牙鲆(Paralichthys olivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定

牙鲆(Paralichthys olivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定

论文摘要

以牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象,以Tris、甘氨酸和二硫苏糖醇的混合溶液为提取液,加入不同量的硫酸铵分级纯化小清蛋白,应用免疫印迹法、酶联免疫法及质谱法进行鉴定。最终提纯得到3种不同分子质量的蛋白(PVⅠ、PVⅡ和PVⅢ),所得蛋白纯度大于90%,血清学实验证明其与小清蛋白特异性IgG及IgE抗体均有结合能力,质谱鉴定得到PVII和PVIII分子质量分别为12 151 Da和11 645 Da,pI值分别为5.14和4.69。该方法满足牙鲆小清蛋白提取纯化要求,得到的3种蛋白是牙鲆小清蛋白的不同亚型,且均具有过敏原性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 小清蛋白的提取与纯化
  •     1.3.2 SDS-PAGE分析
  •     1.3.3 免疫印迹
  •     1.3.4 间接酶联免疫 (enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA) 法
  •     1.3.5 不同亚型小清蛋白的胶内酶解
  •     1.3.6 液相色谱-串联质谱鉴定
  •       1.3.6. 1 液相色谱条件
  •       1.3.6. 2 质谱条件
  •       1.3.6. 3 数据分析
  • 2结果与分析
  •   2.1牙鲆肉中小清蛋白的分离纯化
  •   2.2 不同亚型牙鲆小清蛋白的免疫印迹法鉴定
  •   2.3 牙鲆小清蛋白与IgG和IgE抗体结合能力分析
  •   2.4 不同亚型牙鲆小清蛋白的质谱鉴定
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航,罗晨,田盛兰

    关键词: 鱼过敏原,小清蛋白亚型,牙鲆,纯化,鉴定

    来源: 食品科学 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 化学,轻工业手工业

    单位: 中国海洋大学食品科学与工程学院,青岛大学附属医院

    基金: 中央高校基本科研业务费专项(201762004)

    分类号: TS254.1;O657.63

    页码: 308-314

    总页数: 7

    文件大小: 1852K

    下载量: 110

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