大鼠肌肉钝挫伤vWF及VEGF表达的实验研究

大鼠肌肉钝挫伤vWF及VEGF表达的实验研究

幸宇[1]2004年在《大鼠肌肉钝挫伤vWF及VEGF表达的实验研究》文中认为研究背景及目的:在法医学实践中,历来对损伤时间的推断建立在创伤修复反应的病理生理学基础之上,即以不同经历时间的创口在修复过程中所表现的生活反应(vital reaction)特点——炎症反应、肉芽组织及上皮增生和疤痕修复所产生的各种形态、组化及生化变化特征作为推断损伤时间和性质的依据。机体损伤大多导致血管内皮的损伤,其直接后果是凝血过程的启动及其后的组织充血水肿,炎细胞浸润,组织修复再生等,其间von Willebrand Factor(vWF)对损伤血管内皮部位血小板的粘附聚集起到了重要作用;血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth facto, VEGF)是作用最强,特异性最高的血管生成调控因子,在损伤的早期起到调节血管内皮细胞通透性,趋化炎细胞的作用,在修复期起改变细胞外基质,使其更易于血管的生长。在创伤的修复过程中,细胞—生长因子—细胞外基质(EcM, extracellular matrix)叁者相互作用、相互影响的复杂动态过程,生长因子参与了创伤愈合的整个过程并在其中发挥着举足轻重的作用。创伤修复过程中,内源性生长因子起着重要的调控作用,因而检查创伤后机体内的凝血因子及生长因子的改变,使更加精确地推断损伤时间成为可能。 方法:健康Sprague-Dawley大鼠(S-D大鼠)65只,随机分为生前伤组、死后伤组和正常对照组,每组5只:生前伤组按处死时间不同分为15min、30min、1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d共十个亚组;

孟繁东[2]2010年在《NGF联合VEGF对脊髓损伤的修复作用》文中认为目的:实验探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)联合血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)修复脊髓急性损伤的可行性和疗效,并观察二者的协同作用。方法:1.建立脊髓损伤模型(动物实验)。选择成年SD大鼠,体重180-220g。采用Allens打击器以250gmm能量打击T9-T10段脊髓,致脊髓钝挫伤,从而建立脊髓钝挫伤模型。同时于模型L3-L4段脊髓处硬膜下置管,置管处肌肉及皮下固定,延长管部分体外固定并可控性封堵体外延长管管口,以备注射因子使用。将大鼠脊髓损伤模型随机分成生理盐水(NS)对照组(A组),NGF组(B组),NGF+VEGF组(C组)叁个组,每组各10只大鼠模型,共计模型30只,使用微量注射器自所置管的体外延长管口处分别注射NS、NGF及NGF+VEGF。2.实验观察。分别在损伤并注射生长因子后不同时段(1周至8周,每周一次)对全部损伤实验模型进行肢体活动的BBB评分。8周后将全部模型行灌注处死,取完整脊髓标本切片进行组织学检查,包括HE染色和免疫组织化学染色鉴定,从而评价各组对脊髓损伤的修复作用。结果:1.肢体运动BBB评分:第1周及第2周叁个组评分差距不明显。自第3周起B组和C组BBB评分要高于A组,(P<0.05),C组自4周后明显优于A组和B组(P<0.01)。2.组织学检查:HE染色显示A组损伤脊髓部分及邻近节段位置组织形态不明显,脊髓呈断裂撕裂状;B组和C组损伤脊髓部分及邻近节段位置组织结构相对完整,有一定的连续性,部分可见相对完好的神经元及血管内皮细胞,且C组要优于B组。免疫组织化学染色鉴定显示C组的双因子联合应用可促进轴突的再生并减少神经元的凋亡,且C组可明显促进血管内皮细胞的生长。通过计数每个高倍视野内凋亡神经元的个数和白质内血管数,进行平均数比较和方差分析,凋亡神经元数A组>B组>C组,白质内血管数A、B组大致相当,均明显少于C组。结论:1.单纯应用NGF可以改善大鼠急性脊髓损伤后的肢体运动状况,并减少神经元的凋亡,但其持续时间和具体效果有限且明显程度不高。2.NGF联合VEGF具有较好的脊髓损伤修复作用,对大鼠急性脊髓损伤后肢体运动状况的改善十分明显,并能减少神经元的凋亡,促进白质内血管内皮细胞的生长和毛细血管的再生,且二者具有协同作用。

刘晓阳[3]2011年在《嗅鞘细胞移植联合血管内皮生长因子对大鼠脊髓损伤的保护作用的实验研究》文中认为背景脊髓损伤严重影响着25万美国人的生活质量,恢复缓慢,因此成为全世界科学家的研究热点。已经证实,许多药物、神经营养因子、组织细胞移植及基因治疗是目前主要的脊髓损伤修复措施。其中,终生具有成髓鞘能力的嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells, OECs)深受广大研究人员的喜爱。脊髓损伤引起的缺血和继发性改变使局部条件恶化,加重了神经损伤。因此,改善脊髓损伤局部的血液循环,减轻继发性损伤便成为脊髓损伤的又一研究热点。已经证实,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在脊髓损伤后表达增加,可能与损伤后的功能恢复有关。目的研究一种简便、经济实用的获得新生大鼠嗅鞘细胞的方法,探讨嗅球源性嗅鞘细胞(OECs)移植和鞘内重复注射VEGF对脊髓损伤(SCI)后功能恢复的促进作用,并研究二者对神经元和神经纤维的协同保护作用。方法取1-2天的雌性新生大鼠,无菌条件下取下双侧嗅球,剥去血管和软脑膜,经胰酶消化和机械吹打分散成单细胞悬液,将差速贴壁后的大鼠嗅鞘细胞首先应用20%胎牛血清和lOug/ml阿糖胞苷培养24小时,然后采用含1%胎牛血清和25ng/ml神经生长因子(nerve growth factor, NGF)的DMEM/F12培养基进行体外培养。每天观察嗅鞘细胞的生长变化,第9天时采用形态学和免疫细胞化学染色对细胞及其纯度进行鉴定,并收集细胞,调整细胞密度为1 x107/ml备用。将75只实验动物随机分为5组,假手术对照组(CON组)、脊髓损伤组(SCI组)、血管内皮生长因子组(VEGF组)、嗅鞘细胞组(OECs组)和联合治疗组(VEGF+OECs组),在脊髓损伤后不同时段进行肢体活动BBB评分,术后8w苯巴比妥麻醉后灌注处死大鼠,取T7-L1脊髓节段,通过HE染色检测脊髓损伤区神经纤维和神经元病理改变;通过免疫组织化学检测各组大鼠脊髓caspase-3(1:150)和vWF(1:200)表达。每组3只动物利用透射电镜观察超微结构的变化。应用SPSS 16.0统计软件进行处理分析,数据以x±s表示,BBB评分采用重复测量数据的方差分析,判断行为恢复情况。其他数据的组间比较采用t检验,以P

参考文献:

[1]. 大鼠肌肉钝挫伤vWF及VEGF表达的实验研究[D]. 幸宇. 四川大学. 2004

[2]. NGF联合VEGF对脊髓损伤的修复作用[D]. 孟繁东. 山东大学. 2010

[3]. 嗅鞘细胞移植联合血管内皮生长因子对大鼠脊髓损伤的保护作用的实验研究[D]. 刘晓阳. 山东大学. 2011

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