基于孔板筛选论文-马欢欢,林洋,吕欣然,孙梦桐,白凤翎

基于孔板筛选论文-马欢欢,林洋,吕欣然,孙梦桐,白凤翎

导读:本文包含了基于孔板筛选论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:乳酸菌,抑制,黑曲霉,96孔板法

基于孔板筛选论文文献综述

马欢欢,林洋,吕欣然,孙梦桐,白凤翎[1](2017)在《96孔板法筛选抗黑曲霉性乳酸菌及抑菌机理研究》一文中研究指出目的:筛选对黑曲霉具有良好拮抗作用的乳酸菌菌株。方法:采用96孔板法进行乳酸菌优良菌株的筛选。研究p H和温度等因素对抗菌特性的影响,利用气相测定菌株DL3无细胞上清液(CFS)中有机酸含量,研究抑菌活性物质;利用扫描电镜分析孢子细胞的完整性,研究抑菌机理。结果:从传统东北酸菜分离的乳酸菌中筛选对黑曲霉具有较强抑制作用的植物乳杆菌DL3,其抑菌率为92.28%。在p H2.5~6.5对黑曲霉具有抑菌活性,并具有良好的热稳定性,121℃处理30 min后抑菌率仅降低5.71%。经气相色谱分析表明菌株DL3 CFS中乳酸、乙酸、丙酸和苯乳酸含量分别为5.743、1.635、0.033、0.085μg/m L,乳酸和乙酸对黑曲霉的抑菌率分别为91.69%和92.04%,丙酸和苯乳酸均无抑菌作用,初步判断菌株DL3的抑菌活性物质为有机酸类。扫描电镜观察表明菌株DL3 CFS破坏了黑曲霉孢子的完整性,导致细胞膜溶解,胞内物质外泄。结论:菌株DL3 CFS中对黑曲霉的抑菌活性主要来自于乙酸和乳酸,可作为米面制品的乳酸菌生物防霉剂的出发菌株。(本文来源于《食品工业科技》期刊2017年12期)

王红月,陈中,简旭凤[2](2016)在《微孔板法筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的条件优化》一文中研究指出研究以微孔板检测法为基础,对α-葡萄糖苷酶抑制剂的抑制能力进行检测,以达到有效筛选适宜浓度的α-葡萄糖苷酶抑制剂用于制备降血糖类功能性食品的目的。试验针对酶浓度、检测波长、蔗糖底物浓度及酶反应时间进行反应条件优化。结果表明:试验中所用批次酶的最适浓度范围为2.0~3.0 mg/mL;在405,450,492,520,630nm 5种波长条件下,520nm和492nm波长检测信号最强;蔗糖底物浓度的合适范围应为20~40mmol/L;适宜的酶反应时间范围为20~30min。(本文来源于《食品与机械》期刊2016年11期)

褚文宁,林东强,姚善泾[3](2016)在《基于96-孔板高通量筛选的人血白蛋白层析分离优化》一文中研究指出传统的蛋白层析过程开发主要通过一系列优化实验来确定合适的分离条件,需要消耗大量的料液、介质和缓冲溶液,同时过程繁杂,耗时长,因此构建高效的量筛选方法成为目前过程开发的热点。本文以人血白蛋白(HSA)分离为目标,采用96孔过滤板建立高通量过程开发(High-Throughput Process Development,HTPD)方法,评价和优化分离条件,实现HSA的高效分离。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议论文集》期刊2016-10-20)

杨洪梅,姚文斌,石磊,刘淑莹[4](2016)在《利用链霉亲和素包被的96孔板模式与超高效液相色谱电喷雾质谱(UHPLC-ESI-MS)结合从复杂样品中高通量的筛选叁链DNA结合剂》一文中研究指出传统的筛选叁链DNA结合剂的方法不能用于复杂样品的分析,据我们所知,仅我们课题组报道过从复杂样品中筛选叁链DNA结合剂的方法(Xu et al.,Anal.Chem.2012,84,2562-2568.)。本研究中,我们利用链霉亲和素包被的96孔板模式与超高效液相色谱电喷雾质谱(UHPLC-ESI-MS)结合的方式,建立了一种从复杂样品中筛选叁链DNA结合剂的方法。研究了影响结合强度和测定精密度的因素,方法的可行性通过已知结合状况的小分子组成的化合物库进行了验证,同时可以获得结合强度的信息。利用新建立的方法从黄连提取物中筛选到7种叁链DNA结合剂,其中4个成分(表小檗碱、黄连碱、药根碱和非洲防己碱)为首次发现,表明了分析复杂样品的有效性。同以前报道的方法比较,本方法表现出了高通量和结果更加可靠的优点。有些药物需要和叁链DNA形成复合物而发挥药效,此新方法在评价大量潜在的这样的药物候选物方面非常有价值。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第四十叁分会:质谱分析》期刊2016-07-01)

聂简琪[5](2015)在《深孔板高通量细胞筛选技术的建立及在普鲁兰酶定向改造中的应用研究》一文中研究指出普鲁兰酶(pullulanase)通过水解α-1,6糖苷键从而将支链淀粉的分支结构切除获得直链淀粉,大大提高淀粉的利用率,在食品工业中的应用前景广阔。本研究从当前新兴的高通量筛选技术角度出发,对深孔板(Microtiter Plate,MTP)的基础参数进行了研究并建立了基于MTP的高通量培养技术以及高通量筛选技术。利用该高通量筛选技术对鲁兰酶文库快速高效筛选并获得了一株突变菌株。本研究的主要结论如下:1、从耐高温、隔绝杂菌、透气性、防止水分挥发等方面研究了PP、PTFE以及e PTFE叁种材质透气膜的性能,综合考虑,PTFE以及e PTFE材质的防水透气膜更加适用于“叁明治”盖子。对MTP的氧传递系数kLa、微生物培养的可行性、平行性进行了研究,发现24孔MTP与48孔MTP传氧性能好,可达到摇瓶规模,大肠杆菌在MTP中的生长状态要优于摇瓶。研究者需根据微生物对氧气的需求以及实验要求选择合适的MTP及培养体积。96孔板由于氧传递性能差,不适宜进行好氧微生物的培养。2、在大肠杆菌中实现了普鲁兰酶基因(Gen Bank Accession No:AX203843)的异源表达,并在摇瓶规模对发酵条件进行了初步探索。优化得到的培养条件为:采用TB/SB培养基作为发酵培养基,接种终OD595为0.025,37?C 230 r·min-1条件下进行发酵,发酵5.5 h后将温度降低至20?C并开始诱导,诱导剂IPTG终浓度0.1 mmol·L-1同时添加终浓度为0.16 mol·L-1甘氨酸和0.1 mol·L-1氯化钠。诱导20 h后上清中酶活为5.1 U·m L-1。3、将基于摇瓶的发酵参数成功的Scale-down至MTP水平,建立了基于MTP的高通量培养技术。将常规的普鲁兰酶酶活测定方法移植于96孔MTP中,建立了普鲁兰酶酶活高通量检测方法,并与通量培养技术偶联建立了普鲁兰酶高通量筛选方法。4、利用易错PCR技术对普鲁兰酶基因进行扩增,扩增产物重组于表达载体p ET-28a(+)-pel B中,并导入E.coli BL21(DE3)感受态细胞构建文库,利用该高通量筛选方法实现了突变体文库的快速高效筛选并获得了一株突变菌株4A4,其分泌量提高了46.5%。该方法不仅适用于淀粉酶、纤维素酶等酶类的高通量筛选,同时为菌株文库的筛选以及蛋白质的定向进化提供了一种新思路。5、利用His-tag Protein Purification磁珠方法对普鲁兰酶进行纯化,并分析了纯化后的普鲁兰酶酶学性质。分析结果表明,定向进化前后的普鲁兰酶最适反应温度为60?C,最适反应p H为5.0,与野生型普鲁兰酶一致。本研究结果为普鲁兰酶的异源表达提供了理论基础,同时建立的普鲁兰酶高通量筛选方法为突变文库的快速筛选提供了指导,也为普鲁兰酶分泌提供了基础数据。(本文来源于《江南大学》期刊2015-06-01)

郑雨溪[6](2013)在《利用96孔板高通量RNAi筛选体系研究PRMT-6对秀丽线虫衰老的影响》一文中研究指出已知蛋白质的翻译后修饰在衰老的调控中扮演着非常重要的角色,但目前已经确定的参与衰老调控的蛋白翻译后修饰酶和相关蛋白仍非常有限。导致这种局限性的一个重要原因,就是目前缺少一种研究衰老调控的高通量筛选体系。秀丽线虫因为其生活周期短,是研究衰老的重要模式生物之一。另外,在线虫中已经建立了非常成熟且操作简单的RNAi筛选体系。因此,以秀丽线虫为研究对象,建立一种研究衰老相关基因的高通量筛选体系极为必要。在本论文中,我们将线虫的RNAi筛选体系与96孔板液体培养方法以及寿命检测方法相结合,建立了以96孔板液体培养条件为前提,研究衰老调控基因的高通量RNAi筛选体系。利用该体系以及含有115种蛋白翻译后修饰酶和相关基因dsRNA的RNAi library,我们筛选出与秀丽线虫衰老调控相关的精氨酸甲基转移酶PRMT-6。接下来,我们通过在daf-2、eat-2、clk-1、glp-1突变体线虫中进行prmt-6RNAi实验,发现PRMT-6通过Insulin/IGF-1(ⅡS)信号通路调控线虫衰老,而与能量限制信号通路,线粒体呼吸链/ATP合成体系信号通路,以及生殖腺相关信号通路无关。同时我们也发现PRMT-6在IIS信号通路中调控衰老的过程与SKN-1有关,而与该信号通路中的另一个关键转录因子DAF-16无关。本论文的研究为以秀丽隐杆线虫为模型的衰老相关基因的筛选和研究提供了新的手段和方法。(本文来源于《东北师范大学》期刊2013-06-01)

赵华,任晶,王虹,陈磊[7](2011)在《微孔板与响应面相结合筛选壳聚糖酶高产菌株》一文中研究指出利用微孔板与响应面相结合筛选壳聚糖酶高产茵株。经平板透明圈法从土样中筛选出60株产壳聚糖酶菌株,再经96孔板复筛得到1株产壳聚糖酶活力较高的菌株。通过Plackett-Bunnan设计实验确定蛋白胨、胶体壳聚糖、CaCl_2对产酶具有显着影响;最后应用中心组合设计和响应面分析得到以上3个因素的最佳浓度分别为(%,w/v):蛋白胨1.01%、胶体壳聚糖1.05%、CaCl_2 0.53%。在优化后的培养基中该菌株产壳聚糖酶达到34.95 U/mL,比优化前提高了2.31倍。(本文来源于《工业微生物》期刊2011年03期)

蔡万华,丁少鹏,叶蕊芳,耿丽云,倪琳[8](2011)在《利用96孔板和酿酒酵母生长圈复合筛选高产管囊酵母》一文中研究指出野生酿酒酵母不能利用木糖作为碳源,但是可以利用乙醇作为碳源和能源。管囊酵母可以利用木糖生产乙醇。酿酒酵母可以利用管囊酵母生产的乙醇作为碳源。本研究将管囊酵母进行紫外诱变后,利用96孔板培养,选取OD值较高的孔进行酿酒酵母生长圈筛选。管囊酵母在木糖(5%)为唯一碳源的YNB培养基上生长并产生乙醇。产生的乙醇越多,指示菌酿酒酵母的生长圈相对越大。利用酿酒酵母生长圈法筛选的正变率为35.22%,筛出1株菌UV171,乙醇产量为10.7 g/L,比对照高25.9%,对菌株UV171进行稳定性实验,传至3代其产量稳定。(本文来源于《酿酒科技》期刊2011年04期)

刘平怀,刘洋洋,陈德力,时杰,郝宗娣[9](2010)在《ASE联合微孔板刃天青显色法快速筛选海洋抗菌活性物质》一文中研究指出目的:建立一种快速筛选和评价抗菌活性物质的方法,并将其应用于海洋抗菌活性物质的筛选。方法:在对生物样品的提取过程中引入加速溶剂萃取技术(ASE),同时采用刃天青作为指示剂间接判断不同提取物样品的抗菌特性。结果:建立了一种快速筛选抗菌药物的方法,并发现白棘叁列海胆、梅氏长海胆、面包海星、秀丽节蛇尾的乙酸乙酯提取物对实验菌生长均具有较强抑制作用。结论:该方法克服了常规的纸片琼脂扩散法、试管肉汤稀释法等作为抗菌药物筛选方法的不足,可使数量庞大的生物活性物质中抗菌药物的高通量筛选与评价成为可能。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2010年15期)

魏冬霞,邓艳,吴绍强,林瑞庆,宋慧群[10](2010)在《96孔板-PCR排除法筛选猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因》一文中研究指出为了从猪蛔虫雌虫cDNA文库中筛选出猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因,本研究根据猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因的EST序列为模板设计引物,采用96孔板-PCR排除法对猪蛔虫雌虫cDNA文库进行筛选,并筛选出阳性克隆F993-G10-A10。测序结果表明,该基因序列长621bp,有完整的3'端。经BLAST分析,其推导的氨基酸序列与秀丽隐杆线虫(C.elegans)的卵黄蛋白原基因(Vit1、Vit2、Vit3、Vit4和Vit5)的氨基酸序列的一致性分别为35%、35%、34%、34%和35%,核苷酸序列相似性分别为55%、57%、54%、54%和53%。该阳性克隆的获得为该基因的深入研究奠定了基础。同时也证明了96孔-PCR排除法是一种高效、简便、低成本的筛选文库方法。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2010年09期)

基于孔板筛选论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

研究以微孔板检测法为基础,对α-葡萄糖苷酶抑制剂的抑制能力进行检测,以达到有效筛选适宜浓度的α-葡萄糖苷酶抑制剂用于制备降血糖类功能性食品的目的。试验针对酶浓度、检测波长、蔗糖底物浓度及酶反应时间进行反应条件优化。结果表明:试验中所用批次酶的最适浓度范围为2.0~3.0 mg/mL;在405,450,492,520,630nm 5种波长条件下,520nm和492nm波长检测信号最强;蔗糖底物浓度的合适范围应为20~40mmol/L;适宜的酶反应时间范围为20~30min。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

基于孔板筛选论文参考文献

[1].马欢欢,林洋,吕欣然,孙梦桐,白凤翎.96孔板法筛选抗黑曲霉性乳酸菌及抑菌机理研究[J].食品工业科技.2017

[2].王红月,陈中,简旭凤.微孔板法筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的条件优化[J].食品与机械.2016

[3].褚文宁,林东强,姚善泾.基于96-孔板高通量筛选的人血白蛋白层析分离优化[C].中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议论文集.2016

[4].杨洪梅,姚文斌,石磊,刘淑莹.利用链霉亲和素包被的96孔板模式与超高效液相色谱电喷雾质谱(UHPLC-ESI-MS)结合从复杂样品中高通量的筛选叁链DNA结合剂[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第四十叁分会:质谱分析.2016

[5].聂简琪.深孔板高通量细胞筛选技术的建立及在普鲁兰酶定向改造中的应用研究[D].江南大学.2015

[6].郑雨溪.利用96孔板高通量RNAi筛选体系研究PRMT-6对秀丽线虫衰老的影响[D].东北师范大学.2013

[7].赵华,任晶,王虹,陈磊.微孔板与响应面相结合筛选壳聚糖酶高产菌株[J].工业微生物.2011

[8].蔡万华,丁少鹏,叶蕊芳,耿丽云,倪琳.利用96孔板和酿酒酵母生长圈复合筛选高产管囊酵母[J].酿酒科技.2011

[9].刘平怀,刘洋洋,陈德力,时杰,郝宗娣.ASE联合微孔板刃天青显色法快速筛选海洋抗菌活性物质[J].中国实验方剂学杂志.2010

[10].魏冬霞,邓艳,吴绍强,林瑞庆,宋慧群.96孔板-PCR排除法筛选猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因[J].中国预防兽医学报.2010

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