白蚁及其共生菌来源的4种木质纤维素酶的共表达

白蚁及其共生菌来源的4种木质纤维素酶的共表达

论文摘要

天然的木质纤维素材料含有纤维素、半纤维素和木质素等成分。降解天然木质纤维素底物时,需要木质纤维素酶共同作用。近年在木质纤维素酶的相互协同作用方面的研究引起人们的关注,成为一个新的研究热点,文中使用两个不同的共表达载体pETDuet-1和pRSFDuet-1,在大肠杆菌中共表达了白蚁及其肠道微生物来源的β-葡萄糖苷酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、漆酶和木聚糖酶这4种木质纤维素酶,经过SDS-PAGE分析得到了与理论值一致的蛋白条带,同时经过酶活验证,这4种蛋白都具有酶活性。以磷酸处理的微晶纤维素(PASC)为底物,测定了共表达酶粗酶液与单独表达酶混合液的协同作用因子,从还原糖的产量上经计算共表达的粗酶液比单独表达酶的混合液对PASC的降解协同作用提高44%;以滤纸和磷酸处理的玉米芯为底物,测定降解协同作用,分别提高了34%和20%。结果表明,共表达酶的降解效率要高于混合的单组分酶液降解效率的总和。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 试剂及仪器
  •     1.1.2 培养基
  •     1.1.3 质粒及菌株
  •   1.2 构建表达载体
  •   1.3 诱导表达
  •   1.4 酶活力测定
  •     1.4.1 Na2CO3方法测定β-葡萄糖苷酶酶活
  •     1.4.2 DNS方法测定内切β-1, 4-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活
  •     1.4.3 以ABTS为底物测定漆酶酶活
  •     1.4.4 滤纸酶活的测定
  •   1.5 底物处理
  •   1.6 分析共表达酶协同作用
  • 2 结果与分析
  •   2.1 四种木质纤维素酶基因在大肠杆菌中的共表达
  •   2.2 共表达酶对底物协同降解作用
  •     2.2.1 对PASC的协同降解作用
  •     2.2.2 对滤纸的协同降解作用
  •     2.2.3 对磷酸处理的玉米芯渣的协同降解作用
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杜娇,姜淑喆,未建华,申玉龙,倪金凤

    关键词: 白蚁,木质纤维素酶,共表达,协同作用

    来源: 生物工程学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 山东大学微生物技术国家重点实验室

    基金: 国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2011CB707402),国家自然科学基金(Nos.31272370,30870085)资助~~

    分类号: Q55

    DOI: 10.13345/j.cjb.180235

    页码: 244-253

    总页数: 10

    文件大小: 1071K

    下载量: 265

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