选择柠檬酸和2,2’-联吡啶作为模式化合物,因柠檬酸结构简单、螯合位点明确,且是植物药物中常见的有机酸,具有代表性;而2,2’-联吡啶能够象征性地说明化合物在碱性条件下受金属离子影响的情形,且能与结构相似但没有螯合性的4,4’-联吡啶平行进样,便于比较。主要研究内容为:(1)根据实际经验而运用序贯优化法,建立样品的最佳色谱分析条件;(2)构建以色谱峰对称度为主要指标的评价方式,量化评价柠檬酸和2,2’-联吡啶样品溶液中定量添加不同种类和数量的金属离子后色谱峰的变化情况,并绘制变化趋势图;(3)变更流动相pH值后进行考察:在酸性流动相下,柠檬酸样品中混入不同种类和数量的金属离子后进行分析;在碱性流动相下,2,2’-联吡啶样品中混入不同种类和数量的金属离子后进样分析;4,4’-联吡啶样品相同处理后平行进样,以作对照;(4)探讨EDTA(取其二钠盐形式,下同)加入到样品溶液中和作为流动相使用时,对于待测样品的保护作用。通过实验,得到以下结论:(1)金属离子对螯合性化合物的HPLC分析的影响①对于具有螯合性质的样品,金属离子能够对样品的色谱峰形产生显着的影响,造成峰的对称度显着变化,按偏离1.0的方向升高或降低(即拖尾),乃至产生一至若干个杂峰,且金属离子的影响效应随其在溶液中所占比例增大而增加;样品溶液中存在部分有机溶剂对样品与金属离子的相互作用基本没有影响;②化合物与金属的螯合活性和反应速率不同,有可能对图谱的重现性造成影响。在柠檬酸样品与金属离子接触的至少一小时内,体系处于不稳定状态,螯合反应的发生及反应程度难以预计,且能产生不可重现的杂峰,24h后溶液体系基本稳定,图谱能够再现并显示出一定的规律性;而与金属离子混合后的2,2’-联吡啶溶液,初次进样即出现明显的规律性,24h和48h后重复进样,再现性良好,表明2,2’-联吡啶与金属离子间反应迅速且产物稳定。③由于与化合物的螯合活性及螯合产物稳定性的不同,不同种金属离子的影响效应间存在差异,对柠檬酸为:FeⅢ>FeⅡ>AlⅢ>ZnⅡ≈CaⅡ;对于2,2’-联吡啶则是:pH7.0流动相下FeⅡ>FeⅢ>AlⅢ>CaⅡ>ZnⅡ;pH8.0流动相下FeⅡ>FeⅢ>CaⅡ>ZnⅡ>AlⅢ。④流动相的pH值可显着改变待测样品与金属离子间的相互作用程度。酸性流动相条件能够抑制柠檬酸与金属离子的螯合效应,在pH2.0流动相下,各金属离子对峰形的影响均被减弱;碱性流动相条件能够提高2,2’-联吡啶与金属离子的反应程度,在pH9.0流动相下,少量金属离子即可对峰形产生严重干扰。这与化学中酸性环境抑制螯合反应,碱性环境促进螯合反应的结论是一致的。(2)EDTA作为保护试剂的效果①EDTA加入柠檬酸溶液不能有效避免样品与金属离子的相互作用,反而使样品分析复杂化;加入2,2’-联吡啶溶液中,则能够较好地保护待测样品,使色谱峰形在相当程度上保持稳定。②以EDTA溶液作为水相,与甲醇组成流动相分析柠檬酸,出现宽峰、峰高大幅降低、基线抬升等现象,不能取得预期效果。分析认为这与EDTA和柠檬酸在水溶液中同为有机酸阴离子,结构上有相似性有关。而将其用于分析2,2’-联吡啶,从结果看色谱峰形良好、对称度保持相对稳定,受金属离子的影响大大减小。③结合变化幅度和图谱表现而言,以EDTA溶液作为流动相用于螯合性物质的色谱分离,效果优于将EDTA加入样品溶液。④综上,EDTA作为HPLC分析中的螯合保护剂并非对所有样品都有效,有时反而得不偿失,必须根据具体情况采用。(本文来源于《重庆大学》期刊2008-04-01)

钟莺莺,叶俊超,邬建敏[9](2007)在《壳聚糖-硅基凝胶微球作为固定化金属螯合亲和色谱基质的研究》一文中研究指出采用溶胶凝胶及微乳液技术制备了以壳聚糖-硅基杂化材料为骨架并带有金属离子螯合官能团的球形基质(CSHB),并对该基质的制备条件及结构形貌进行了研究与表征。实验表明,当微乳液反应体系的组分为:100mL壳聚糖溶液(2%m/V)、100mL Span乳化剂、250mL环己烷、13.3mL四乙氧基硅烷(TEOS)、1.33mL 3-缩水甘油丙氧基叁甲氧基硅烷(GPTMS)和亚氨基二乙酸(IDA)0.802g时,可获得粒径均匀,刚性较好的微球。红外光谱证明了该基质是一种多组分的杂合材料,差热分析数据表明该杂合材料的热稳定性随反应体系中GPTMS的含量增加而增大。CSHB通过动态吸附金属离子Cu2+与Ni2+后,可对金属螯合蛋白产生配位吸附作用。Cu2+-CSHB柱对牛血清蛋白(BSA)具良好的可逆吸附能力,蛋白能被咪唑等金属离子螯合剂洗脱,回收率达76.6%。BSA在CSHB柱上的吸附率只有4.7%,表明CSHB对蛋白的非特异吸附较低。Ni2+-CSHB柱对过氧化氢酶(CAT)也显示出初步的纯化效果,一步纯化倍数为2.43倍。该基质有望用于具有组氨酸纯化标签的基因工程表达蛋白的分离与纯化。(本文来源于《分析化学》期刊2007年11期)

孙永亮,李淑娟,胡道道,崔亚丽,陈超[10](2007)在《纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能》一文中研究指出以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+配位分别得到两种金属螯合亲和层析介质.依照上述方法制备了具有不同负载羧基含量的色谱介质.以六聚组氨酸融合蛋白为分离样品,研究了所制备的色谱分离介质的分离纯化性能,并与商品化色谱分离介质Agarose-NTA-Ni进行了比较.结果表明,目标介质蛋白结合容量大,与蛋白结合快、易洗脱、选择性高,金属离子不易脱落.(本文来源于《陕西师范大学学报(自然科学版)》期刊2007年02期)

金属螯合色谱论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

金属螯合亲和色谱在蛋白质识别与检测、分离与纯化有重要用途。从金属螯合亲和色谱概念提出至今,该色谱模式获得了极大发展。但是,金属螯合亲和色谱固定相表面金属离子易流失的问题至今仍是金属螯合亲和色谱技术发展亟需解决的根本问题。基于前期工作,本文通过3-(2-氨基乙基)胺超支化键合,将强金属螯合配基2-(5-甲基四唑)氨(BMTA)键合到硅胶表面,制备了一种新型IMAC固定相,达到在不增加配基配位数的条件下,降低纯化蛋白过程中金属流失率的效果。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

金属螯合色谱论文参考文献

[1].刘承君,段蓿,韩欣欣,朱文强,周春梅.金属螯合型膜色谱固定相的制备[C].第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集.2017

[2].白雷,卫引茂.低Ni(Ⅱ)流失叁齿四唑型金属螯合亲和色谱固定相及性能[C].第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第四分册).2015

[3].王琳.径向金属螯合亲和整体柱的制备和色谱性能研究[D].齐齐哈尔大学.2012

[4].廖联明,杨渐,俞昌喜,许盈.渗透压冲击预处理提高金属螯合亲和色谱纯化IGF-1融合蛋白的效率[J].中国生化药物杂志.2010

[5].王燕.新型氨羧类多齿金属螯合Cu(II)柱的制备及其色谱特性的研究[D].西北大学.2010

[6].李蓉,王燕,陈国亮,王小刚,郑建斌.蛋白质在金属螯合亲和色谱中的竞争洗脱[J].分析化学.2010

[7].陈丽君.金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助EGFP包含体蛋白质复性[D].天津大学.2008

[8].冯薇.金属螯合效应在高效液相色谱分析中的影响[D].重庆大学.2008

[9].钟莺莺,叶俊超,邬建敏.壳聚糖-硅基凝胶微球作为固定化金属螯合亲和色谱基质的研究[J].分析化学.2007

[10].孙永亮,李淑娟,胡道道,崔亚丽,陈超.纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能[J].陕西师范大学学报(自然科学版).2007

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