导读:本文包含了附植前胚胎论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:胚胎,小鼠,细胞,蛋白,微管,磷酸化,体细胞。
附植前胚胎论文文献综述
殷珂,田文儒,李华涛[1](2018)在《附植前胚胎耐热应激损伤的MAPKs信号通路调控的研究进展》一文中研究指出热应激(环境高温或热性疾病)致附植前胚胎发育阻滞/死亡是导致家畜(尤其是奶牛)夏季妊娠率低的主要因素,就热应激时附植前胚胎丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路的级联激活调节细胞增殖和分化,阻遏细胞凋亡,促进生长因子表达等研究和热应激时MAPKs信号通路对牛附植前胚胎的信号调控进行综述,重点阐述MAPKs通路对附植前胚胎的重要作用。通过对近年来国内外对附植前胚胎受热损伤和MAPKs信号通路的级联激活以及它们之间关联的研究进展的总结,并结合青岛农业大学产科实验室近年来对降低夏季由热应激引起的细胞凋亡的相关研究,来揭示附植前胚胎耐热应激损伤的MAPKs信号通路调控的研究进展。MAPKs信号通路在附植前胚胎的信号转导通路中占有重要位置。在热应激作用下,附植前胚胎经历氧化、凋亡和合成调节蛋白过程,胚胎能否存活,取决于其自身耐热能力及胚胎生存环境,并需要借助于信号通路的精细调控,不论是内因还是外因都可能通过MAPKs信号通路级联调控胚胎存亡。热应激时,MAPKs信号通路各成员在附植前胚胎中的生物学效应各不相同,并且相互联系,共同调控着附植前胚胎的分化、凋亡等过程,转导刺激信号,参与机体内的反应。热应激后胚胎细胞的生死取决于自身抗热能力(内因)和其在子宫/培养的生存环境(外因),并且内、外因素均与MAPKs信号转导通路有关。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年S1期)
王文娟[2](2018)在《小鼠附植前胚胎新生DNA甲基化的特点及功能分析》一文中研究指出早期胚胎会经历剧烈的表观修饰变化,其中最为显着的是囊胚之前胚胎整体持续的DNA去甲基化(DNA demetylation)过程,以及囊胚之后新生DNA甲基化(de novo DNA methylation),这两个过程对于胚胎的质量和发育能力,至关重要。一般认为,de novo DNA methylation主要发生在囊胚之后的附植过程中。我们发现,负责de novo DNA methylation最为关键的DNA甲基转移酶--DNMT3B,在附植前的发育阶段,即8-cell之后,在mRNA和蛋白水平都有明显的表达。因此我们推测,胚胎在附植之前有可能已经部分地发生了de novo DNA methylation。为了验证这一假设,我们利用已发表的附植前胚胎DNA甲基化数据,对8-cell到囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM),即Dnmt3b已经表达的这一阶段的DNA甲基化动态进行了“再分析”。数据显示,附植前的确存在de novo DNA methylation的现象,在这一阶段,一共有3401个基因的promoter出现了DNA甲基化上调,占到基因综述的28.54%。而DNA demethylation仍然是这一阶段的主要趋势,有8257个基因的promoter出现了DNA甲基化降低的趋势,占到基因总数的71.46%。此外,分析还发现,附植前de novo DNA methylation主要发生在CpG密度较高(HCG)的区域,并且与常染色体相比,X染色体发生de novo DNA methylation的比例更高。进一步,为了了解这些甲基化变化可能的生物学意义,我们利用附植前胚胎转录组数据,我们对8cell到ICM的甲基化变化和基因表达变化,进行了整合分析。结果显示,附植前de novo DNA methylated promoter主要是倾向于对细胞增殖、细胞器功能和基因表达进行调控,而DNA demethylated promoter则主要倾向于对细胞分化的命运、细胞代谢能力进行调节。在上述基础上我们进一步分析了IVF囊胚和体内囊胚DNA甲基化修饰的差异,发现IVF囊胚整体的DNA甲基化水平明显偏高。在应当发生de novo DNA methylation的promoter中,只有小部分出现上升不足的问题,而大量应该发生DNA demethylation的基因则没有充分地下调甲基化修饰。同时,我们还发现附植前体内外胚胎Dnmts的表达并无显着差异,因此推测IVF囊胚整体甲基化偏高的问题可能是由于DNA demethylation不充分导致的。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2018-05-01)
郝镁娟[3](2018)在《小鼠老化卵母细胞微管分布对体外受精后附植前胚胎发育的影响》一文中研究指出目的:1.卵母细胞的老化,不仅影响正常的生育力,而且对辅助生殖技术的施展也有着严重影响,如在体外受精过程中出现获卵率降低,受精率下降,胚胎质量下降,早期妊娠流产可能性増加,后代发育异常等问题。因此卵母细胞老化及其机制的研究在提高卵母细胞质量以及改善ARTs(artificial reproductive technologies)结局中至关重要。本实验通过研究小鼠卵母细胞微管的分布,探索细胞微管分布情况在老化卵子IVF后对其胚胎发育的影响。2.为改善老化卵IVF发育效率,提供参考和借鉴。方法:1.本实验以7-8周的ICR雌性小鼠为实验动物,对其促排后,剥离输卵管获取卵母细胞,然后进行IVF;2.在10、50、100、150μmol/L浓度的过氧化氢(H_2O_2)作用下,通过氧化应激诱导小鼠卵母细胞衰老,选出最适浓度来诱导形成老化卵母细胞模型;3.以2、4、8细胞胚胎以及囊胚发育率作为卵母细胞质量的主要评价指标;4.将两组卵母细胞,2细胞,4细胞阶段胚胎以及囊胚分别进行免疫荧光染色,对比观察两组卵母细胞及各个胚胎发育阶段β-Tubulin微管蛋白的表达及分布情况。结果:1.与10、50、150相比100μmol/L H_2O_2为诱导卵母细胞老化的最适浓度;2.用100μmol/L H_2O_2处理小鼠卵母细胞3小时,后进行IVF,2细胞,4细胞,8细胞,囊胚形成率均小于正常组(P<0.05);3.正常组小鼠卵母细胞内可见微管形成纺锤体,且β-tubulin在胞质内均匀分布,老化组小鼠卵母细胞内未见微管形成纺锤体,且β-tubulin在胞质内呈现不均匀分布的状态,主要分布在细胞核周围,;4.正常组小鼠卵母细胞IVF后,2、4细胞时期,β-Tubulin微管蛋白散在分布在每个卵裂球中,且在细胞膜下及卵裂沟处表达增强,形成收缩环。老化组小鼠卵母细胞IVF后,2、4细胞两个卵裂球中的β-Tubulin微管蛋白在细胞质中散在分布,表达量较对照组减少,未见纺锤体形成,没有收缩环;5.正常组小鼠卵母细胞IVF后,小鼠囊胚卵裂球中β-Tubulin微管蛋白在各个卵裂球中呈现出不同的分布情况。在部分卵裂球中β-Tubulin微管蛋白形成的纺锤体清晰可见,部分卵裂球中β-Tubulin微管蛋白却呈现出散在分布的状态。老化组小鼠卵母细胞IVF后,小鼠囊胚卵裂球中β-Tubulin微管蛋白在各个卵裂球中表达较正常组少,且未见纺锤体形成。结论:1.用100μmol/L H_2O_2处理小鼠卵母细胞,可作为老化卵母细胞模型;2.小鼠老化卵母细胞体外受精后2、4、8细胞胚胎及囊胚形成率均下降;3.小鼠老化卵母细胞的β-Tubulin微管蛋白分布紊乱,阻碍了卵裂球及囊胚内卵裂细胞纺锤体的形成,也阻碍其在卵裂沟处收缩环的形成。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-03-01)
张胜[4](2016)在《牛IVF、SCNT和孤雌胚胎附植前发育过程中DNA甲基化的研究》一文中研究指出研究认为,表观遗传修饰重编程不充分是导致体细胞核移植(SCNT)胚胎发育异常的主要原因之一。因此,本实验通过比较牛体外受精(IVF)和SCNT附植前胚胎DNA甲基化及组蛋白H3K9me3的动态变化,旨在阐明牛SCNT附植前胚胎的表观遗传修饰重编程情况。结果显示:(1)牛IVF附植前胚胎全基因组甲基化修饰经历了一个典型的去甲基化与再甲基化的动态变化过程。TET3是TET基因家族在牛早期胚胎中主要表达的成员。satellite I、α-satellite、POU5F1和NANOG基因经历了明显的DNA去甲基化过程,而印记基因H19对DNA去甲基化过程表现出一定的抵抗能力,SOX2和CDX2基因启动子区域始终处于低甲基化修饰状态。H3K9me3在牛IVF附植前胚胎中一直维持着较高的信号强度;(2)与IVF附植前胚胎相比,牛SCNT附植前胚胎中始终维持着较高的5m C含量,并且无明显的变化趋势。同时,未发现5hm C信号的存在。特定基因位点同样表现出异常的DNA甲基化修饰:satellite I、α-satellite、POU5F1和NANOG基因均表现出不完全的DNA去甲基化,印记基因H19则表现出过度的去甲基化。Vitamin C的添加可改善satellite I、α-satellite和H19基因的甲基化修饰,但对POU5F1和NANOG并没有体现出有利的影响,对SOX2和CDX2则无显着影响;(3)DNA甲基转移酶抑制剂(RG108)的添加显着降低了牛孤雌胚胎发育的囊胚率和特定基因位点(NANOG、satellite I和α-satellite)的DNA甲基化修饰水平,但同时显着增加了囊胚期的凋亡细胞数和促凋亡基因BAX的表达。(本文来源于《吉林大学》期刊2016-06-01)
吕玉琦[5](2015)在《GSTM2-STAT1对子宫识别附植前胚胎作用的研究》一文中研究指出谷胱甘肽-S-转移酶在生物体内是一种重要的解毒酶,参与到多种生物过程中,其中谷胱甘肽-S-转移酶mu亚基(GSTM)对猪的繁殖性能有重要影响。GSTM2基因第5外显子中一个碱基的无义突变,使该基因发生了无义介导的m RNA降解,并发现该突变可能导致妊娠母猪早期流产或仔猪出生后夭折的现象。为了研究其中的作用机制,本课题组前期在猪的睾丸(ST)细胞中进行了GSTM2基因的RNAi试验,并进行了转录组测序。对测序结果进行GO、Pathways和Networks分析发现干涉GSTM2后,部分免疫相关基因及一些粘附分子的表达发生了显着的改变。据此推测,该基因可能对胚胎附植中炎症反应过程有重要的影响,其中差异基因STAT1可能与GSTM2有相互作用关系。为了进一步研究GSTM2与STAT1间的作用关系,本研究对GSTM2基因进行超表达,检测了胚胎附植相关基因的表达情况。利用免疫共沉淀技术验证二者间的关系,同时对STAT1基因进行了超表达和干涉试验,并验证STAT1对其下游靶基因的作用,以期为胚胎附植相关研究提供理论依据。主要研究结果如下:1.利用实时定量PCR对测序数据中的差异表达基因进行定量验证。对差异基因中12个基因进行验证,q PCR结果显示与测序结果一致。2.采集不同妊娠时期和空怀的子宫内膜样品(时期分别为妊娠12d、15d、18d及32d),提取RNA。检测了GSTM2、STAT1、OPN、MUC4、ITGAV、ADAMTS1等基因在不同时期子宫内膜的表达情况。结果显示:GSTM2在妊娠18d及32d高表达,STAT1在妊娠15d和18d高表达。3.构建GSTM2超表达载体,转染猪睾丸细胞,分别在24h、48h对其m RNA水平及蛋白水平进行检测,结果显示GSTM2超表达效果显着(P<0.01)。超表达GSTM2对STAT1蛋白水平和m RNA水平的表达影响不明显,但抑制了STAT1的磷酸化。4.利用免疫共沉淀技术验证GSTM2与STAT1的相互作用,western blot结果显示二者相互结合。5.设计并合成了叁对STAT1基因的si RNA片段,分别将si RNA片段转染ST细胞。转染后24h在m RNA水平检测STAT1的表达情况(P<0.05)。发现叁对si RNA均有效果(P<0.05),而第二对si RNA片段干涉效果最显着,western blot结果显示STAT1的蛋白水平下降。6.在m RNA水平分别检测了干涉STAT1后相关基因的表达情况。其中GSTM2表达没有改变,而OPN、ITGAV、ADAMTS1及MUC4基因的表达水平显着下调(P<0.05)。7.构建了STAT1超表达载体,并转染ST细胞。分别对其在m RNA水平及蛋白水平检测,超表达效果显着(P<0.05)。并对下游基因进行q PCR检测,结果显示:GSTM2基因及黏附相关基因OPN、ITGAV、ADAMTS1及MUC4表达差异不显着,而免疫相关基因IFIT1、IFIT3、MX1、OAS1及OAS2表达呈现显着性的上调表达(P<0.05)。综合以上结果:通过对测序结果分析我们推测GSTM2主要通过黏附分子和炎症分子两方面的信号通路参与到胚胎附植过程;分析猪早期妊娠子宫内膜中相关基因的表达,我们推测GSTM2与STAT1均参与到猪的胚胎附植过程,GSTM2通过调节STAT1的磷酸化从而影响子宫对胚胎的识别和胚胎的附植等过程。(本文来源于《华中农业大学》期刊2015-06-01)
李巧丹,习海涛,张运海,李运生,方富贵[6](2014)在《干细胞因子对小鼠附植前胚胎体外发育的影响》一文中研究指出为优化胚胎体外培养体系,提高胚胎体外培养发育率和发育质量,以昆明小鼠体内受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚为研究对象,研究不同浓度干细胞因子对小鼠不同来源胚胎体外发育的影响。结果表明:在KSOM培养液中,小鼠自然受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚的卵裂率和桑椹胚率均无显着差异(P>0.05),但IVN胚和IVF胚的囊胚发育率及囊胚细胞总数显着高于孤雌激活胚;培养液中添加不同浓度的干细胞因子对小鼠自然受精胚和孤雌激活胚的卵裂率、桑椹胚率、囊胚发育率和囊胚细胞总数都没有显着的影响(P>0.05),但干细胞因子浓度为100ng·mL-1时,小鼠体外受精胚的桑椹胚率和囊胚发育率显着高于对照(P<0.05)。(本文来源于《黑龙江农业科学》期刊2014年08期)
李巧丹[7](2014)在《Ezrin在小鼠附植前胚胎中的表达规律及功能》一文中研究指出Ezrin在上皮细胞极化过程中发挥着重要作用,同时对细胞粘附、细胞迁移、细胞增殖、细胞信号传导和细胞形态的维持等多种生命活动均起到重要调节作用。磷酸化修饰是调控Ezrin活性最重要的机制。目前己鉴定的调节Ezrin功能的磷酸化位点有7个。已有的研究表明小鼠卵母细胞及附植前胚胎中都有Ezrin表达,并且存在Tyr及其他氨基酸残基的磷酸化修饰,但究竟是哪些位点发生了磷酸化?其在胚胎发育中的意义是什么?目前不得而知。本论文研究了Ezrin在小鼠早期胚胎中的表达、修饰及定位规律,探讨Ezrin对小鼠早期胚胎发育的影响,为进一步研究附植前胚胎发育提供了一定理论依据。本试验利用荧光定量PCR、间接免疫荧光实验研究了ezrin在小鼠早期胚胎中的表达、修饰及定位规律,并采用siRNA干扰手段研究了ezrin对小鼠早期胚胎发育的影响。试验分为以下3个部分:1、小鼠附植前胚胎中ezrin表达规律收集小鼠附植前各时期胚胎,提取总RNA进行反转录,以actin为内参基因,以实时荧光定量PCR方法研究小鼠早期胚胎ezrin表达规律,发现:从原核期向囊胚发育过程中小鼠胚胎内ezrin相对表达量呈现先升高后降低的趋势。在2-C期,ezrin mRNA相对表达量达到最大,极显着高于其他发育阶段的胚胎(P<0.01),之后,随着胚胎发育而迅速直线下降,到8-C期达到最低水平,随后又逐渐上升,但从桑椹胚向囊胚发育时,ezrin相对表达量以再次下降。2、小鼠附植前胚胎中ezrin的修饰及定位规律收集小鼠从原核期到囊胚期不同发育阶段的胚胎,用ezrin抗体及p-ezrin(Tyr354)及p-ezrin(Thr567)抗体进行间接免疫荧光染色,观察小鼠早期胚胎内ezrin磷酸化修饰情况及定位规律。结果发现:1)在原核期和2-细胞期胚胎中,ezrin主要定位在胞质;而从4-C到桑椹胚期,ezrin在胞质、胞核中均有定位;在囊胚期,ezrin则主要定位在细胞皮层区域;2)从原核期到囊胚期小鼠胚胎内ezrin均有部分分子发生了Tyr354磷酸化修饰,并且除原核期胚胎外,p-ezrin(Tyr354)均在细胞核内有明显富集;3)从原核期到囊胚期小鼠胚胎内ezrin均有Thr567磷酸化修饰;在原核期胚胎和桑椹胚,p-ezrin(Thr567)主要定位在皮层区,尤其是在桑椹胚外层细胞的顶膜皮层定位最多;在2-细胞期,p-ezrin(Thr567)在卵裂球的胞质和皮层区均有分布,但在细胞接触处明显富集;而在4-细胞及8-细胞期胚胎中,p-ezrin(Thr567)除在胞间连接处富集外,在核内也有明显富集;在囊胚期,p-ezrin(Thr567)主要在细胞核和细胞皮层区中富集。3、Ezrin在小鼠早期胚胎发育中的功能收集小鼠原核期胚胎平均分成2组,试验组注射验证过的ezrin siRNA,对照组注射阴性siRNA,比较两组间胚胎发育效率及囊胚细胞总数。结果发现:试验组2-细胞期、4-细胞期及8-细胞期胚胎发育率均与对照组相似,桑椹及囊胚发育率则明显低于对照组,但两组间差异不显着(P>0.05)。此外,敲低ezrin后导致小鼠囊胚荧光值和囊胚细胞鼠较对照组囊胚荧光值和囊胚细胞数减少,并且差异极显着(P<0.01)。本试验证明了小鼠早期胚胎内ezrin Tyr354和Thr567位点发生了磷酸化修饰;ezrin参与了小鼠桑-囊期胚胎发育调控。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2014-06-01)
胡德宝,庄利利,张日欣,张也,李钟淑[8](2014)在《WY14643对附植前小鼠胚胎体外发育及活性氧的影响》一文中研究指出为研究人工合成的过氧化物酶体增值物激活受体α特异性受体激活剂(WY14643)对附植前小鼠胚胎体外发育的影响,以及WY14643对附植前小鼠胚胎内部活性氧的影响,通过H2O2诱导建立胚胎氧化损伤模型,添加不同浓度WY14643对胚胎进行体外培养,利用2’7’二氯荧光素二乙酸盐(DCHFDA)测定胚胎内部H2O2含量。结果表明:不同浓度WY14643处理2 h后,0.1μmol/L WY14643处理组4-细胞发育率、囊胚率显着高于其他各组(P<0.05);经0.1μmol/L WY14643和H2O2联合处理后,其胚胎发育率显着高于单独H2O2处理组和对照组(P<0.05);DCHFDA荧光检测发现,WY14643添加组胚胎内部各时期H2O2水平显着低于其他各组(P<0.05),并且胚胎内部H2O2呈一定的变化规律。说明适宜浓度的WY14643能够增加体外发育胚胎的发育率,减少胚胎内部活性氧水平,并且胚胎内部H2O2水平在4-细胞时期达到最高,囊胚时期显着下降。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2014年01期)
索佳佳,张保珍,孙春玲,王占美,张双[9](2013)在《钙调蛋白(CaM)对附植前小鼠胚胎热休克蛋白70(HSP70)表达的影响》一文中研究指出体外培养的奶牛,绵羊和小鼠的附植前胚胎在热应激条件下能够合成热休克蛋白70以增强胚胎的耐热性保护其不受热损伤。而钙调蛋白(CaM)是细胞内最重要的Ca2+受体蛋白并参与细胞活动中重要基因的转录活动。本实验旨在研究CaM参与小鼠(Mus musculus)胚胎热应激诱导型热休克蛋白70(HSP70)的表达,且明确CaM参与HSP70表达的具体途径。将发育至早期囊胚的胚胎分成空白对照(37℃)组、W7处理非热应激(37℃+W7)组、热应激(39℃)组和W7处理热应激(39℃+W7)组。提取总RNA并分别检测HSP70、CaM和热休克转录因子1(HSF1)mRNA表达;提取胞浆蛋白用Western blot技术检测HSP70、CaM和HSF1表达;用免疫共沉淀法检测HSP70-CaM和HSP70-HSF1复合物。结果发现,W7能显着抑制39℃热应激1 h小鼠胚胎HSP70 mRNA和蛋白的表达(P<0.05);W7对其他各组胚胎HSF1mRNA表达的影响不显着(P>0.05),但能显着降低39℃热应激1 h小鼠胚胎HSF1蛋白表达(P<0.05);39℃热应激时,胚胎HSP70-CaM复合物增多,HSP70-HSF1复合物减少。本研究表明,小鼠胚胎受热应激时,CaM通过与HSP70竞争性结合,解离出HSF1,从而使HSP70大量表达。本研究揭示了CaM参与小鼠胚胎热激反应中HSP70表达的一种途径。可为研究胚胎耐热性以及热激信号转导提供基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2013年06期)
刘晓蕊[10](2013)在《Ghrelin对猪附植前胚胎的影响及GHSR在猪、鼠附植前胚胎的表达》一文中研究指出已有的研究表明Ghrelin与动物的生殖与发育密切相关,但目前关于Ghrelin对哺乳动物附植前胚胎发育的调节研究较少,且不同研究小组的结果也不相一致。本论文以猪孤雌胚为试验材料,研究不同浓度Ghrelin添加剂对猪孤雌胚胎早期发育的影响,并通过免疫荧光染色法与半定量PCR技术研究Ghrelin受体ghsr在猪孤雌激活(partheno-activated, PA)胚、昆明小鼠体内受精胚胎、体外受精(In vitro fertilized, IVF)胚和PA胚不同发育阶段的表达水平,总结其在早期胚胎发育中的表达规律,为阐明Ghrenlin对哺乳动物早期胚胎发育的作用机制奠定一定基础。研究分为以下两部分:1.Ghrelin对猪孤雌胚早期发育的影响:将猪PA胚培养于添加不同浓度(0ng/ml(对照),0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml与100ng/ml)Ghrelin的PZM3培养液中,观察不同浓度Ghrelin对猪PA胚胎卵裂率、囊胚发育率及胚胎发育速度的影响。结果发现:添加10ng/ml Ghrelin组的4-Cell发育率、8-Cell发育率、桑椹胚率及囊胚率均显着高于对照组和添加0.1ng/ml组(P<0.05);添加100ng/ml组的4-Cell发育率、8-Cell发育率均显着高于添加0.1ng/ml组(P<0.05);各组间(包括试验组与对照组)在卵裂率上无显着差异(P>0.05);2.GHSR在附植前不同发育阶段胚胎中的表达以半定量PCR方法和间接免疫荧光法检测猪孤雌胚及昆明小白鼠自然受精胚、体外受精胚及孤雌发育胚附植前不同发育时期ghsr mRNA转录和ghsr蛋白表达,结果发现:(1)在猪PA胚早期的各个发育时期(2-Cell、4-Cell、8-Cell、致密桑椹胚及囊胚期)均有ghsr mRNA转录,在4-Cell期稍有降低,8-Cell最高,以后持续降低,到囊胚期显着下降;免疫荧光染色显示在猪PA胚早期的各个时期蛋白均有表达,但各发育阶段表达量未见明显差异。(2)在小鼠PA胚附植前各发育阶段均可检测到ghsr mRNA,其表达水平明显高于相同发育阶段的自然受精胚及IVF胚,自2-Cell期到8-Cell期其转录水平持续下降,之后直到囊胚期则持续回升;免疫荧光染色结果显示,在小鼠孤雌发育胚早期的各个时期GHSR蛋白均有表达。(3)在小鼠体外受精胚早期发育的各个时期ghsr mRNA及蛋白均有不同程度的表达,在致密化阶段表达量最高,在小鼠体外受精胚早期发育的各个时期GHSR蛋白均有表达,囊胚期蛋白表达含量最高。(4)在小鼠体内受精胚早期发育的各个阶段ghsr mRNA及GHSR蛋白均有不同程度的表达,在致密化阶段表达量较低。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2013-06-01)
附植前胚胎论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
早期胚胎会经历剧烈的表观修饰变化,其中最为显着的是囊胚之前胚胎整体持续的DNA去甲基化(DNA demetylation)过程,以及囊胚之后新生DNA甲基化(de novo DNA methylation),这两个过程对于胚胎的质量和发育能力,至关重要。一般认为,de novo DNA methylation主要发生在囊胚之后的附植过程中。我们发现,负责de novo DNA methylation最为关键的DNA甲基转移酶--DNMT3B,在附植前的发育阶段,即8-cell之后,在mRNA和蛋白水平都有明显的表达。因此我们推测,胚胎在附植之前有可能已经部分地发生了de novo DNA methylation。为了验证这一假设,我们利用已发表的附植前胚胎DNA甲基化数据,对8-cell到囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM),即Dnmt3b已经表达的这一阶段的DNA甲基化动态进行了“再分析”。数据显示,附植前的确存在de novo DNA methylation的现象,在这一阶段,一共有3401个基因的promoter出现了DNA甲基化上调,占到基因综述的28.54%。而DNA demethylation仍然是这一阶段的主要趋势,有8257个基因的promoter出现了DNA甲基化降低的趋势,占到基因总数的71.46%。此外,分析还发现,附植前de novo DNA methylation主要发生在CpG密度较高(HCG)的区域,并且与常染色体相比,X染色体发生de novo DNA methylation的比例更高。进一步,为了了解这些甲基化变化可能的生物学意义,我们利用附植前胚胎转录组数据,我们对8cell到ICM的甲基化变化和基因表达变化,进行了整合分析。结果显示,附植前de novo DNA methylated promoter主要是倾向于对细胞增殖、细胞器功能和基因表达进行调控,而DNA demethylated promoter则主要倾向于对细胞分化的命运、细胞代谢能力进行调节。在上述基础上我们进一步分析了IVF囊胚和体内囊胚DNA甲基化修饰的差异,发现IVF囊胚整体的DNA甲基化水平明显偏高。在应当发生de novo DNA methylation的promoter中,只有小部分出现上升不足的问题,而大量应该发生DNA demethylation的基因则没有充分地下调甲基化修饰。同时,我们还发现附植前体内外胚胎Dnmts的表达并无显着差异,因此推测IVF囊胚整体甲基化偏高的问题可能是由于DNA demethylation不充分导致的。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
附植前胚胎论文参考文献
[1].殷珂,田文儒,李华涛.附植前胚胎耐热应激损伤的MAPKs信号通路调控的研究进展[J].华北农学报.2018
[2].王文娟.小鼠附植前胚胎新生DNA甲基化的特点及功能分析[D].吉林农业大学.2018
[3].郝镁娟.小鼠老化卵母细胞微管分布对体外受精后附植前胚胎发育的影响[D].河北医科大学.2018
[4].张胜.牛IVF、SCNT和孤雌胚胎附植前发育过程中DNA甲基化的研究[D].吉林大学.2016
[5].吕玉琦.GSTM2-STAT1对子宫识别附植前胚胎作用的研究[D].华中农业大学.2015
[6].李巧丹,习海涛,张运海,李运生,方富贵.干细胞因子对小鼠附植前胚胎体外发育的影响[J].黑龙江农业科学.2014
[7].李巧丹.Ezrin在小鼠附植前胚胎中的表达规律及功能[D].安徽农业大学.2014
[8].胡德宝,庄利利,张日欣,张也,李钟淑.WY14643对附植前小鼠胚胎体外发育及活性氧的影响[J].江苏农业学报.2014
[9].索佳佳,张保珍,孙春玲,王占美,张双.钙调蛋白(CaM)对附植前小鼠胚胎热休克蛋白70(HSP70)表达的影响[J].农业生物技术学报.2013
[10].刘晓蕊.Ghrelin对猪附植前胚胎的影响及GHSR在猪、鼠附植前胚胎的表达[D].安徽农业大学.2013