GNA和ACA双价转基因烟草培育及其抗蚜研究

GNA和ACA双价转基因烟草培育及其抗蚜研究

论文摘要

蚜虫是一种常见的农作物害虫,作为多种植物病毒的载体而成为影响农业发展的重要害虫之一,对蚜虫的防治一直是众多科学工作者所面对的难题。构建了雪花莲凝集素(GNA)和苋菜凝集素(ACA)双价植物表达载体pBI121-GA,在农杆菌介导下,叶盘法转化烟草NC89,得到卡那霉素抗性植株65株。通过基因组PCR、ELISA、RT-PCR和Western-blot等分子生物学检测,从中筛选出外源凝集素不同表达水平的转基因烟草5株。对筛选出的5株转基因烟草植株进行初步蚜虫抗性实验,证实转基因烟草对桃蚜表现出一定的抗性,最高抑制率达85.8%,为农作物双价抗蚜基因的应用研究提供一定的理论基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 植物材料
  •     1.1.2 菌株和质粒
  •     1.1.3 主要试剂
  •     1.1.4 实验仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 植物表达载体的构建
  •     1.2.2 烟草外植体的转化和再生
  •     1.2.3 转基因烟草的基因组PCR检测
  •     1.2.4 转基因烟草的RT-PCR检测
  •     1.2.5 转基因烟草植株的ELISA检测
  •     1.2.6 转基因植物的Western-blot检测
  •     1.2.7 转基因烟草的抗蚜性检测
  •     1.2.8 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 载体p BI121-GA的构建及烟草的遗传转化与检测
  •   2.2 ELISA筛选不同表达水平转基因烟草植株
  •   2.3 转基因烟草的RT-PCR检测
  •   2.4 转基因烟草的Western-blot检测
  •   2.5 转基因烟草的蚜虫抗性检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨彩峰,李刚强,王楠,刘德虎

    关键词: 转基因烟草,雪花莲凝集素,苋菜凝集素,蚜虫抗性

    来源: 中国农业科技导报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,植物保护

    单位: 中国农业科学院生物技术研究所

    基金: 国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08005-004)资助

    分类号: S433.3;Q943.2

    DOI: 10.13304/j.nykjdb.2019.0020

    页码: 35-41

    总页数: 7

    文件大小: 1413K

    下载量: 125

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