独活寄生汤抑制炎症介导软骨细胞基质降解的机制研究

独活寄生汤抑制炎症介导软骨细胞基质降解的机制研究

论文摘要

目的:探讨独活寄生汤抑制炎症介导软骨细胞基质降解的机制。方法:取4周龄SD大鼠10只,采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法建立软骨细胞体外培养体系。在光学显微镜下观察软骨细胞形态,用Ⅱ型胶原免疫组化鉴定软骨细胞。将第2代软骨细胞随机分为空白对照组、模型对照组、中药组,3组均连续干预培养8 h。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测干预后各组软骨细胞培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。采用Western blot检测干预后各组软骨细胞中蛋白多糖1(PGS1)、基质金属蛋白酶(MMP)-13、MMP-9、MMP-3、蛋白聚糖酶(ADAMTS)-4、ADAMTS-5蛋白表达量。结果:①软骨细胞免疫组化鉴定:第2代软骨细胞胞浆呈棕黄色,细胞核不着色,具备软骨细胞的典型特征。②ELISA检测结果:与空白对照组比较,模型对照组IL-1β、TNF-α含量明显升高(P < 0.05);与模型对照组比较,中药组IL-1β、TNF-α含量均明显下降(P < 0.05)。③Western blot法检测结果:与空白对照组比较,模型对照组PGS1蛋白表达量明显降低(P < 0.01),MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5蛋白表达量均明显升高(P < 0.01或P < 0.05);与模型对照组比较,中药组PGS1蛋白表达量明显升高(P < 0.05),MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5蛋白表达量均明显降低(P < 0.05)。结论:独活寄生汤可以通过调控IL-1β、TNF-α、PGS1、MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5表达,明显抑制脂多糖介导软骨细胞的炎症反应,改善软骨细胞基质稳态失衡,从而延缓软骨退变。

论文目录

  • 1 材料与仪器
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 实验药物
  •   1.3 实验试剂
  •   1.4 实验仪器
  • 2 方 法
  •   2.1 软骨细胞分离、培养及鉴定
  •   2.2 软骨细胞分组
  •   2.3 ELISA法检测软骨细胞培养液中IL-1β、TNF-α含量
  •   2.4 Western blot法检测软骨细胞中PGS1、MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5蛋白表达水平
  •   2.5 统计学方法
  • 3 结 果
  •   3.1 软骨细胞鉴定
  •   3.2 3组软骨细胞培养液中IL-1β、TNF-α含量比较
  •   3.3 3组软骨细胞中PGS1、MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5蛋白表达水平比较
  • 4 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李慧,马玉环,王圣杰,许丽梅,许云腾,曾建伟,王丽丽,李西海,叶蕻芝

    关键词: 骨关节炎,独活寄生汤,软骨细胞,炎症因子,软骨基质,大鼠

    来源: 风湿病与关节炎 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 福建中医药大学药学院,福建中医药大学中西医结合研究院,福建中医药大学福建省康复重点实验室,福建中医药大学福建省中西医结合老年性疾病重点实验室

    基金: 国家自然科学基金面上项目(81873319),福建省科技厅科技平台建设项目(2015Y2001),中国博士后科学基金第60批面上资助(2016M600625),中国博士后科学基金第10批特别资助(2017T100591)

    分类号: R285.5

    页码: 5-8+26

    总页数: 5

    文件大小: 1446K

    下载量: 133

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