Poly Ⅰ:C刺激对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞PKR/eIF2α信号通路影响的比较研究

Poly Ⅰ:C刺激对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞PKR/eIF2α信号通路影响的比较研究

论文摘要

目的比较研究聚肌胞苷酸(Poly Ⅰ:C)对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞双链RNA依赖性蛋白激酶R(PKR)/真核细胞翻译起始因子2α(EIF2α)信号通路的影响。方法分别提取裸鼹鼠和C57BL/6J小鼠巨噬细胞,随机分成对照组、Poly Ⅰ:C给药组、2-氨基嘌呤(2-AP)给药组、Poly Ⅰ:C+2-AP给药组。给药后,蛋白印迹检测细胞中磷酸化PKR(Pho-PKR)、PKR、磷酸化EIF2α(Pho-EIF2α)、EIF2α、Caspase-8蛋白的表达情况。结果 Poly Ⅰ:C给药后,小鼠巨噬细胞的PKR和e IF2α磷酸化水平显著降低(P<0.01),而裸鼹鼠相反则显著升高(P<0.01),表明Poly Ⅰ:C能抑制小鼠的PKR活性,而裸鼹鼠的PKR活性被显著激活;Poly Ⅰ:C干预的基础上通过2-AP抑制PKR活性,结果显示,2-AP给药后下调了小鼠和裸鼹鼠PKR和磷酸化PKR的表达(P<0.01),尤其是裸鼹鼠的PKR,2-AP给药后显著地抑制裸鼹鼠PKR的表达;单独2-AP给药后小鼠巨噬细胞的活性PKR和活性eIF2α比例显著下降(P<0.01),裸鼹鼠巨噬细胞的活性PKR比例也显著下降(P<0.01);通过2-AP抑制PKR活性后,裸鼹鼠细胞的Caspase-8蛋白表达水平显著下降,但小鼠细胞的表达却无显著差异。结论与小鼠比较,裸鼹鼠细胞对Poly Ⅰ:C刺激具有较高的抗性;细胞的PKR对2-AP的敏感性更强;PKR活性对Caspase-8表达有促进作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 仪器及试剂
  •   1.3 骨髓来源巨噬细胞的分离培养
  •     1.3.1 小鼠骨髓来源巨噬细胞的分离培养
  •     1.3.2 裸鼹鼠骨髓来源巨噬细胞的分离培养
  •   1.4 Poly I:C刺激对裸鼹鼠PKR及其信号通路的影响
  •     1.4.1 骨髓来源巨噬细胞的Poly I:C刺激及PKR活性的抑制
  •     1.4.2 PKR活性抑制后PKR信号通路表达情况检测
  •   1.5 数据分析
  • 2 结果
  •   2.1 Poly I:C给药、PKR活性抑制后巨噬细胞PKR的表达
  •   2.2 EIF2α的表达
  •   2.3 Caspase-8的表达
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 林丽芳,张成财,李煜,张倩倩,陈超,李壘辰,杨文静,李莉,崔淑芳

    关键词: 裸鼹鼠,聚肌胞苷酸,双链依赖性蛋白激酶

    来源: 实验动物与比较医学 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学

    单位: 海军军医大学基础医学院实验动物学教研室

    基金: 国家青年自然科学基金(.31702075),军队实验动物专项课题(13140900400)联合资助

    分类号: Q95-33

    页码: 473-478

    总页数: 6

    文件大小: 354K

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