论文摘要
目的:初步研究低氧预处理对人尿源性干细胞（human urine derived stem cells,hUSCs）增殖及分化潜能影响。方法:采取经过尿常规排查的成年男性新鲜尿液,提取培养人尿源性干细胞,通过流式细胞术检测干细胞表面标记物:CD90,CD29,CD44,CD73,CD54,CD105等;将细胞分为三组:低氧预处理（3%O2、5%CO2、37℃、24h及48h）和常氧组（20%O2、5%CO2、37℃）培养;采用倒置显微镜观察低氧预处理24h及低氧预处理48h组及常氧组细胞形态;CCK-8及EdU细胞增殖实验检测细胞增殖;体外诱导三组hUSCs向成骨及成脂细胞分化,并分别通过碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性测试、von kassa染色、茜素红染色、茜素红半定量检测验证成骨分化能力以及油红“O”染色验证成脂分化能力。结果:1、流式细胞术检测结果显示CD44、CD73、CD90、CD105表达率均高于90%,证明hUSCs具有间充质干细胞的相关特征;2、低氧预处理后人尿源性干细胞形态无明显变化;3、CCK-8结果显示低氧预处理24h组及低氧48h组及常氧组细胞均呈“S”形曲线,低氧预处理24h组及低氧预处理48h组细胞增殖率均较常氧组高,差异具有统计学意义（P<0.05）;4、EdU细胞增殖实验低氧预处理24h组及低氧预处理48h组DNA合成率均高于常氧组,差异具有统计学意义（P<0.05）,低氧预处理24h组及低氧预处理48h组组间差异无统计学意义（P>0.05）;5、低氧预处理后细胞仍具备干细胞特征,仍能向成骨、成脂细胞分化,碱性磷酸酶染色、茜素红染色、von kassa染色结果低氧预处理24h组及低氧预处理48h组染色密度均多于常氧组;碱性磷酸酶活性值及茜素红半定量检测OD值低氧预处理24h组及低氧预处理48h组均高于常氧组,差异具有统计学意义（P<0.05）;6、低氧预处理后油红“O”染色结果显示低氧预处理24h组及低氧预处理48h组染色密度稍多于常氧组。结论:3%低氧预处理可促进人尿源性干细胞的增殖活性,维持其多向分化潜能,促进其成骨分化能力以及维持其成脂分化能力。
论文目录
文章来源
类型: 硕士论文
作者: 章茜茹
导师: 陈林,王帅,陈芳
关键词: 人尿源性干细胞,低氧,分化潜能,增殖
来源: 遵义医科大学
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 生物学,基础医学
单位: 遵义医科大学
基金: 国家自然科学基金(基金课题合同编:81860193),贵州省自然科学基金计划(黔科合基础[2016]1170),贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教合 KY 字[2016]198),遵义医学院 2017年研究生教育创新计划(编号:zyk010)
分类号: R329.2
总页数: 48
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