麦芽糖启动子论文_程媛,汪桂萍,孙畅,米慧芝,韦宇拓

导读:本文包含了麦芽糖启动子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:芽孢,麦芽糖,枯草,杆菌,基因,论文,Pglv。

麦芽糖启动子论文文献综述

程媛,汪桂萍,孙畅,米慧芝,韦宇拓^[1]（2019）在《枯草芽孢杆菌麦芽糖诱导型启动子Pglv-M1的改造》一文中研究指出通过定点突变对麦芽糖诱导型启动子Pglv-M1进行改造,提高启动子启动能力。分析Pglv-M1的Sextama-35区与Pri-bmow-10区,通过对这些区域模拟随机突变,软件打分后获得最高分的新片段。将新启动子与载体p HCMC04-sva连接,并在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 1A857中诱导表达,每12 h取粗酶液进行酶活测定。研究结果表明:除突变启动子Pglv-35以外,其余突变体启动效果均有所下降,有突变体构成的表达载体Pglv-35-pHCMC04-sva诱导表达后,得到的单位粗酶活力最高点出现在36 h处,较突变前提高1.31倍。PglvM1作为诱导型启动子Pglv的改造产物,其各个区域的相互影响较为紧密。通过对启动子关键区域单独或同时突变,仅获得一组启动能力有所提高的启动子Pglv-35,这为今后针对启动子的思考、研究方向提供参考。(本文来源于《广西科学》期刊2019年02期）

余志强^[2]（2004）在《枯草芽孢杆菌麦芽糖启动子P△glvA整合表达载体的构建及启动子功能的初步探讨》一文中研究指出在原核生物界，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是继大肠杆菌(E.coli)后最有发展前景的外源基因表达体系。但枯草芽孢杆菌自身没有合适的内源质粒，现用于枯草杆菌的载体大都来自于其它种属的细菌，如金黄色葡萄球菌，乳酸杆菌等，虽然已有外源基因成功克隆表达的报道，但由于其在枯草杆菌中存在分离复制的不稳定及外源基因的克隆表达效率低的现象，故都不是枯草杆菌的最佳选择。将外源目的基因整合到染色体上复制表达是解决染色体外复制质粒在宿主中遗传不稳定现象的有效策略。另外，一个好的表达载体除了遗传与复制稳定外，还应该有一个高效的表达盒。包括启动子元件，终止子元件和合适的多克隆位点。其中，一个强而可控的启动子是实现外源基因高效表达的关键。启动子表达的强弱一般会受到自身和宿主多种因素的影响。本课题主要工作是构建带有代谢物阻遏元素(catabolite repression element)突变(cre~-)的枯草杆菌麦芽糖启动子P△glvA，并以嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的热稳定的β-半乳糖甙酶基因(bga)为报告基因，以整合载体PAX01为骨架的整合表达载体Pyzq-3；另外，为了初步探讨枯草杆菌spo0A因子对麦芽糖启动子的功能，从枯草杆菌(Bacillus subtilis)168的衍生菌株1094的基因组DNA中分别扩增孢子形成的早期因子基因spo0A的上、下游片段spo0A-front和spo0A-back，并以大肠杆菌(E.coli)质粒pBluescript Ⅱ ks(+)为骨架，以来自pBEST501质粒上的新霉素(neo~r)抗性基因为枯草杆菌中的筛选标记，构建了基于枯草杆菌spo0A基因位点的整合载体Pyzq-1。将线性化的Pyzq-3转化宿主枯草杆菌IA785，得到突变株GJYY-03。线性化的载体Pyzq-1转化突变株GJYY-03，得到突变株GJYY-05。检测突变株GJYY-03，GJYY-05在不同浓度诱导物(含0％，0.2％，0.5％，1％浓度的麦芽糖)，培养基中含1％浓度的葡萄糖的情况下由P△glvA控制的β-半乳糖甙酶酶活。结果表明，启动子P△glvA在0.5％浓度的麦芽糖诱导下表现出最大的活性；培养基中存在1％的葡萄糖，由启动子P△glvA控制的β-半乳糖甙酶的活性受华中农业大学2004届硕士毕业论文到抑制;sPo0A基因产物的缺失(sPo0A一)，由启动子P△glvA控制的p一半乳糖贰酶的活性也受到抑制;而且，在培养基中存在1%葡萄糖及spoOA基因产物的缺失(sP口0A一)双重因子的作用下，启动子P△glvA的活性受到了严重且长久的抑制。(本文来源于《华中农业大学》期刊2004-06-01）

麦芽糖启动子论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

在原核生物界，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是继大肠杆菌(E.coli)后最有发展前景的外源基因表达体系。但枯草芽孢杆菌自身没有合适的内源质粒，现用于枯草杆菌的载体大都来自于其它种属的细菌，如金黄色葡萄球菌，乳酸杆菌等，虽然已有外源基因成功克隆表达的报道，但由于其在枯草杆菌中存在分离复制的不稳定及外源基因的克隆表达效率低的现象，故都不是枯草杆菌的最佳选择。将外源目的基因整合到染色体上复制表达是解决染色体外复制质粒在宿主中遗传不稳定现象的有效策略。另外，一个好的表达载体除了遗传与复制稳定外，还应该有一个高效的表达盒。包括启动子元件，终止子元件和合适的多克隆位点。其中，一个强而可控的启动子是实现外源基因高效表达的关键。启动子表达的强弱一般会受到自身和宿主多种因素的影响。本课题主要工作是构建带有代谢物阻遏元素(catabolite repression element)突变(cre~-)的枯草杆菌麦芽糖启动子P△glvA，并以嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的热稳定的β-半乳糖甙酶基因(bga)为报告基因，以整合载体PAX01为骨架的整合表达载体Pyzq-3；另外，为了初步探讨枯草杆菌spo0A因子对麦芽糖启动子的功能，从枯草杆菌(Bacillus subtilis)168的衍生菌株1094的基因组DNA中分别扩增孢子形成的早期因子基因spo0A的上、下游片段spo0A-front和spo0A-back，并以大肠杆菌(E.coli)质粒pBluescript Ⅱ ks(+)为骨架，以来自pBEST501质粒上的新霉素(neo~r)抗性基因为枯草杆菌中的筛选标记，构建了基于枯草杆菌spo0A基因位点的整合载体Pyzq-1。将线性化的Pyzq-3转化宿主枯草杆菌IA785，得到突变株GJYY-03。线性化的载体Pyzq-1转化突变株GJYY-03，得到突变株GJYY-05。检测突变株GJYY-03，GJYY-05在不同浓度诱导物(含0％，0.2％，0.5％，1％浓度的麦芽糖)，培养基中含1％浓度的葡萄糖的情况下由P△glvA控制的β-半乳糖甙酶酶活。结果表明，启动子P△glvA在0.5％浓度的麦芽糖诱导下表现出最大的活性；培养基中存在1％的葡萄糖，由启动子P△glvA控制的β-半乳糖甙酶的活性受华中农业大学2004届硕士毕业论文到抑制;sPo0A基因产物的缺失(sPo0A一)，由启动子P△glvA控制的p一半乳糖贰酶的活性也受到抑制;而且，在培养基中存在1%葡萄糖及spoOA基因产物的缺失(sP口0A一)双重因子的作用下，启动子P△glvA的活性受到了严重且长久的抑制。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。