基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇

论文摘要

目的:在获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）抗独特型纳米抗体的前期基础上,将纳米抗体作为酶标抗原的替代物,应用于荧光定量免疫聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）体系,实现DON的高灵敏、绿色免疫分析。方法:将特异性结合DON抗体的噬菌体展示纳米抗体（P-28）作为竞争抗原,以编码P-28纳米抗体的DNA为靶标,设计特异性PCR扩增引物,优化荧光定量免疫PCR退火温度、抗DON抗体浓度、P-28投入量等参数,建立基于间接竞争模式的荧光定量免疫PCR检测DON的方法。结果:本研究建立的荧光定量免疫PCR方法线性检测范围为0.1～1 000 ng/mL,IC50值为（3.96±2.21）ng/mL,最低检出限为0.048 ng/mL,并与其他真菌毒素无交叉反应。结论:该方法直接使用噬菌体展示纳米抗体作为竞争抗原的替代物,应用于免疫PCR体系,避免了使用传统的化学合成酶标抗原所带来的环境污染、操作毒性等缺陷,并具有良好的特异性及灵敏度。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 江东健,罗秀儿,何庆华

关键词: 脱氧雪腐镰刀菌烯醇,抗独特性抗体,噬菌体展示纳米抗体,酶联免疫吸附测定,免疫

来源: 食品科学 2019年08期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室中德联合研究院,南昌大学食品学院

基金: 国家自然科学基金面上项目(NSFC-31671924),国家自然科学基金地区科学基金项目(NSFC-31360386),江西省杰出青年人才资助计划项目(20171BCB23023),江西省重大科技项目(20143ACB21008)

分类号: TS207.4

页码: 256-261

总页数: 6

文件大小: 2046K

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