联合环介导等温扩增技术和横向流动试纸条检测金黄色葡萄球菌

联合环介导等温扩增技术和横向流动试纸条检测金黄色葡萄球菌

论文摘要

目的应用环介导等温扩增技术(LAMP)和横向流动试纸条检测技术(LFD)联合检测金黄色葡萄球菌。方法从GenBank数据库下载多条金黄色葡萄球菌nuc基因序列,在其保守区域设计LAMP引物,建立LAMP-LFD恒温扩增快速检测技术;优化反应温度和体系后通过检测多种病原菌验证检测特异度和灵敏度,并比较LAMP-LFD和荧光PCR法的检测效果。结果 LAMP-LFD在最佳反应温度60℃条件下检测金黄色葡萄球菌具有高特异度,构建的阳性质粒DNA灵敏度达到1.0×101copies/μL。LAMP-LFD和荧光PCR法检测12份临床标本的阳性率均为75.00%;LAMP-LFD检测时间为35 min,而荧光PCR法约为1 h。结论 LAMP-LFD有灵敏度高、检测时间短等特点,可应用于金黄色葡萄球菌快速检测。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 仪器与试剂
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 引物设计
  •     1.3.2 基因组DNA制备
  •     1.3.3 质粒标准品构建
  •     1.3.4 LAMP-LFD反应体系和产物分析
  •     1.3.5 LAMP-LFD反应温度优化
  •     1.3.6 LAMP-LFD特异度试验
  •     1.3.7 灵敏度试验
  •     1.3.8 比较荧光PCR法和LAMP-LFD检测效果
  • 2 结果
  •   2.1 LAMP-LFD法最佳反应温度
  •   2.2 特异度和灵敏度试验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈欢,余蓓蓓,黄世旺,徐昌平,毛争争

    关键词: 金黄色葡萄球菌,环介导等温扩增技术,横向流动试纸条

    来源: 预防医学 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业,预防医学与卫生学

    单位: 台州市椒江区疾病预防控制中心,浙江大学医学院附属邵逸夫医院,杭州市江干区疾病预防控制中心,浙江省疾病预防控制中心

    基金: 台州市椒江区科技计划项目(172063)

    分类号: R155.5

    DOI: 10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2019.04.025

    页码: 423-425+429

    总页数: 4

    文件大小: 1524K

    下载量: 246

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