东南景天SaWRKY7基因对镉胁迫的响应研究

东南景天SaWRKY7基因对镉胁迫的响应研究

论文摘要

【目的】镉对植物具有高毒性,WRKY转录因子广泛参与植物逆境胁迫。研究镉诱导下WRKY基因的胁迫响应和抗性机制。【方法】以超积累型东南景天为试材,通过PCR克隆得到1个东南景天WRKY转录因子家族基因序列,结合生物信息学方法,分析其蛋白质结构和亲缘关系,构建GFP(绿色荧光蛋白)融合蛋白,观察其亚细胞定位,利用酵母验证其转录激活活性,通过qRT-PCR分析在镉胁迫下该基因的表达特性和组织特异性。【结果】获得了1条新的东南景天WRKY转录因子家族基因并命名为SaWRKY7,包含完整的开放阅读框,长度为1 011 bp,共编码336个氨基酸,为WRKY基因家族Ⅱd成员。SaWRKY7定位在细胞核,属于核蛋白,不具有转录自激活活性。SaWRKY7在东南景天的根、茎、叶中均有表达,且在根中相对有较高的表达量。与对照相比,在100μmol/L CdCl2处理0.5 h时,SaWRKY7在根茎叶中有较高的表达量,随后逐渐降低,属于早期诱导表达基因。【结论】SaWRKY7为WRKY转录因子家族成员,该基因定位在细胞核,不具有转录自激活活性,在早期响应镉胁迫诱导表达,推测其可能在东南景天镉积累或镉耐受过程中发挥重要作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料及处理
  •   1.2 RNA提取及cDNA合成
  •   1.3 SaWRKY7基因克隆
  •   1.4 SaWRKY7生物信息学分析
  •   1.5 亚细胞定位
  •   1.6 转录激活验证
  •   1.7 镉处理条件下表达模式分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 SaWRKY7属于WRKY基因家族Ⅱd成员
  •   2.2 SaWRKY7生物信息学分析
  •   2.3 SaWRKY7基因系统发育进化树构建和序列多重比对
  •   2.4 SaWRKY7亚细胞定位
  •   2.5 SaWRKY7转录激活验证
  •   2.6 SaWRKY7表达模式分析
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王影,邱文敏,李鹤,贺雪莲,刘明英,韩小娇,曲同宝,卓仁英

    关键词: 东南景天,转录因子,镉胁迫

    来源: 南京林业大学学报(自然科学版) 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,环境科学与资源利用,植物保护

    单位: 吉林农业大学园艺学院,中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种重点实验室

    基金: 国家重点研发计划子课题(2016YFD080080104)

    分类号: Q945.78;X503.23

    页码: 59-66

    总页数: 8

    文件大小: 3239K

    下载量: 195

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