导读:本文包含了酸化调控论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:磷酸化,蛋白,蛋白酶,磷酸酶,乙酰胆碱,细胞,烟碱。
酸化调控论文文献综述
杨结仪,陈文韬,赵云虎,廖仪文,郑碧英[1]（2019）在《蛋白磷酸化调控衣原体生长周期的研究进展》一文中研究指出衣原体是一类严格细胞内寄生的原核微生物,具有独特的生长周期。衣原体原体和网状体之间的相互转换、营养物质摄取、信号转导和适应性反应等方面需要广泛蛋白质的合成以及功能的调节。其中,可逆蛋白磷酸化作为蛋白质翻译后调节的主要机制,在信号转导、生长和分化中发挥重要的作用。本文针对衣原体叁型分泌系统、丝氨酸/苏氨酸激酶和磷酸酶、双组分调节系统和"合作-开关"机制等方面蛋白磷酸化调控衣原体生长周期的研究进展进行综述。(本文来源于《中国艾滋病性病》期刊2019年11期）
郭倪君,潘虹,车琳,黄婧,吴自力[2]（2019）在《PP2A-B55β亚基调控GPX4蛋白磷酸化介导肝癌细胞铁死亡的研究》一文中研究指出目的:肝细胞癌(HCC)发生发展和抗肿瘤过程中,可出现抗凋亡和/或诱导耐药现象。铁死亡作为非凋亡性调节性细胞死亡(RCD),能选择性介导肿瘤细胞毒性和抗肿瘤敏感性;与谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)功能损伤、介导脂质过氧化、诱导肿瘤细胞死亡有关;目前GPX4蛋白质翻译后修饰(PTM)对其功能和诱导铁死亡的调控机制有待研究。蛋白磷酸酶2A(PP2A)是细胞内主要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶家族;本课题组前期已开展PP2A不同亚基靶向蛋白质去磷酸化的研究。本研究拟探讨PP2A特定B亚基在经由GPX4去磷酸化介导肝癌细胞铁死亡中的调控作用。方法:生物信息学分析中,利于TCGA数据库,筛查确定肝癌铁死亡相关的基因,通过GEO数据库分析与GPX4具有相关性的PP2A亚基;采用GPS3.0网站预测GPX4磷酸化修饰位点。体外试验中,采用HCC化疗药物索拉非尼(Sora)作用于人肝癌HepG2和MHCC-97H细胞,建立诱导铁死亡敏感型细胞模型;并构建GPX4蛋白Ser/Thr位点磷酸化状态定点突变细胞株;采用蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)作为PP2A干预处理;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCT)和免疫印迹实验,检测PP2A不同亚基、铁死亡等相关靶基因mRNA和目的蛋白水平;流式细胞术检测细胞中脂质过氧化和铁死亡等指标。结果:(1)TCGA数据库结果显示,与正常组织相比,肝癌组织中GPX4高表达,且高表达GPX4的癌症患者预后差;(2)GEO数据库(GSE38476)分析,结果显示肝癌组织和癌旁组织(n=10)中PPP2R2B基因相对表达水平存在统计学差异(P<0.05),且PPP2R2B与GPX4基因相对表达水平之间存在负相关(r=-0.5879,P<0.05)。(3)与对照组相比,Sora组细胞中GPX4mRNA水平呈剂量依赖性升高,而GPX4蛋白水平呈剂量依赖性下降;提示GPX4表达调控参与Sora诱导肝癌细胞铁死亡过程,与GPX4翻译后修饰有关。(4)预测和筛选出GPX4的Ser2和Ser112潜在磷酸化位点;与对照细胞相比,HepG2-pB-GPX4和定点突变细胞中GPX4蛋白水平升高;与HepG2-pB-GPX4对照细胞相比,HepG2-pB-GPX4-S2A(去磷酸化)和-S112D(高磷酸化)细胞中脂质过氧化的荧光值峰位右移;提示GPX4的Ser2和Ser112位点磷酸化状态参与铁死亡调节。(5)与对照组相比,Sora组细胞中B55β蛋白水平呈剂量依赖性升高;与Sora组相比,OA+Sora干预组细胞中B55β水平降低、GPX4蛋白水平上升;提示Sora诱导铁死亡中GPX4的调节与PP2A-B55β介导的去磷酸化作用有关。结论:PP2A-B55β亚基对GPX4中Ser2和Ser112位点磷酸化/去磷酸化的调控参与诱导肝癌细胞铁死亡的发生,为靶向调控铁死亡通路的肝癌肿瘤化学预防提供线索。(本文来源于《2019全国呼吸毒理与卫生毒理学术研讨会论文集》期刊2019-10-25）
林洪,王文浩[3]（2019）在《Bad蛋白磷酸化和剪切修饰对神经胶质瘤细胞凋亡的调控作用》一文中研究指出Bcl-2相关死亡启动子同源基因编码蛋白Bad是线粒体凋亡通路的开关蛋白。药物处理和各种内源性信号通过改变其特殊位点的磷酸化状态和对其生化构型进行剪切修饰,实现对神经胶质瘤细胞内促凋亡或促生存信号通路的下游调控。Bad还可介导细胞周期蛋白的促凋亡作用,使之与细胞周期阻滞保持一致。Bad不仅是抗胶质瘤药物的作用焦点,也是其基因治疗的理想候选物。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2019年19期）
巨晓芬,崔双杰,张云玮,徐诗梦,路小婷[4]（2019）在《UPP通路参与铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化的降解调控机制》一文中研究指出目的探讨泛素蛋白酶体途径(UPP)调控铝所致小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)tau蛋白异常磷酸化中的降解机制。方法取对数生长期的N2a细胞随机分为对照组和MG132组。对照组细胞分别予浓度为0和1 mmol/L氯化铝染毒24 h;MG132组细胞予浓度为5μmol/L的MG132预处理6 h后,分别予浓度为0和1 mmol/L氯化铝染毒24 h。染毒结束后,收集细胞,采用免疫印迹法检测N2a细胞中tau-5、P-tau181、P-tau231、P-tau262、P-tau396、热休克蛋白70(Hsp70)羧基末端结合蛋白(CHIP)和Hsp70水平,采用酶联免疫吸附实验测定泛素水平。结果析因分析结果显示,N2a细胞中tau-5、P-tau231、P-tau262、P-tau396、CHIP、Hsp70、泛素的蛋白相对表达水平在氯化铝染毒和MG132处理的主效应及两者的交互效应上均有统计学意义(P<0.05)。在对照组和MG132组,氯化铝染毒的N2a细胞中tau-5、P-tau231、P-tau262、P-tau396、CHIP、Hsp70、泛素的蛋白相对表达水平均高于无氯化铝染毒的N2a细胞(P<0.05)。无论是否予氯化铝染毒,MG132组N2a细胞中的tau-5、P-tau231、P-tau262、P-tau396、CHIP、Hsp70、泛素的蛋白相对表达水平均高于对照组(P<0.05)。N2a细胞中P-tau181蛋白相对表达水平在氯化铝染毒和MG132处理的主效应及两者的交互效应上均无统计学意义(P>0.05)。结论 UPP参与调控铝所致N2a细胞中tau蛋白异常磷酸化的经蛋白酶体降解过程,主要调控了P-tau231、P-tau262、P-tau396位点;UPP通路中CHIP和Hsp70在该过程中发挥重要作用。(本文来源于《中国职业医学》期刊2019年05期）
巨晓芬,崔双杰,张云玮,徐诗梦,路小婷[5]（2019）在《CHIP调控铝致tau蛋白异常磷酸化的具体机制》一文中研究指出目的探讨CHIP及其不同结构域在叁氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化中的具体调控机制。方法 (1)选取小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)进行染毒和干预,利用1 mmol·L~(-1)AlCl_3染毒及CHIP不同表达质粒转染,实验分组为:正常对照组,1 mmol·L~(-1)AlCl_3组,空质粒组,CHIP质粒转染组,CHIP质粒转染+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组,CHIP shRNA阴性对照组,CHIPshRNA组,CHIPshRNA+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组;(2)利用同种细胞系进行1mmol/LAlCl_3染毒及CHIP不同结构域质粒转染,实验分组为:正常对照组,1 mmol·L~(-1)AlCl_3组,空质粒组,CHIP(ΔU-box)质粒转染组,CHIP(ΔU-box)+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组,CHIP(ΔTPR)质粒转染组,CHIP(ΔTPR)+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组。上述处理结束后,收集细胞并提取细胞蛋白,采用Western blot的方法分别检测tau-5,pThr181,p Thr231,pSer262,pSer 396,CHIP,Hsp70及Ub的蛋白表达水平。同时利用析因设计对实验结果进行分析。结果 (1) CHIP不同表达的结果显示:CHIP过表达及CHIP干扰与AlCl_3染毒在Ub和pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。与对照组相比,染铝可引起Ub,pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平显着增高(P<0.05);CHIP过表达引起Ub蛋白表达水平显着增高(P<0.05),pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平均显着降低(P<0.05);CHIP干扰引起Ub蛋白表达显着降低(P<0.05),p Thr231,pSer262,pSer 396表达均有明显升高(P<0.05);CHIP质粒转染+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组各指标变化无统计学差异;CHIPshRNA+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组导致pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达的升高(P<0.05)。(2) CHIP(U-box)结构域质粒转染结果显示:CHIP(ΔU-box)结构域转染和染铝在Ub的蛋白表达变化中不存在交互作用,而在p Thr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。与对照组相比,染铝、CHIP(ΔU-box)质粒转染、CHIP(ΔU-box)+1 mmol·L~(-1)AlCl_3均引起pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达均显着升高(P<0.05);(3) N2a细胞CHIP(TPR)结构域质粒转染结果显示:CHIP(ΔTPR)结构域转染和染铝在Ub的蛋白表达变化中不存在交互作用,而在pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。与对照组相比,染铝、CHIP(ΔTPR)质粒转染、CHIP(ΔTPR)+1 mmol·L~(-1)AlCl_3组均引起p Thr231,pSer262,p Ser 396蛋白表达水平显着升高(P<0.05)。结论 CHIP参与了铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化的调控,且主要调控位点是pThr231、pSer262、pSer 396位点。CHIP不同结构域在铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化的调控过程中各自发挥了重要作用,二者共同存在才能发挥其对tau蛋白的降解作用。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
龙道国,徐细明[6]（2019）在《丝裂霉素C抑制FOXO1磷酸化调控结直肠癌细胞增殖和活力研究》一文中研究指出目的探讨丝裂霉素C、FOXO1磷酸化与结直肠癌细胞增殖、活力的关系。方法选用结直肠癌细胞系HCT116,PBS处理的HCT116为对照组,丝裂霉素C处理的HCT116为丝裂霉素C处理组,HAFoxo1-WT转染的HCT116为FOXO1-WT组,HA-Foxo1-MT转染的HCT116为FOXO1-MT组,每组3例。通过免疫印迹试验检测FOXO1的磷酸化水平,通过MTT试验检测细胞增殖情况,通过CCK-8试验检测细胞活力。结果与对照组比较,丝裂霉素C处理组的FOXO1的总量无明显差异,但是S256位点的磷酸化FOXO1的蛋白量明显减少(t=4.801,P=0.039),结直肠癌细胞HCT116的增殖在第3天和第4天受到明显抑制(t=8.023,P=0.016;t=6.814,P=0.021),其细胞活力在第2天、第3天和第4天受到明显的抑制(t=8.472,P=0.014;t=13.887,P=0.007;t=2.943,P=0.042)。同时用丝裂霉素C处理,FOXO1-WT组的HCT116的增殖在第2天和第3天均明显小于FOXO1-MT组(t=4.926,P=0.031;t=7.037,P=0.019);FOXO1-WT组HCT116的细胞活力在第3天和第4天均明显小于FOXO1-MT组(t=14.089,P=0.005;t=13.741,P=0.008)。结论丝裂霉素C通过抑制FOXO1磷酸化来降低结直肠癌细胞的增殖和活力。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年17期）
王琦,武秀权,戴舒惠,高翔宇,豆雅楠[7]（2019）在《α7nAChR调控STAT3磷酸化在星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应中的作用》一文中研究指出目的:通过建立星形胶质细胞机械性损伤模型,研究烟碱型乙酰胆碱受体α7亚单位(α7nAChR)在创伤性脑损伤后星形胶质细胞炎症反应中的作用及调控机制。方法:建立星形胶质细胞机械性损伤模型,通过ELISA检测炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β的表达;利用α7n ACh R抑制剂α-BGT和激动剂PHA-543613处理星形胶质细胞,检测相关炎症因子表达,并通过Western blot检测信号传导及转录活化因子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达;利用α-BGT和STAT3抑制剂Stattic处理星形胶质细胞,检测相关炎症因子表达。结果:①星形胶质细胞机械性损伤后,促炎因子IL-1β、TNF-α表达增加,抗炎因子IL-10、TGF-β表达降低(P<0.05)。②利用α-BGT抑制α7nAChR可增加损伤后IL-1β、TNF-α的表达,减少IL-10、TGF-β的表达(P<0.05);而利用PHA-543613激活α7nAChR功能,则发挥相反作用(P<0.05)。③α-BGT可促进STAT3磷酸化,而PHA-543613抑制STAT3磷酸化(P<0.05)。④STAT3抑制剂Stattic可减少IL-1β和TNF-α的表达,增加IL-10和TGF-β的表达,并部分阻断α-BGT对IL-1β、TNF-α、IL-10及TGF-β表达的影响(P<0.05)。结论:机械性损伤后,激活α7nAChR可减轻星形胶质细胞炎症反应,而抑制STAT3磷酸化是其重要的下游机制。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年15期）
侯成林,杨艳坤,陈嘉荔,白仲虎[8]（2019）在《Mxr1磷酸化水平受Ptp调控机理的初步研究》一文中研究指出通过PULL-DOWN找到与巴斯德毕赤酵母转录激活因子Mxr1相互作用的小分子酪氨酸磷酸酶Ptp,并验证其去磷酸化功能,可以使磷酸化的Mxr1第215位丝氨酸的磷酸基团水解。用Mxr1第215位特定位点磷酸化抗体Western blot检测Mxr1S215在不同培养基中磷酸化情况。发现野生菌株中Mxr1在甘油培养基没有磷酸化,在甲醇培养基发生磷酸化。在Ptp高表达菌株中,无论在甘油还是甲醇培养基Mxr1都没有发生磷酸化,而在Ptp敲除菌株中磷酸化明显高于野生型菌株,说明Ptp调控Mxr1磷酸化。在大肠杆菌中表达并纯化,测定了Ptp酶学性质。构建了巴斯德毕赤酵母Mxr1S215A突变株,发现多个与甲醇代谢相关的基因在转录水平发生变化,推测其可能受S215位点磷酸化Mxr1的调控。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年07期）
巨晓芬[9]（2019）在《CHIP调控AlCl_3致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化分子机制》一文中研究指出目的:1.探讨CHIP不同表达状态在叁氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化位点中的调控机制。2.阐明CHIP不同结构域在CHIP调控叁氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化中所发挥的具体机制。方法:1.选择小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)作为实验材料,选取对数生长期的细胞进行1mmol/LAlCl_3染毒及CHIP质粒转染,实验分为两部分:一是观察CHIP过表达对染铝细胞tau蛋白的影响,实验分组为:正常对照组,1mmol/L AlCl_3组,空质粒组,CHIP质粒转染组,CHIP质粒转染+1mmol/L AlCl_3组;二是观察CHIP干扰对染铝细胞tau蛋白的影响:正常对照组,1mmol/LAlCl_3组,CHIP shRNA阴性对照组,CHIPshRNA组,CHIPshRNA+1mmol/L AlCl_3组;2.选择细胞系同上,对细胞进行1mmol/L AlCl_3染毒及CHIP不同结构域质粒转染,实验分为两部分:一是观察CHIP(ΔU-box)在CHIP调控铝致tau蛋白异常磷酸化中的作用,实验分组为:正常对照组,1mmol/L AlCl_3组,空质粒组,CHIP(ΔU-box)质粒转染组,CHIP(ΔU-box)+1mmol/L AlCl_3组;二是观察CHIP(ΔTPR)在CHIP调控铝致tau蛋白异常磷酸化中的作用,实验分组为:正常对照组,1mmol/L AlCl_3组,空质粒组,CHIP(ΔTPR)质粒转染组,CHIP(ΔTPR)+1mmol/L AlCl_3组。上述处理结束后,收集细胞并提取总蛋白样品,采用Western blot的方法分别检测tau-5,pThr181,pThr231,pSer262,pSer 396,CHIP,Hsp70及Ub的蛋白表达水平,通过免疫共沉淀的方法检测CHIP与tau-5,pThr181,pThr231,pSer262,pSer 396,Hsp70及Ub的相互作用。结果:1.N2a细胞CHIP过表达1.1免疫印记结果显示:与对照组相比,染铝可引起CHIP,Ub,pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平显着增高(P<0.05);CHIP过表达引起CHIP和Ub蛋白表达水平显着增高(P<0.05),pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平均显着降低(P<0.05)。经析因分析显示,在N2a细胞中CHIP过表达与AlCl_3染毒在CHIP,Ub和pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。1.2免疫共沉淀结果显示:利用anti-CHIP进行IP所得免疫沉淀复合物用WB检测到Hsp70,Ub与tau蛋白pThr231,pSer262,pSer 396磷酸化位点,说明CHIP与Hsp70,Ub,tau蛋白及其各磷酸化位点之间存在相互作用。2.N2a细胞CHIP干扰2.1免疫印记结果显示:与对照组相比,染铝可引起CHIP,Ub和pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平显着升高(P<0.05);CHIP干扰引起CHIP和Ub蛋白表达显着降低(P<0.05),pThr231,pSer262,pSer 396表达均有明显升高(P<0.05)。经析因分析显示,在N2a细胞中CHIP干扰与AlCl_3染毒在CHIP,Ub和pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。3.N2a细胞CHIP(U-box)结构域质粒转染3.1免疫印记结果显示:与对照组相比,染铝引起CHIP,Ub和pThr31231,pSer262,pSer 396蛋白表达均显着升高(P<0.05);CHIP(ΔU-box)结构域转染引起pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平显着升高(P<0.05)。经析因分析结果显示,CHIP(ΔU-box)结构域转染和染铝在CHIP和Ub的蛋白表达变化中不存在交互作用,而在pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。3.2免疫共沉淀结果显示:利用anti-Myc进行IP,得到的免疫沉淀复合物用WB在CHIP(ΔU-box)转染组和CHIP(ΔU-box)+1mmol/L AlCl_3组中未检测到Hsp70,Ub以及tau蛋白pThr231,pSer262,pSer 396各磷酸化位点与CHIP之间的相互作用。在各组免疫沉淀复合物中均能检测到Myc-CHIP。4.N2a细胞CHIP(TPR)结构域质粒转染4.1免疫印记结果显示:与对照组相比,染铝引起1mmol/L AlCl_3组CHIP,Ub,pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达水平显着升高(P<0.05);CHIP(ΔTPR)结构域转染引起pThr231,pSer262,pSer 396表达显着升高(P<0.05)。经析因分析结果显示,CHIP(ΔTPR)结构域转染和染铝在CHIP和Ub的蛋白表达变化中不存在交互作用,而在pThr231,pSer262,pSer 396蛋白表达变化中存在交互作用。4.2免疫共沉淀结果显示:利用anti-Myc进行IP所得免疫沉淀复合物用WB检测到Hsp70,Ub与CHIP存在相互作用。在CHIP(ΔTPR)质粒转染组、CHIP(ΔTPR)+1mmol/L AlCl_3组中检测到myc-CHIP;在CHIP(ΔTPR)质粒转染组、CHIP(ΔTPR)+1mmol/L AlCl_3组中未检测到pThr231,pSer262,pSer 396与CHIP之间相互作用。结论:1.CHIP参与了铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化的调控,且主要调控位点是pThr231、pSer262、pSer 396位点。2.CHIP不同结构域在铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化的调控过程中各自发挥了重要作用,二者必须共同存在发挥作用,缺一不可。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-06-01）
王恺[10]（2019）在《AMPK磷酸化MCU对有丝分裂能量稳态的调控研究》一文中研究指出细胞是生命体的基本单元,具有复杂的内部结构,为了维持细胞正常的生长和增殖,细胞内各项生理活动需要有序的进行,这就需要细胞对内环境的稳态进行精确的调节。特别是在一些重要的生命过程,例如DNA复制、细胞分裂等过程中,及时调整细胞整体的结构类型、代谢特点和能量状态,对细胞的生存和健康尤为重要。据报导,细胞内存在一些物质和能量的感受器与调节器,能够针对细胞的生理特点和内外环境对细胞的生理活动进行调节。例如,mTOR可感受细胞内氨基酸状态,在氨基酸不足的情况下可以通过调节物质代谢维持细胞内氨基酸水平稳定。但是,在一些高耗能的生理活动发生时,细胞如何协调细胞能量代谢从而维持细胞整体能量稳态,尚未研究清楚。已知线粒体是细胞的能量工厂,通过线粒体有氧呼吸产生的腺嘌呤核苷叁磷酸(ATP)是细胞主要的能量来源。因此,调节线粒体的氧化磷酸化强度对于维持细胞整体的能量稳态有重要意义。钙离子是细胞内广泛存在的第二信使,已报导钙离子可以通过线粒体钙单向转运体(MCU)进入线粒体,从而调节线粒体的产能状态。在前期研究中,我们发现细胞进入有丝分裂期后,细胞ATP水平会发生一定的下调,同时伴随着细胞内钙离子会发生快速大量进入线粒体的现象,称为线粒体钙闪(mitochondrial calcium transient),从而激发线粒体氧化呼吸,促进ATP产生以满足细胞对于能量的需要。但是,在此过程中细胞是如何感知能量不足状态,并且做出快速精准的调节,仍有待研究。通过对线粒体钙转运体MCU的序列进行分析,我们发现MCU的57位丝氨酸(Ser)结构域符合AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化底物特点。我们通过体外激酶实验和点突变实验进行验证,鉴定出AMPK是MCU的上游激酶,在体外可促进MCU的57位丝氨酸的磷酸化。通过钙流实验,我们发现MCU 57位磷酸化可以提高MCU活性,将更多的钙离子摄入线粒体,从而提高线粒体的氧化呼吸强度,激发ATP生成。在使用57位丝氨酸磷酸化MCU抗体对细胞进行免疫荧光染色时,我们发现处于有丝分裂期的细胞荧光强度明显高于间期细胞,这提示我们有丝分裂期细胞具有更高的MCU磷酸化水平,这有助于细胞保持较高的线粒体呼吸强度,为有丝分裂提供足够的能量。通过进一步研究,我们发现MCU 57位磷酸化对MCU在线粒体上的定位、MCU多聚化状态并没有明显影响,提示磷酸化的功能主要是提高MCU的钙离子通道活性。综上所述,我们发现了在有丝分裂中AMPK可通过磷酸化MCU促进钙离子大量进入线粒体,激发ATP产生以改变细胞能量不足的状态,从而阐释了一条细胞精确感知自身能量状态,并通过调节钙离子活动从而快速准确调节细胞能量稳态的新路径。细胞分裂是生物生长发育的基础,通过供给足够的ATP以维持有丝分裂的正确进行,无论对于细胞还是个体都是至关重要的。此外,细胞一些其他的生理过程发生时,以及细胞外剧烈刺激例如病毒感染、病原入侵等条件下细胞都可能处于能量不足状态并产生应激动员。我们的发现,深入揭示了细胞响应剧烈能量不足状况,并加以快速调节的机制,有助于深刻理解细胞能量平衡的维持和自我调节。(本文来源于《军事科学院》期刊2019-05-30）
酸化调控论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:肝细胞癌(HCC)发生发展和抗肿瘤过程中,可出现抗凋亡和/或诱导耐药现象。铁死亡作为非凋亡性调节性细胞死亡(RCD),能选择性介导肿瘤细胞毒性和抗肿瘤敏感性;与谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)功能损伤、介导脂质过氧化、诱导肿瘤细胞死亡有关;目前GPX4蛋白质翻译后修饰(PTM)对其功能和诱导铁死亡的调控机制有待研究。蛋白磷酸酶2A(PP2A)是细胞内主要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶家族;本课题组前期已开展PP2A不同亚基靶向蛋白质去磷酸化的研究。本研究拟探讨PP2A特定B亚基在经由GPX4去磷酸化介导肝癌细胞铁死亡中的调控作用。方法:生物信息学分析中,利于TCGA数据库,筛查确定肝癌铁死亡相关的基因,通过GEO数据库分析与GPX4具有相关性的PP2A亚基;采用GPS3.0网站预测GPX4磷酸化修饰位点。体外试验中,采用HCC化疗药物索拉非尼(Sora)作用于人肝癌HepG2和MHCC-97H细胞,建立诱导铁死亡敏感型细胞模型;并构建GPX4蛋白Ser/Thr位点磷酸化状态定点突变细胞株;采用蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)作为PP2A干预处理;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCT)和免疫印迹实验,检测PP2A不同亚基、铁死亡等相关靶基因mRNA和目的蛋白水平;流式细胞术检测细胞中脂质过氧化和铁死亡等指标。结果:(1)TCGA数据库结果显示,与正常组织相比,肝癌组织中GPX4高表达,且高表达GPX4的癌症患者预后差;(2)GEO数据库(GSE38476)分析,结果显示肝癌组织和癌旁组织(n=10)中PPP2R2B基因相对表达水平存在统计学差异(P<0.05),且PPP2R2B与GPX4基因相对表达水平之间存在负相关(r=-0.5879,P<0.05)。(3)与对照组相比,Sora组细胞中GPX4mRNA水平呈剂量依赖性升高,而GPX4蛋白水平呈剂量依赖性下降;提示GPX4表达调控参与Sora诱导肝癌细胞铁死亡过程,与GPX4翻译后修饰有关。(4)预测和筛选出GPX4的Ser2和Ser112潜在磷酸化位点;与对照细胞相比,HepG2-pB-GPX4和定点突变细胞中GPX4蛋白水平升高;与HepG2-pB-GPX4对照细胞相比,HepG2-pB-GPX4-S2A(去磷酸化)和-S112D(高磷酸化)细胞中脂质过氧化的荧光值峰位右移;提示GPX4的Ser2和Ser112位点磷酸化状态参与铁死亡调节。(5)与对照组相比,Sora组细胞中B55β蛋白水平呈剂量依赖性升高;与Sora组相比,OA+Sora干预组细胞中B55β水平降低、GPX4蛋白水平上升;提示Sora诱导铁死亡中GPX4的调节与PP2A-B55β介导的去磷酸化作用有关。结论:PP2A-B55β亚基对GPX4中Ser2和Ser112位点磷酸化/去磷酸化的调控参与诱导肝癌细胞铁死亡的发生,为靶向调控铁死亡通路的肝癌肿瘤化学预防提供线索。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酸化调控论文参考文献
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