乳铁蛋白负向调控TLR2激动剂诱导的人肺上皮细胞细胞因子分泌

论文摘要

目的观察乳铁蛋白对Toll样受体2（TLR2）激动剂Pam3CSK4刺激人肺上皮细胞分泌促炎细胞因子的影响,并探索其潜在的机制。方法体外培养人肺上皮细胞系NCI-H292,采用100 ng/ml Pam3CK4联合100、200和400μg/ml乳铁蛋白孵育细胞。ELISA检测乳铁蛋白处理前后培养上清TNF-α和IL-8分泌的变化;实时定量PCR和ELISA检测短腭、肺及鼻咽上皮克隆1（SPLUNC1）蛋白和m RNA表达的影响。提取细胞核蛋白,ELISA测定乳铁蛋白处理前后NF-κB活性的变化,采用Western blot检测IκB的表达;并用siRNA沉默NCI-H292细胞SPLUNC1,观察其对TNF-α和IL-8分泌的影响。结果 100、200和400μg/ml乳铁蛋白预处理肺上皮细胞后,可下调Pam3CK4诱导分泌TNF-α和IL-8。实时定量PCR结果显示,100、200和400μg/ml乳铁蛋白处理后,SPLUNC1 mRNA水平明显增高,并呈一定的剂量依赖性,ELISA也得到了类似的结果。采用转录和翻译抑制剂放线菌素D（ActD）和放线菌酮（CHX）预处理,可显著降低乳铁蛋白诱导SPLUNC1的表达。此外,乳铁蛋白处理可抑制Pam3CK4激活NF-κB,主要表现为NF-κB的DNA结合活性降低、IκB降解减少。siRNA沉默SPLUNC1表达后,可明显削弱乳铁蛋白对TNF-α和IL-8的抑制作用。结论乳铁蛋白对Pam3CK4诱导的细胞因子分泌具有抑制作用,其机制与上调SPLUNC1表达、抑制NF-κB的活性有关。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 曹二龙,谭潇,刘选梅,肖非,马婷,贺印旎

关键词: 乳铁蛋白,样受体,细胞因子

来源: 免疫学杂志 2019年09期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室

基金: 邵阳市科技计划(2017ZD08),2016年度校级大学生研究性学习和创新性实验计划(校发[2016]11号)

分类号: R329.2

DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20190122

页码: 780-784

总页数: 5

文件大小: 1050K

下载量: 113

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