Pgk和ilvN基因对谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的影响

Pgk和ilvN基因对谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的影响

论文摘要

为增加谷氨酸棒杆菌A36的L-丝氨酸合成途径的碳流,首先过表达磷酸甘油酸激酶(pgk),以增加前体物质3-磷酸甘油酸的积累,但经发酵分析发现其对菌株A36的L-丝氨酸产量无显著影响。进一步敲除副产物L-缬氨酸合成途径的乙酰羟酸合酶(AHAS)基因ilvN,敲除该基因后L-缬氨酸只有微量积累,但重组菌并未形成营养缺陷型菌株,L-丝氨酸的产量反而下降,分析发现L-缬氨酸的存在在一定程度上有助于L-丝氨酸的生成。在培养基中分别添加不同质量浓度的L-缬氨酸,在L-缬氨酸添加量为750 mg/L时,重组菌L-丝氨酸产量达到34.19 g/L,糖酸转化率为0.34 g/g,生产强度为0.28 g/(L·h),相比出发菌株A36分别提高了11.8%、13.3%和12.0%。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌株和引物
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 培养基
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 谷氨酸棒杆菌的活化及发酵
  •     1.2.2 加强表达pgk基因
  •     1.2.3 ilvN基因的敲除
  •     1.2.4 添加不同浓度L-缬氨酸对出发菌株A36及ilvN基因敲除菌株发酵的影响
  •     1.2.5 发酵参数的测定
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 重组菌株的构建
  •     2.1.1 过表达质粒及重组菌株的构建
  •     2.1.2 敲除质粒及重组菌株的构建
  •   2.2 重组菌株的发酵
  •     2.2.1 重组菌A36-pDXW-10-pgk的发酵性状分析
  •     2.2.2 重组菌A36ΔilvN的发酵性状分析
  •   2.3 添加不同浓度L-缬氨酸对出发菌及重组菌发酵的影响结果
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张鑫,张晓梅,李会,张晓娟,史劲松,许正宏

    关键词: 谷氨酸棒杆菌,丝氨酸,磷酸甘油酸激酶,乙酰羟酸合酶,代谢工程

    来源: 生物加工过程 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,一般化学工业

    单位: 江南大学药学院,江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室

    基金: 国家自然科学基金(31600044)

    分类号: Q78;TQ922

    页码: 372-378

    总页数: 7

    文件大小: 600K

    下载量: 75

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