论文摘要
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞SMMC-7721的影响及其作用机制。【方法】实验设2个组:DMSO（对照组）、UNC1999组,分别加入不同浓度的DMSO、UNC1999并作用不同时间,用CCK-8法检测细胞OD值,筛选药物较佳的作用浓度及时间;EdU细胞增殖实验及克隆形成实验分别检测细胞增殖和克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭、迁移实验检测细胞侵袭及迁移的能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测的细胞周期。RNA-seq检测UNC1999对细胞转录组的影响;q RT-PCR法检测药物作用相关基因（EZH1、EZH2）以及转录水平显著差异基因（NECTIN4）的相对表达量;Western Blot法检测EZH1、EZH2、H3K27me3表达情况。【结果】与对照组相比,UNC1999组的肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力均降低（P <0.05）;细胞周期发生G0/1阻滞（P <0.05）;细胞凋亡数量无明显改变（P> 0.05）。UNC1999可促进包括多个基因转录水平的改变,首位显著上调的基因为NECTIN4（ENSG00000143217）。在基因的转录表达水平上,UNC1999组的EZH1、EZH2无明显降低（P> 0.05）;而在蛋白表达水平上,两者表达降低（P <0.05）,同时H3K27me3也表达下降（P <0.05）。【结论】UNC1999能通过在蛋白水平上抑制表观遗传子EZH1、EZH2的表达及其催化组蛋白甲基化的功能,发挥抑制肝癌的作用;表观遗传子EZH1、EZH2与肝癌之间具有密切关系,是肝癌治疗具有潜力的靶标;UNC1999处理后NECTIN4表达显著升高,该基因异构体与抗癌药物治疗反应性相关,提示表观遗传抑制剂联合抗癌药物可能发挥更佳的治疗作用,这为临床肝癌药物治疗提供了新的思路。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 唐秀鑫,邓小红,辛晓萍,李劼,何晓顺,黄俊琪
关键词: 转录组学,肝癌
来源: 中山大学学报(医学版) 2019年06期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 肿瘤学
单位: 中山大学附属第一医院器官移植科//广东省器官捐献与移植免疫重点科实验室//广东省器官移植国际科技合作基地
基金: 国家自然科学基金(31370870,81871238),广东省自然科学基金(S2013020013000),广东省科技计划(2013A020229003),广州市科技计划项目(201604020083),广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(2013A061401007,2017B030314018),广东省器官移植国际合作基地建设项目(2015B050501002)
分类号: R735.7
DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2019.0115
页码: 821-832
总页数: 12
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