猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株国家核酸标准物质的研制

猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株国家核酸标准物质的研制

论文摘要

为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)欧洲株国家核酸标准物质,将PRRSV欧洲株代表毒株LV接种Marc145细胞,待出现细胞病变后,反复冻融收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、数字PCR法定值、不确定度分析和临床试用。结果显示,制备的标准物质的定值为(1.83±0.22)×104copies/μL;样品均匀;-20℃稳定保存12个月以上,4℃稳定2个月以上。经全国标准物质管理委员会的专家评审,该制备物达到了国家二级标准物质的要求,可以作为核酸扩增检测的PRRSV核酸标准物质。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要试剂
  •   1.2 主要仪器
  •   1.3 标准物质的制备
  •   1.4 均匀性评估
  •   1.5 稳定性评估
  •     1.5.1 长期稳定性评估
  •     1.5.2 短期稳定性评估
  •   1.6 标准物质的定值
  •   1.7 不确定度的评定
  •   1.8 定值结果
  •   1.9 临床试用
  • 2 结果
  •   2.1 标准物质的制备
  •   2.2 均匀性检测结果
  •   2.3 稳定性检测结果
  •     2.3.1 长期稳定性评估结果
  •     2.3.2 短期稳定性评估结果
  •   2.4 标准物质的定值结果
  •   2.5 不确定度的评定
  •     2.5.1 均匀性引入的不确定度
  •     2.5.2 稳定性引入的不确定度
  •     2.5.3 定值过程引入的不确定度
  •     2.5.4 标准值的不确定度评定
  •   2.6 定值结果的表示
  •   2.7 试用结果
  •   2.8 评审结论
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 原霖,钟凤然,董浩,陈亚娜,孙圣福,柴方红,宋晓晖,翟新验,杨林,王传彬

    关键词: 核酸扩增,标准物质,数字法

    来源: 中国兽医学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国动物疫病预防控制中心,广州邦德盛生物科技有限公司,山东省动物疫病预防控制中心,吉林省动物疫病预防控制中心

    基金: 动物及动物产品质量安全检测标准物质研制基金资助项目(2013FY113300-6)

    分类号: S852.651

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.04.04

    页码: 627-630

    总页数: 4

    文件大小: 116K

    下载量: 77

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