人角质细胞生长因子2真核表达载体的构建及功能验证

论文摘要

目的:构建人角质细胞生长因子2（KGF-2）基因真核表达载体,探索KGF-2的上皮细胞迁移功能。方法:以人乳腺cDNA文库为模板,PCR扩增KGF-2基因片段,将其插入pXJ-40-myc,经双酶切和测序验证后,将重组质粒转染HEK-293T细胞,采用Western印迹检测重组蛋白;转染人肠上皮细胞FHC,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果:PCR扩增获得627 bp的DNA产物,插入pXJ-40-myc载体,双酶切及测序结果证明重组质粒含有目的序列;转染HEK-293T细胞,Western印迹检测到相对分子质量约23×103的目的蛋白;细胞划痕实验显示,转染Myc-KGF-2的FHC细胞较未转染或转染空载体的细胞迁移能力强。结论:构建了人KGF-2基因真核表达载体,并验证了其促进细胞迁移的功能。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘娟,赵思源,徐小洁,杨超,张鲁囡,刘佳,孙万军

关键词: 人角质细胞生长因子基因,真核表达,细胞迁移

来源: 生物技术通讯 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 火箭军特色医学中心血液科,海军92076部队卫生队,军事医学研究院生物工程研究所,解放军总医院第六医学中心感染控制科

基金: 国家自然科学基金(81472589,81672602,31600681),全军医学科技青年培育计划孵化项目(16QNP029),全军医学科技青年培育计划培育项目(17QNP029)

分类号: Q78

页码: 41-46

总页数: 6

文件大小: 2955K

下载量: 117

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标签：人角质细胞生长因子基因论文;  真核表达论文;  细胞迁移论文;