重组诱饵质粒论文-吴启进,金亚美,李勉,刘金明,王小波

重组诱饵质粒论文-吴启进,金亚美,李勉,刘金明,王小波

导读:本文包含了重组诱饵质粒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:酵母双杂交技术,抱雌沟蛋白,自激活

重组诱饵质粒论文文献综述

吴启进,金亚美,李勉,刘金明,王小波[1](2010)在《酵母双杂交诱饵蛋白日本血吸虫抱雌沟蛋白重组质粒的构建及鉴定》一文中研究指出为筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的因子,本研究以抱雌沟蛋白(gynecophoral canal protein ofSchistosoma japonicum,SjGCP)为诱饵蛋白构建了用于酵母双杂交筛选系统的重组质粒。根据日本血吸虫抱雌沟蛋白的基因序列设计引物,经过PCR扩增、酶切回收,与经相应酶切的线性化载体pBGKT7-BD连接构建重组质粒。随后将重组质粒pGBKT7-BD-SjGCP转化酵母菌株,测定融合蛋白BD-SjGCP在酵母菌中的自激活活性、对酵母菌生长的影响及在酵母中的表达情况。结果显示构建的重组诱饵蛋白质粒pGBKT7-BD-SjGCP能够在酵母细胞内正确表达,没有独自激活报告基因表达的活性,且其表达对酵母细胞没有毒性,不影响酵母细胞的生长。可见,重组质粒pGBKT7-BD-SjGCP可用于筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的物质。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2010年03期)

符庆瑛,高钰琪[2](2006)在《AMP激活的蛋白激酶α2大肠杆菌双杂交诱饵重组质粒的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建大肠杆菌双杂交系统的诱饵重组质粒。方法PCR扩增大鼠AMP激活的蛋白激酶α2(AMP-ac-tivated prote in k inaseα2,AMPKα2)蛋白编码区cDNA,与大肠杆菌双杂交表达载体pBT构建融合蛋白表达质粒pBT-AMPKα2。经酶切和测序鉴定后,将pBT-AMPKα2转化XL-1 B lue MRF’大肠杆菌报告菌株,检测诱饵融合蛋白的表达。并用pBT-AMPKα2和pTRG空载体共转化XL-1 B lue MRF’菌株,通过3-氨基-1,2,4-叁唑(3-am ino-1,2,4-triazole,3-AT)选择性筛选平板检测诱饵融合蛋白的自激活作用。结果酶切和测序结果表明AMPKα2蛋白编码序列成功克隆入pBT载体,融合区阅读框正确。诱饵重组质粒pBT-AMPKα2能表达λcI/AMPKα2融合蛋白。转化有pBT-AMPKα2和pTRG空载体的XL-1 B lue MRF’大肠杆菌报告菌株在3-AT选择性筛选平板上不生长,而在no 3-AT非选择性筛选平板上生长良好,表明pBT-AMPKα2重组质粒能在大肠杆菌细胞中正确表达且无自激活作用。结论构建的pBT-AMPKα2诱饵重组质粒可用于下一阶段的cDNA文库筛选。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2006年19期)

买铁军,汪欣,张志文,师长进,辛殿旗[3](2003)在《雄激素受体相关蛋白267-α酵母双杂交诱饵重组质粒的构建及转化》一文中研究指出目的 构建和转化雄激素受体相关蛋白 2 67 α(ARA2 67 α)的酵母诱饵重组质粒 ,为通过酵母双杂交研究ARA2 67 α的功能奠定基础。方法 用PCR扩增ARA2 67 α全长cDNA中编码PWWP和PHD SET蛋白结构域的两个基因片段 ;将基因片段与 pGBKT7载体定向重组 ;用酶切和测序鉴定重组质粒 ;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入AH 10 9酵母菌株。结果 成功构建pGBKT7 PWWP和 pGBKT7 PHDSET重组质粒。分别转化有 2种重组质粒和pGBKT7空载体的3种AH10 9酵母都能在SD/ Trp/X α gal培养基中长成白色菌落 ,但都不能在SD/ His/ Trp/2 .5mmol/L 3 AT/X α gal和SD/ Ade/ Trp/X α gal培养基中生长 ,在SD/ Trp液中培养 16h后 ,A60 0均值分别为 0 .8、0 .9、0 .9。这表明重组质粒表达的融合蛋白没有激活HIS3、ADE2和MEL1酵母报告基因表达的活性 ,也没有酵母毒性作用。结论 构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的cDNA文库筛选(本文来源于《中华实验外科杂志》期刊2003年09期)

重组诱饵质粒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的构建大肠杆菌双杂交系统的诱饵重组质粒。方法PCR扩增大鼠AMP激活的蛋白激酶α2(AMP-ac-tivated prote in k inaseα2,AMPKα2)蛋白编码区cDNA,与大肠杆菌双杂交表达载体pBT构建融合蛋白表达质粒pBT-AMPKα2。经酶切和测序鉴定后,将pBT-AMPKα2转化XL-1 B lue MRF’大肠杆菌报告菌株,检测诱饵融合蛋白的表达。并用pBT-AMPKα2和pTRG空载体共转化XL-1 B lue MRF’菌株,通过3-氨基-1,2,4-叁唑(3-am ino-1,2,4-triazole,3-AT)选择性筛选平板检测诱饵融合蛋白的自激活作用。结果酶切和测序结果表明AMPKα2蛋白编码序列成功克隆入pBT载体,融合区阅读框正确。诱饵重组质粒pBT-AMPKα2能表达λcI/AMPKα2融合蛋白。转化有pBT-AMPKα2和pTRG空载体的XL-1 B lue MRF’大肠杆菌报告菌株在3-AT选择性筛选平板上不生长,而在no 3-AT非选择性筛选平板上生长良好,表明pBT-AMPKα2重组质粒能在大肠杆菌细胞中正确表达且无自激活作用。结论构建的pBT-AMPKα2诱饵重组质粒可用于下一阶段的cDNA文库筛选。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

重组诱饵质粒论文参考文献

[1].吴启进,金亚美,李勉,刘金明,王小波.酵母双杂交诱饵蛋白日本血吸虫抱雌沟蛋白重组质粒的构建及鉴定[J].中国动物传染病学报.2010

[2].符庆瑛,高钰琪.AMP激活的蛋白激酶α2大肠杆菌双杂交诱饵重组质粒的构建及鉴定[J].第叁军医大学学报.2006

[3].买铁军,汪欣,张志文,师长进,辛殿旗.雄激素受体相关蛋白267-α酵母双杂交诱饵重组质粒的构建及转化[J].中华实验外科杂志.2003

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