纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖提取工艺优化及其结构初步鉴定

纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖提取工艺优化及其结构初步鉴定

论文摘要

为探究纳豆芽孢杆菌细胞壁肽聚糖提取工艺及其结构,本实验以纳豆芽孢杆菌为研究材料,采用响应面优化超声波破碎法,提取纳豆芽孢杆菌细胞壁,然后经三氯乙酸、乙酸钠、氯仿、甲醇、胰蛋白酶处理等操作分离得到较为纯净的肽聚糖并对其组成成分和结构进行分析。结果表明:用超声波破碎法提取的纳豆芽孢杆菌细胞壁得率为45.8%,纯化后得到的肽聚糖得率为8.5%。所得纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖中总糖占39.77%,蛋白质占54.47%,总脂含量占4.5%。溶菌酶溶解实验9 h后眼观变为澄清。经红外光谱(IR)和高效液相分析提取的肽聚糖样本与肽聚糖已知结构特征相一致。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析经溶菌酶水解后的肽聚糖分子量约为60 ku。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 设备与仪器
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 纳豆芽孢杆菌培养
  •     1.3.2 超声波破碎法提取纳豆芽孢杆菌细胞壁条件优化
  •     1.3.3 三氯乙酸法提取纯化肽聚糖
  •     1.3.4 肽聚糖组成成分分析
  •     1.3.5 肽聚糖化学结构分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 超声破碎条件对细胞壁提取率的影响
  •     2.1.1 单因素试验结果
  •     2.1.2 模型的建立与显著性检验
  •     2.1.3 响应面分析与优化
  •     2.1.4 回归模型的验证试验
  •   2.2 肽聚糖提取纯化得率
  •   2.3 肽聚糖组成成分及化学结构的分析
  •     2.3.1 溶菌酶溶解检验
  •     2.3.2 蛋白质含量测定
  •     2.3.3 总脂含量的测定
  •     2.3.4 总糖含量的测定
  •   2.4 肽聚糖化学结构分析
  •     2.4.1 红外光谱分析结果
  •     2.4.2 SDS-PAGE分析结果
  •     2.4.3 高相液相色谱分析结果
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈佳妮,黄占旺,王素贞,石福磊,黄永平

    关键词: 纳豆芽孢杆菌,肽聚糖,提取,分离,鉴定

    来源: 江西农业大学学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 江西农业大学食品科学与工程学院/江西省天然产物与功能食品重点实验室

    基金: 国家自然科学基金地区科学基金项目(31160337)~~

    分类号: TS201.3

    DOI: 10.13836/j.jjau.2019022

    页码: 174-185

    总页数: 12

    文件大小: 1827K

    下载量: 190

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