张红凯[1]2003年在《MUC1、MUC2、MUC5AC和E-钙粘附素在胃癌中的表达及意义》文中研究指明目的：探讨MUC1、MUC2、MUC5AC和E-钙粘附素在胃癌组织中的表达及意义。方法：应用免疫组化S-P法，检测MUC1、MUC2、MUC5AC和E-钙粘附素在94例原发性胃癌标本中的表达。结果：1、MUC1在胃癌组织中阳性表达77例，阳性率82%，它在不同类型胃癌组织中表达不同（P<0.05），其中以在中高分化腺癌病例中表达比率最高，91%（30/33）；其表达程度与病人年龄、淋巴结有无转移及肿瘤大小密切相关（P<0.05），与病人性别、肿瘤发生部位、肿瘤浸润深度、有无胃外器官的累及、病人生存时间等无明显相关。2、MUC2在胃癌组织中阳性表达79例，阳性率84%，不同类型胃癌组织其表达不同（P<0.05），其中以在粘液腺癌中表达比率最高100%（7/7），且均为强阳性表达，在中高分化腺癌中的阳性率次之，94%（31/33）；其表达与本次研究的其它资料间无明显相关；COX分析表明它是对病人预后有显着影响的因素之一。3、MUC5AC的在胃癌组织中阳性表达38例，阳性率40%。胃癌不同类型间其阳性表达程度没有明显差异（P>0.05），除性别之间存在差异外，与所研究的其它因素间无显着的相关关系存在。4、E-cadherin胃癌组织中阳性表达53例，阳性率为56%。其表达与肿瘤分化有相关趋势，但与病人年龄、性别、肿瘤发生部位、有无淋<WP=5>巴结转移、肿瘤浸润深度、肿瘤大小、病人生存时间等无明显相关（P>0.05）。5、MUC1与MUC2和E-钙粘附素之间，MUC2与E-钙粘附素之间有显着的正相关关系存在（P<0.05）。6、COX分析表明，病人年龄、淋巴结转移、胃癌组织学类型以及MUC2的表达是对病人预后有显着性影响的几个因素。结论：1、MUC1在不同类型的胃癌组织中表达不同，在中高分化腺癌组织中表达最强，并与病人年龄、淋巴结转移、肿瘤大小有关；2、MUC2在不同类型的胃癌组织中表达不同，在粘液腺癌和中高分化腺癌中表达最强，可做为研究粘液腺癌和中高分化腺癌的较好指标；3、MUC5AC在胃癌组织中的表达比率较低，可能可作为研究胃癌发生、进展的较好指标；4、E-钙粘附素在不同类型的胃癌组织中表达没有明显差别，与病人的临床生物学特性方面也没有明显联系，但其表达与胃癌的管状分化有相关趋势；5、E-钙粘附素与MUC5AC在粘液腺癌中表达最低，MUC1与MUC2在粘液腺癌中表达较高，可能这两对指标在胃癌尤其是粘液腺癌的发生发展中起重要作用；5、MUC1、MUC2和E-钙粘附素间有明显的正相关关系。MUC1和MUC2可能抑制E-钙粘附素介导的肿瘤细胞的粘附功能，并且二者之间可能存在协同作用，从而有利于胃癌的进展。6、病人年龄、淋巴结转移、胃癌组织学类型以及MUC2的表达可作为判断病人预后的有用指标。
赵盛云[2]2014年在《四君子汤对脾虚证大鼠胃黏膜屏障功能影响的实验研究》文中研究指明广义的胃黏膜屏障(gastric mucosal barrier)是指由胃黏液屏障、上皮层屏障、黏膜微循环、黏膜免疫屏障和黏膜修复功能等因素构成的复杂的网络系统。当胃黏膜攻击因子增强或胃黏膜屏障功能减弱时，可导致胃黏膜病变发生，轻则出现水肿、充血等炎症反应，重则发生糜烂、溃疡甚至肠化生和不典型增生，患者表现为上腹痛、腹胀、食欲减退、恶心、呕吐等，中医辨证论治属“胃痛”、“痞满”、“嘈杂”等。脾虚证是上述各种脾胃疾病发生发展过程中最常见的病机过程，也是临床最常见的证候类型。因脾胃同居中焦，生理相关，病理相连，脾（气）虚则脾失健运，胃失和降，故见胃脘胀闷、疼痛、纳差、恶心、呕吐等，这些症状也恰恰是胃黏膜疾病最常见的症状。由此可见，胃黏膜屏障受损所致疾病可辨证为中医脾虚证，而脾虚证的症状也与胃黏膜疾病的临床表现相吻合，提示二者存在一定的相关性。因此，探讨脾虚与胃黏膜屏障功能之间的关系，对防治胃黏膜疾病具有实际的临床意义。目的：本研究采用耗气破气药物、饥饱失常和劳倦过度叁因素复合造模法复制脾虚证大鼠模型，以期探索更符合脾虚证临床特点的造模方法。通过对大鼠胃黏膜组织黏蛋白、黏膜T细胞亚群和上皮细胞凋亡等构成胃黏膜屏障功能的各层级指标进行检测，探索脾虚证与胃黏膜屏障功能改变之间的相关性以及健脾益气方剂四君子汤改善胃黏膜屏障功能的作用机制，为健脾益气法的临床应用和中药胃黏膜保护剂的研制提供实验依据，为胃黏膜疾病的中西医结合治疗提供理论依据。材料与方法：1.采用耗气破气药物、饥饱失常和劳倦过度叁因素复合造模法复制脾虚证大鼠模型并分组治疗。102只健康SPF级SD大鼠，适应性饲养l周后，随机分成4组，正常对照组（24只）、长期造模组（26只）、自然恢复组（26只）和四君子汤组（26只）。正常对照组常规饲养7周，前4周给予生理盐水隔日1次灌胃，后3周每日1次灌胃（1.5ml/100g）。其余叁组均采用耗气破气药物、饥饱失常和劳累叁因素复合造模法复制脾虚证大鼠模型，即耗气破气药物(1.5ml/100g)隔日1次灌胃，灌胃当日禁食，次日足量喂食且游泳至耐力极限。造模4周结束后，长期造模组继续造模3周，自然恢复组继续常规喂养3周，四君子汤组也改为常规喂养，同时给予四君子汤每日1次灌胃3周（1.5ml/100g）。于第7周末处死所有大鼠，取材处理。2.检测大鼠胃黏膜组织中黏蛋白的变化：采用实时荧光定量PCR检测各组大鼠胃黏膜组织中MUC5ACmRNA的相对表达量，并用western blot法检测胃黏膜组织中MUC5AC蛋白表达。3.检测大鼠胃黏膜组织T细胞亚群的变化：用免疫组织化学法检测各组大鼠胃黏膜组织中CD4+、CD8+T细胞数量及CD4+/CD8+比值的变化情况。4.检测大鼠胃黏膜细胞凋亡：用TUNEL法检测各组大鼠胃黏膜细胞凋亡情况，并用免疫组织化学方法检测调控蛋白Caspase-3的表达情况。结果：1.大鼠外观行为学观察长期造模组、自然恢复组及四君子汤组大鼠开始造模7天左右逐渐出现背毛枯乱、无光泽；懒动、蜷缩、扎堆、眯眼等兴奋度降低的表现；大部分出现便溏或大便偏软、偏湿，个别出现黏液便，2周后逐渐出现肛周污秽，个别有阴囊水肿，多数大鼠食量减少，消瘦。长期造模组以上表现持续至实验结束，且毛发枯乱、蜷缩、便溏等症状逐渐加重，部分大鼠出现水样便或黏液脓血便，脱肛、阴囊水肿。自然恢复组在停止造模后，兴奋度提高，不再有黏液便，但仍有便溏，其余表现无明显好转。四君子汤组停止造模1周左右上述变化逐渐改善，实验结束时外观、兴奋度、大便等基本恢复正常。正常对照组外观和行为学表现正常，无上述改变。2.大鼠体重增长及游泳耐力与正常对照组相比，长期造模组和自然恢复组体重增长和游泳耐力均值均下降（P＜0.05），四君子汤组与之比较并无统计学差异（P＞0.05）。长期造模组与自然恢复组体重差值和游泳耐力较之正常对照组均有明显差异（P＜0.05），但此两组体重差值比较并无差异（P＞0.05）。3.大鼠脾指数和胸腺指数长期造模组和自然恢复组的脾指数与正常对照组相比显着降低(P＜0.05)，四君子汤组脾指数与正常对照差异不显着(P＞0.05)；与四君子汤组相比，长期造模组脾指数显着降低(P＜0.05)，自然恢复组无明显降低(P＞0.05)。各组大鼠胸腺指数与正常对照组相比，只有长期造模组显着降低(P＜0.05)，自然恢复组与四君子汤组与之无显着差异(P＞0.05)；与四君子汤组相比，长期造模组显着降低(P＜0.05)，自然恢复组与之无显着差异(P＞0.05)；与自然恢复组相比，正常对照组、长期造模组和四君子汤组胸腺指数均与之无差异(P＞0.05)。4.胃黏膜组织MUC5ACmRNA及蛋白表达与正常对照组相比，长期造模组和自然恢复组MUC5ACmRNA相对表达量均明显下降（P＜0.05），但四君子汤组与之比较无明显差异（P＞0.05）；自然恢复组与长期造模组相比虽显着升高（P＜0.05），但较之四君子汤组和正常对照组均有显着差异（P＜0.05）。与正常对照组比较，长期造模组、自然恢复组MUC5AC蛋白表达明显减少（P＜0.05），在给予四君子汤后，MUC5AC明显升高且与正常组比较并无差异（P＞0.05）；自然恢复组MUC5AC表达虽高于长期造模组（P＜0.05），但仍低于正常对照组与四君子汤组（P＜0.05）。5.胃黏膜组织T细胞亚群与长期造模组和自然恢复组相比，四君子汤组大鼠胃黏膜CD4+T细胞数量增加，CD8+T细胞数量减少，差异显着（P＜0.05）。四君子汤组CD4+T细胞数量的改善未恢复到正常对照组水平（P＜0.05），而CD8+T细胞的数量与正常对照组比较无明显差异（P＞0.05）。与正常对照组相比，四君子汤组、自然恢复组和长期造模组CD4+/CD8+比值依次降低（P＜0.05），长期造模组最低，自然恢复组和四君子汤组较之明显升高（P＜0.05），四君子汤组显着升高后仍低于正常对照组（P＜0.05）。6.胃黏膜上皮细胞凋亡及Caspase-3的表达与正常对照组比较，各组大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡均增加，尤以长期造模组增加显着，差异有统计学意义(P＜0.05)。经四君子汤治疗后，大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡明显减少，与长期造模组及自然恢复组比较有显着差异（P＜0.05）。与正常对照组比较，各组大鼠胃黏膜组织Caspase-3均升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。经四君子汤治疗后，大鼠胃黏膜组织Caspase-3含量明显降低，与长期造模组及自然恢复组比较有显着差异（P＜0.05）。结论：1.耗气破气药物、饥饱失常和劳倦过度叁因素复合造模方法复制的脾虚证大鼠模型，稳定性更强，停止造模因素后大鼠各项脾虚表现不易自行恢复，更符合脾虚证慢性难愈的临床特点。2.脾虚证大鼠胃黏膜组织中黏蛋白MUC5AC含量减少，CD4+T细胞减少，CD8+T细胞增多，CD4+/CD8+比值降低，Caspase-3表达及上皮细胞凋亡增加，提示其胃黏膜黏液屏障、黏膜免疫屏障以及黏膜修复功能受损，胃黏膜屏障功能减弱。3.四君子汤可能通过提高大鼠胃黏膜黏蛋白含量、调整胃黏膜组织中T细胞亚群和减轻胃黏膜上皮细胞凋亡等途径而改善胃黏膜屏障功能，进而反证脾虚证可导致大鼠胃黏膜屏障功能减弱，脾虚与胃黏膜屏障功能存在一定的相关性。
参考文献：
[1]. MUC1、MUC2、MUC5AC和E-钙粘附素在胃癌中的表达及意义[D]. 张红凯. 重庆医科大学. 2003
[2]. 四君子汤对脾虚证大鼠胃黏膜屏障功能影响的实验研究[D]. 赵盛云. 辽宁中医药大学. 2014