导读:本文包含了化学缺氧论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,化学,胶质,内质网,诱导,因子,星形。
化学缺氧论文文献综述
胡晨,汪玉馨,孟长虹[1]（2018）在《姜黄素下调NF-κB信号通路抑制化学缺氧诱导的U87细胞炎症反应》一文中研究指出目的研究姜黄素对化学缺氧所致人源性神经星形胶质瘤细胞系U87炎症反应的影响,并探讨相关分子机制。方法100μmol/L CoCl_2处理U87细胞不同时间(1、3、6、12、24 h),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA表达变化。100μmol/L CoCl_2处理U87细胞12 h制备化学缺氧模型,同时给予1、5和10μmol/L姜黄素处理,对照组(不添加CoCl_2)和模型组给予等体积DMSO;qRTPCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达变化;Western Blotting法检测NF-κB/P65蛋白磷酸化水平及核转位。结果CoCl_2上调U87细胞IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平并呈时间相关性,炎症反应在约12 h达到高峰。与模型组比较,姜黄素显着下调炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平,5和10μmol/L浓度组差异显着(P<0.05);显着下调p65的磷酸化水平(P<0.05);导致细胞核内NF-κB/p65蛋白显着减少、细胞质中NF-κB/p65蛋白显着增加(P<0.05)。结论姜黄素通过下调NF-κB信号通路抑制化学缺氧诱导的U87细胞炎症反应。(本文来源于《药物评价研究》期刊2018年11期）
张学松,张谢,叶桦,宋毓飞[2]（2018）在《Cocl2诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响》一文中研究指出目的探讨二氯化钴(Cocl2)诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响及成纤维细胞生长因子21(FGF21)的作用机制。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组(control组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+Cocl2缺氧处理组(HFD+Cocl2组),每组10只;喂养8周后收集3组小鼠血清及肝脏组织。使用自动生化分析仪检测血清中空腹血糖、TG、TC、ALT水平;ELISA法检测小鼠血清中FGF21的含量;HE染色、叁色染色法观察肝脏组织形态学改变;Q-PCR法检测基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、FGF21 mRNA表达;Western blot法检测FGF21、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、X-盒-结合蛋白-1(XBP-1)蛋白表达。结果与control组比较,HFD组、HFD+Cocl2组小鼠血清中空腹血糖、TC、ALT、FGF21水平均明显升高(均P<0.05),肝脏内纤维化程度加重,肝脏组织TIMP-1、FGF21 mRNA以及FGF21、p-JNK、XBP-1蛋白表达均明显增加。与HFD组比较,HFD+Cocl2组小鼠血清中TG、ALT、FGF21水平均明显升高(均P<0.05),肝脏纤维化程度明显加重,肝脏组织TIMP-1、FGF21 mRNA以及FGF21、p-JNK、XBP-1蛋白表达均进一步增加。结论 Cocl2诱发急性化学缺氧可加重非酒精脂肪肝小鼠的肝脏损伤,上调FGF21的表达;内质网应激反应可能是缺氧诱导脂类代谢障碍的调控途径。(本文来源于《第叁十届全国中西医结合消化系统疾病学术会议论文集》期刊2018-07-13）
李雷[3]（2018）在《Rig-I调控化学缺氧诱导神经胶质炎症机制研究》一文中研究指出维甲酸诱导基因I(Retinoic acid inducible gene-I,Rig-I)是重要的细胞内模式识别受体,在炎症反应中发挥着重要功能。细胞损伤,如缺血缺氧、创伤性损伤、毒素和辐射作用是公认的模式识别受体的触发因素。模式识别受体参与炎症反应和炎症应激。最新的研究表明,Rig-I通过多种途径介导炎症反应。先天的免疫系统是炎症反应的关键要素。干扰素β启动子刺激因子1(IPS-1)是一种Rig-I介导的关键下游信号,对先天免疫应答至关重要。IPS-1包含多种与肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)相互作用的组分。TRAF6被认为在炎性因子的表达中起着至关重要的作用。TRAF6信号激活募集IKK复合物,导致核转录因子κB(NF-κB)激活。此外,Rig-I与凋亡相关斑点样蛋白(ASC)相互作用形成炎症小体,从而激活含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1),促进炎性因子IL-1β、IL-8的释放。它们协调感染后先天免疫反应和调节IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α等炎性因子的表达。细胞内模式识别受体参与了多种与神经炎症相关疾病的发病过程。星形胶质细胞作为最大的胶质细胞,在神经炎症反应中发挥重要作用。除了病毒和其它病原体的感染外,缺氧相关刺激也可激活神经系统非感染性炎症反应。Rig-I与病毒感染引起的脑内星形胶质细胞炎症应激密切相关,可能参与神经胶质细胞对各种刺激的反应,调控潜在的神经元损伤,而它对缺氧诱导的神经胶质炎症调节作用并不清楚。为了探讨Rig-I调控化学缺氧诱导神经胶质的炎症机制,我们建立了体外星形胶质细胞化学缺氧模型。目的:1.明确Rig-I是否参与化学缺氧诱导的神经胶质炎症;评价NF-κB在Rig-I诱导的神经胶质炎症中的作用。2.研究IPS-1/TRAF6在化学缺氧诱导神经胶质炎症中的作用;探讨Rig-I调控化学缺氧诱导神经胶质炎症的信号通路。3.探讨Rig-I调节化学缺氧诱导的神经胶质细胞内caspase-1激活的机制及胶质细胞水肿相关胞内渗透压变化。方法:采用CoCl_2刺激人源星形胶质瘤细胞系U87细胞,建立体外星形胶质细胞化学缺氧模型。应用实时定量RT-PCR检测相关蛋白的mRNA水平,采用Western Blot检测相关蛋白水平,使用亚细胞离心分离技术检测NF-κB的核转位变化。1.分析在化学缺氧后不同时间点(0、1、3、6、12和24小时)U87细胞中Rig-I的mRNA水平和Rig-I的蛋白表达变化;采用免疫荧光染色观察Rig-I蛋白定位。采用高表达Rig-I的质粒瞬时转染U87细胞,检测Rig-I的m RNA水平和Rig-I的蛋白水平、以及NF-κB的活性和核定位;给予抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)抑制NF-κB活性,检测PDTC对Rig-I诱导的炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的mRNA水平的影响。2.首先,检测CoCl_2处理U87细胞后不同时间点(0、3、6、12和24小时)NF-κB/P65的活性变化;在CoCl_2处理前,采用IPS-1的小干扰RNA(IPS-1-siRNA)瞬时转染U87细胞24小时后,给予CoCl_2处理,检测NF-κB的活性变化、IPS-1的mRNA水平和IPS-1的蛋白水平的变化。其次,检测CoCl_2处理U87细胞24小时后IPS-1蛋白水平的变化;在CoCl_2处理前,采用Rig-I的小干扰RNA(Rig-I-siRNA)瞬时转染U87细胞24小时后,给予CoCl_2处理,检测IPS-1蛋白水平及炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的mRNA水平变化。最后,研究TRAF6在Rig-I/IPS-1诱导的NF-κB活化和化学缺氧诱导的炎症反应中的作用,采用免疫沉淀技术,检测化学缺氧后IPS-1蛋白和TRAF6蛋白的结合情况。采用TRAF6小干扰RNA(TRAF6-siRNA)瞬时转染U87细胞24小时后,给予CoCl_2处理,检测NF-κB的活性变化。si-TRAF6或对照RNA片段(si-Con)瞬时转染U87细胞24小时后,给予CoCl_2处理,提取细胞总RNA并逆转录成cDNA,检测炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的mRNA水平变化。3.应用免疫荧光技术检测caspase-1/P20的细胞分布,以蓝色荧光标记细胞核,绿色荧光反映caspase-1/P20蛋白水平。采用Rig-1-siRNA瞬时转染U87细胞24小时后,给予CoCl_2处理,检测caspase-1/P20蛋白水平变化。CoCl_2刺激U87细胞24小时,同时给予钙通道阻滞剂硝苯地平或顺羧酸铂(Carb)或Na-K-2Cl抑制剂布美他尼或自由基清除剂NAC等处理,检测caspase-1/P20蛋白水平变化。应用冰点渗透压仪检测化学缺氧诱导与水肿发生相关的胞内渗透压数值变化。CoCl_2处理U87细胞,同时给予硝苯地平、Carb、NAC、布美他尼或采用Rig-1-siRNA瞬时转染U87细胞24小时再CoCl_2处理。提取超声破碎细胞和细胞质,检测胞浆渗透压数值变化。结果:1.化学缺氧后6、12和24小时能导致Rig-I的mRNA水平和Rig-I的蛋白表达上调,与对照组(0小时)比较有显着差异(P<0.05)。免疫荧光染色显示Rig-I蛋白在CoCl_2处理后明显增加(P<0.05)。Rig-I在U87细胞过表达后,Rig-I的mRNA水平和Rig-I的蛋白表达上调,而且能诱导NF-κB/P65的Ser536位点磷酸化增加,与对照组(空质粒转染组)比较有显着差异(P<0.05)。但U87细胞总蛋白水平保持不变(P>0.05)。此外,激活Rig-I能导致核内NF-κB蛋白增加和细胞质蛋白减少(P<0.05)。Rig-I激活能诱导细胞炎性因子(IL-1β,IL-6和TNF-α)的mRNA水平升高,与对照组(空质粒转染组)比较有显着差异(P<0.05)。与溶剂组比较,抑制剂PDTC能明显下调Rig-I激活的细胞炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的mRNA水平(P<0.05)。2.化学缺氧后3,6,12和24小时的NF-κB/P65在Ser536位点的磷酸化作用快速增加,与对照组(0小时)相比有显着差异(P<0.05)。IPS-1-siRNA转染U87细胞下调其功能,皆能显着降低NF-κB活性、IPS-1的mRNA水平和IPS-1蛋白水平(P<0.05)。化学缺氧后星形胶质细胞IPS-1蛋白水平显着增加,Rig-I-siRNA处理星形胶质细胞能显着逆转IPS-1蛋白水平的增加,与对照组(si-Con)比较有显着性差异(P<0.05)。IPS-1-siRNA瞬时转染U87细胞后,能导致星形胶质细胞炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的mRNA水平显着降低(P<0.05)。化学缺氧能诱导TRAF6和IPS-1蛋白相互结合增加,与对照组(si-Con)比较有显着差异(P<0.05)。si-Rig-I处理能导致TRAF6和IPS-1蛋白结合降低(P<0.05)。si-TRAF6处理也能显着下调NF-κB/P65蛋白的Ser536位点磷酸化(P<0.05)和降低炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的mRNA水平(P<0.05)。3.免疫荧光技术检测显示:正常组和对照组U87细胞的绿色荧光强度较弱,而CoCl_2处理U87细胞24小时,细胞中绿色荧光强度显着增加,caspase-1/P20蛋白水平显着上升,与对照组比较有显着性差异(P<0.05)。与对照RNA片段组(si-Con)比较,Rig-1-siRNA能显着降低化学缺氧后胞内caspase-1/P20的蛋白水平(P<0.05)。CoCl_2处理U87细胞24小时同时给予硝苯地平或Carb或布美他尼或NAC处理,皆能明显降低胞内caspase-1/P20的蛋白水平,与溶剂组比较有显着性差异(P<0.05)。化学缺氧能诱导胞内渗透压数值显着上调,与溶液对照组相比差异有显着性(P<0.05)。给予钙离子拮抗剂能部分抑制化学缺氧诱导的渗透压增强,与缺氧组比较差异有显着性(P<0.05)。而NAC、Na-K-2Cl抑制剂以及Rig-I功能抑制未引起胞内渗透压明显变化。结论:1.化学缺氧能诱导Rig-I在星形胶质细胞中的基因转录和蛋白翻译上调,其功能增强能导致NF-κB依赖的炎性因子的表达。Rig-I通过NF-κB调控缺氧引起的神经胶质炎症。2.化学缺氧诱导神经胶质炎症的发生与Rig-I功能上调密切相关。Rig-I的激活通过诱导IPS-1和TRAF6的蛋白结合,调控了NF-κB活性及其核转位,继而促进化学缺氧诱导的炎性因子的基因表达。阻断IPS-1/TRAF6通路可下调Rig-I诱导的神经胶质炎症。3.Rig-I也参与了化学缺氧诱导的胶质细胞内caspase-1激活的调节,与钙信号依赖的炎性因子活化有一定联系。但是Rig-I功能上调可能与化学缺氧诱导的胶质细胞水肿无关。以上研究结果表明,Rig-I通过NF-κB和caspase-1信号调控化学缺氧炎性因子的表达和激活,参与IPS-1/TRAF6信号调控,且两者差异性调控了炎症应激反应。因而,Rig-I可能成为临床研发治疗脑缺氧/缺血的潜在药物靶点,为改善中老年人缺血性脑损伤提供新的思路。(本文来源于《南京医科大学》期刊2018-05-01）
张学松,张谢,叶桦,宋毓飞[4]（2018）在《Cocl_2诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响》一文中研究指出目的探讨二氯化钴(Cocl_2)诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响及成纤维细胞生长因子21(FGF21)的作用机制。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组(control组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+Cocl_2缺氧处理组(HFD+Cocl_2组),每组10只;喂养8周后收集3组小鼠血清及肝脏组织。使用自动生化分析仪检测血清中空腹血糖、TG、TC、ALT水平;ELISA法检测小鼠血清中FGF21的含量;HE染色、叁色染色法观察肝脏组织形态学改变;Q-PCR法检测基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、FGF21 m RNA表达;Western blot法检测FGF21、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、X-盒-结合蛋白-1(XBP-1)蛋白表达。结果与control组比较,HFD组、HFD+Cocl_2组小鼠血清中空腹血糖、TC、ALT、FGF21水平均明显升高(均P<0.05),肝脏内纤维化程度加重,肝脏组织TIMP-1、FGF21 m RNA以及FGF21、p-JNK、XBP-1蛋白表达均明显增加。与HFD组比较,HFD+Cocl_2组小鼠血清中TG、ALT、FGF21水平均明显升高(均P<0.05),肝脏纤维化程度明显加重,肝脏组织TIMP-1、FGF21 m RNA以及FGF21、p-J NK、XBP-1蛋白表达均进一步增加。结论 Coc l2诱发急性化学缺氧可加重非酒精脂肪肝小鼠的肝脏损伤,上调FGF21的表达;内质网应激反应可能是缺氧诱导脂类代谢障碍的调控途径。(本文来源于《浙江医学》期刊2018年04期）
李屹[5]（2017）在《组蛋白去乙酰化酶1抑制对化学缺氧致H9c2心肌细胞水肿的保护作用及分子生物学—力学耦合机制的研究》一文中研究指出心肌水肿是在心肌缺血早期及其它多种病理条件下均可被检测到的一种频发事件。心肌细胞的体积调节受到多种因素的制约,包括渗透压、通道蛋白、细胞体积敏感度以及细胞间水分布等。尽管已有大量研究成果表明,心肌水肿的发生、发展过程中涉及众多基因的表达水平的改变,但是,心肌水肿发生、发展的明确的分子生物学机制尚未被完全阐明。借助组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACs)与组蛋白乙酰化转移酶(histone acetyltransferase,HATs)对染色体的调节功能,表观遗传化修饰可对组蛋白及非组蛋白施加影响从而改变基因的表达。有研究表明,HDAC4抑制可以增强心肌细胞对缺氧/复氧的耐受程度,具体体现在,HDAC4抑制可上调缺氧/复氧对心肌细胞的增殖抑制并发挥抗凋亡的作用。但是,在缺氧环境中,HDAC1是否具有调节心肌细胞体积的能力,尚未有相关报道。心肌细胞水肿的发生包括细胞基因表达谱的改变与细胞力学特性变化两个过程,关于心肌水肿发生、发展过程中,心肌细胞力学特点的变化及细胞膨大过程中具体的力学机制的研究成果也尚无相关报道。因此,从表观遗传学角度、组蛋白乙酰化修饰水平深入研究心肌细胞水肿发生发展过程中相关的分子生物学机制,将有助于我们深化对心肌水肿的认知,因而对改善缺血性心脏疾病的预后具有积极的意义。对于肌细胞水肿发生发展过程细胞力学性质改变的表征及分子生物学-力学耦合机制的研究将为我们全面理解心肌水肿的发生、发展提供新的视野及研究策略。本论文通过体外实验的方法,构建了氯化钴(Cobalt chloride,CoCl_2)化学缺氧水肿心肌细胞模型;通过采用经典的分子生物学实验方法筛选并验证了HDAC1在心肌细胞水肿发生早期阶段的作用并对其相关分子生物学机制进行了初步的探索;通过采用基于原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)的单细胞力学特性表征技术及理论物理学理论、方法,对化学缺氧水肿心肌细胞中组蛋白乙酰化修饰作用相关功能基因的分子生物学作用机制与细胞力学特性的变化、机制进行了有机的耦合,旨在从分子生物学、生物力学两个层面,全面探索心肌水肿发生的机制。并获得如下成果:(1)CoCl_2化学缺氧诱导H9c2心肌细胞发生损伤、凋亡、氧化应激失衡、细胞骨架重排以及H3、H4组蛋白乙酰化水平下调;基于免疫印迹的实验结果,化学缺氧H9c2心肌细胞内HDAC4、HAT1的表达水平并无显着的变化;CoCl_2化学缺氧5h诱导H9c2心肌细胞内HDAC1的表达水平发生上调,由此我们推测,HDAC1在CoCl_2化学缺氧诱导的心肌细胞水肿发生的早期阶段具有重要意义。(2)H9c2心肌细胞经HDAC1特异性RNA干扰以及高选择性蛋白抑制剂处理后,CoCl_2化学缺氧5h诱导的H9c2心肌细胞损伤作用、凋亡、氧化应激失衡、细胞骨架重排以及H3、H4组蛋白乙酰化水平下调的趋势减缓;免疫印迹实验结果显示,CoCl_2化学缺氧诱导H9c2心肌细胞内Akt、pAkt、P38、pP38以及Bcl-2蛋白分子的表达水平发生下调,上调了P53、Bax、Caspase3与AQP1蛋白分子的表达水平;HDAC1抑制后,化学缺氧环境中H9c2心肌细胞AQP1蛋白分子的表达水平下调,Akt、pAkt、P38、pP38蛋白分子的表达水平上调,AQP1蛋白表达水平下调。上述实验结果揭示了HDAC1抑制具有保护H9c2心肌细胞免于CoCl_2诱导的损伤的作用,其机制可能是HDAC1抑制通过逆转缺氧环境中H9c2心肌细胞内PI3K/Akt信号转导通路以及p38 MAPK信号转导通路相关分子的异常表达,从而部分抑制化学缺氧环境诱导的大鼠H9c2心肌细胞的增殖抑制及凋亡等不良细胞表型出现。(3)基于AFM单细胞力学特性表征、细胞体积、细胞表面颗粒度的结果,化学缺氧5h下调了心肌细胞杨氏模量,上调了心肌细胞体积、表面颗粒度,HDAC1抑制可显着减弱上述改变的程度;数据拟合及理想物理模型显示,化学诱导的水肿心肌细胞体积与细胞刚度呈反比、与细胞表面颗粒度呈正比,我们认为,细胞刚度在由化学缺氧导致的H9c2心肌细胞水肿发生、发展过程中扮演着重要的角色。HDAC1抑制对于化学缺氧导致的H9c2心肌细胞的保护作用是通过增加细胞刚度实现的,其分子生物学机制是HDAC1抑制可调控水肿H9c2心肌细胞结构及运动性基因的表达水平,从而逆转缺氧导致的心肌细胞内细胞骨架重排及表达水平下降。上述研究结果表明,组蛋白乙酰化修饰在心肌水肿发生过程中扮演着重要的角色,该种表观遗传修饰作用可能通过多条信号转导通路发挥作用,影响水肿心肌细胞表型的改变。不仅如此,分子生物学-力学的耦合机制在心肌水肿的病理进程中同样具有一定的意义。这为心肌水肿的实验室研究及临床诊治提供了崭新的视角与依据。(本文来源于《兰州大学》期刊2017-11-01）
孙佳[6]（2016）在《TFPI-2参与SH-SY5Y细胞化学缺氧调控机制的研究》一文中研究指出目的:缺氧损伤见于多种中枢神经系统疾病,如脑梗死、脑出血、脑肿瘤、高原脑水肿等等。研究发现,缺氧可以引起脑部一系列功能蛋白和基因表达的变化,如脑红蛋白等等。其中缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)是目前已知的介导缺氧过程最重要的核转录因子,可以调控上百种基因的表达。HIF调控的缺氧通路广泛参与能量代谢、细胞周期调节、血管生成、细胞凋亡和肿瘤侵袭等病理过程,是缺氧过程中重要的调控因子。到目前为止,脑缺氧损伤的机制和调控通路并不完善,探索脑缺氧损伤新的调控因子,进一步完善缺氧通路,可以为我们提供神经保护的新靶点,对于脑部缺氧性疾病的预防和治疗具有重要意义。为寻求新的缺氧相关标志性因子,本课题组利用基因芯片及mi RNA芯片等技术对低压缺氧大鼠脑皮质进行差异因子的检测,发现了TFPI-2和mi R-92a-2这两个具有靶向关系的差异表达因子,其中TFPI-2表达与缺氧呈正相关,mi R-92a-2则相反。组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)是一种天然的抗凝因子,是内源性TF抑制物,属Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制家族。TFPI-2是一种广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂,可以抑制包括纤溶酶、基质金属蛋白酶等在内多种蛋白酶的活性,维持细胞外基质的完整性。研究发现,TFPI-2参与多种恶性肿瘤的转移和侵袭过程,与肿瘤组织血管生成、细胞凋亡等过程密切相关。但是TFPI-2在缺氧过程中的变化及调控机制没有得到充分研究,TFPI-2是否通过HIF经典途径参与细胞缺氧损伤也并不清楚。氯化钴是常用的细胞化学缺氧诱导剂,可抑制HIF-1α降解,激活HIF缺氧通路,模拟细胞缺氧环境。本实验拟通过建立SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞氯化钴化学缺氧细胞损伤模型,探究TFPI-2在SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞缺氧损伤中的变化及可能的调控机制。方法:1 CoCl_2缺氧对SH-SY5Y细胞活性和形态的影响1.1培养SH-SY5Y细胞,加入不同浓度CoCl_2(0、100、200、400μmol/L)处理细胞,分别在6小时和24小时通过倒置显微镜观察细胞生长状态,对细胞进行HE染色,观察细胞化学缺氧前后形态变化。1.2使用不同浓度CoCl_2(0、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500μmol/L)处理SH-SY5Y细胞,利用MTT法检测细胞活性变化。1.3用100μmol/L CoCl_2处理SH-SY5Y细胞,MTT法检测缺氧不同时间(0、6、12、24、48、72小时)细胞活性变化。2 CoCl_2缺氧前后SH-SY5Y细胞TFPI-2、mi R-92a表达水平检测2.1利用Western blot技术,检测100μmol/L CoCl_2缺氧不同时间(1、2、4、6、8小时)SH-SY5Y细胞HIF-1α和TFPI-2、VEGF表达水平,对氯化钴化学缺氧后基因表达变化趋势进行分析。2.2 Real-time PCR法检测100μmol/L CoCl_2缺氧8h后HIF-1αm RNA、TFPI-2 m RNA和VEGF m RNA表达变化。2.3 Real-time PCR法检测100μmol/L CoCl_2缺氧8h后mi R-92a表达变化。3 YC-1预处理对SH-SY5Y细胞缺氧后TFPI-2表达的影响3.1用10μmol/L、100μmol/L YC-1预处理细胞2小时,对照组加入相同浓度的DMSO培养2小时,然后加入100μmol/L CoCl_2共培养细胞8h,Ed U法检测各组细胞增殖活性变化。3.2 Western blot检测缺氧后YC-1预处理对缺氧后细胞TFPI-2、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平的影响。结果:1 CoCl_2缺氧对细胞形态产生影响并降低细胞存活率CoCl_2缺氧后SH-SY5Y细胞胞体变小,突触变细变短,核仁膨胀,随着氯化钴浓度缺氧时间延长,细胞逐渐出现皱缩凋亡。通过MTT检测发现,CoCl_2缺氧处理会显着降低细胞活性(P<0.05),细胞存活率下降呈剂量和时间依赖性。2 CoCl_2缺氧可以降低细胞内mi R-92a含量,上调TFPI-2 m RNA和蛋白表达水平Western blot结果显示,CoCl_2缺氧处理后2小时细胞内HIF-1α、VEGF蛋白表达水平开始升高,在6-8小时趋于稳定。CoCl_2处理可以有效激活HIF缺氧通路,建立细胞缺氧模型。缺氧4小时后TFPI-2蛋白表达水平开始升高(P<0.05),随着缺氧时间延长,细胞内TFPI-2表达水平逐渐升高而后稳定表达,与HIF-1α变化趋势相似。Real-time PCR结果显示,与对照组相比,缺氧组细胞TFPI-2、VEGF m RNA表达显着上升,而缺氧组细胞mi R-92a表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。3 YC-1预处理可减弱CoCl_2缺氧对细胞增殖活性的抑制,降低缺氧后SH-SY5Y细胞内TFPI-2表达水平。Ed U检测显示,缺氧后,SH-SY5Y细胞增殖活性降低,而YC-1预处理可减弱缺氧对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。Western blot结果显示,与缺氧组相比,YC-1预处理可以抑制缺氧后细胞HIF-1α水平,在YC-1预处理组VEGF、TFPI-2蛋白表达水平较缺氧组降低,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:本实验成功建立SH-SY5Y细胞氯化钴化学缺氧模型,证实TFPI-2m RNA及蛋白水平在SH-SY5Y细胞化学缺氧后显着升高,其表达变化可能受HIF-1—VEGF缺氧途径调控。(本文来源于《河北医科大学》期刊2016-03-01）
包财盈,叶玉柱,朱成武,薛彬彬,袁培根[7]（2015）在《用亚硫酸钠制造新的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型》一文中研究指出该文应用1.5,2.0,3.0 g/L亚硫酸钠制造新的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型,并与叁气培养箱制造的物理缺氧模型进行对比,采用hematoxylin-eosin staining(HE染色)、Cell Counting Kit-8(CCK-8)来观察亚硫酸钠对细胞的影响,检测细胞体内的活性氧和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的基因及蛋白表达量来判断模型的缺氧程度。细胞体内活性氧和HIF-1α的检测结果提示,亚硫酸钠所制造的缺氧模型的缺氧程度随其浓度的升高而升高,虽然2.0 g/L和3.0 g/L亚硫酸钠组对细胞有一定程度的毒性作用,但是1.5 g/L亚硫酸钠组对细胞的损害程度与物理缺氧组相比无明显差异。该研究表明,1.5 g/L亚硫酸钠所制造的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型较符合肺动脉平滑肌细胞缺氧模型的要求。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2015年04期）
赵彬[8]（2013）在《化学缺氧对肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞的影响》一文中研究指出氧气是生命之源，氧气参与调节体内的生命活动，包括组织修复、细胞呼吸、胚胎发育、激素合成以及细胞因子的生成；由于机体各组织器官储氧量不同，缺氧对各器官组织受损害的程度也不同。缺氧会导致人体各个组织器官功能代谢紊乱，加速了机体的衰老，甚至会引起糖尿病、中风、癌症等，严重危害人类健康。肿瘤是处于在低于正常氧分压的微环境中的细胞群体，肿瘤所处微环境是一个非常复杂的系统，肿瘤的转移是肿瘤细胞与其所处的微环境相互作用，共同进化的结果。肿瘤微环境由细胞外基质、可溶性因子、基质细胞等构成，大多数肿瘤的微环境表现为低的pH值、低氧分压，缺氧环境会诱导缺氧诱导因子的高表达,促使肿瘤细胞的生长、浸润和转移。研究发现肿瘤组织的缺氧微环境使肿瘤细胞对放射线的治疗敏感性大大降低,对化疗的药物耐药性大大提高,给临床肿瘤的放、化学治疗带来了难度,所以在肿瘤治疗中针对肿瘤组织微环境的低氧状态的研究称为近几年的重点之一。体外研究缺氧的方法有物理缺氧法和化学缺氧法。物理缺氧法需要庞大的辅助设备，例如氮气罐；化学缺氧法常用试剂是氯化钴和硫代硫酸钠以及氰化物，钴离子是一种重金属，对细胞有潜在的致癌作用；硫代硫酸钠，其造成的缺氧伴随着放热,又有副产物二氧化硫(SO_2)的产生；氰化物抑制细胞内的线粒体呼吸作用酶的活性，使整个电子传递链不能进行，导致细胞不能进行有氧呼吸，从而使细胞缺氧。本研究用一种新型的对组织或细胞无毒或低毒的化学缺氧试剂亚硫酸钠来模拟肿瘤周围低氧微环境，来研究缺氧对肿瘤细胞的影响。首先确定了本实验用化学缺氧试剂亚硫酸钠所形成的缺氧浓度及维持缺氧的时间，并评估了亚硫酸钠缺氧后的产物硫酸钠对癌细胞的影响，筛选出了合适的亚硫酸钠浓度用于后续的缺氧实验；本研究模拟实体瘤低氧微环境，系统的研究了缺氧下癌细胞的增殖、活力、形态（面积、周长、横纵比）以及细胞骨架变化。对实体瘤缺氧微环境的研究可以进一步揭示癌细胞的的生长特性，更好的揭示癌细胞的浸润、转移以及对对放、化疗的抵抗性机制，为肿瘤的治疗提供新的思路。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2013-05-01）
王国红,毕凌云,李超堃,侯软玲,尹雅玲[9]（2013）在《氯化钴诱导化学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及机制》一文中研究指出目的研究氯化钴(CoCl2)对N9小胶质细胞的损伤作用及机制。方法不同剂量CoCl2处理N9小胶质细胞后,XTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;硫代巴比妥酸(TBA)显色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期变化。结果 CoCl2(50～1 000μmol.L-1)处理24 h后,细胞活力明显降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。细胞形态发生明显改变,部分细胞出现皱缩、破碎,细胞密度减小,随CoCl2剂量增大,细胞形态损伤程度进一步恶化。MDA含量检测结果显示,氯化钴处理后,细胞上清液中MDA含量明显增多(P<0.05)。Hoechst 33258染色结果显示,氯化钴处理组的细胞凋亡比例较对照组明显增多(P<0.01),且比例随CoCl2剂量增大而增多。细胞周期检测结果显示,CoCl2可使细胞周期阻滞于G1/G0期。结论 CoCl2可呈剂量依赖性损伤N9小胶质细胞,机制与诱导细胞凋亡、引发氧化应激反应及细胞周期阻滞有关。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2013年04期）
袁明,高玲,邹青靖,栗妍,汪雯雯[10]（2012）在《二氯化钴化学缺氧对子宫内膜间质细胞增殖、凋亡及侵润的影响》一文中研究指出目的研究二氯化钴(CoCl_2)诱发化学缺氧对培养的子宫内膜间质细胞增殖、凋亡及侵润的影响。方法 :CoCl_2所致缺氧环境下培养人子宫内膜间质细胞,采用CCK-8和流式细胞术检测子宫内膜间质细胞的增殖和凋亡,并运用划痕实验及Transwell体外侵润实验检测化学缺氧对子宫间质细胞侵润能力的影(本文来源于《中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科内分泌会场（妇科内分泌学组、绝经学组、计划生育学组）论文汇编》期刊2012-11-02）
化学缺氧论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨二氯化钴(Cocl2)诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响及成纤维细胞生长因子21(FGF21)的作用机制。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组(control组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+Cocl2缺氧处理组(HFD+Cocl2组),每组10只;喂养8周后收集3组小鼠血清及肝脏组织。使用自动生化分析仪检测血清中空腹血糖、TG、TC、ALT水平;ELISA法检测小鼠血清中FGF21的含量;HE染色、叁色染色法观察肝脏组织形态学改变;Q-PCR法检测基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、FGF21 mRNA表达;Western blot法检测FGF21、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、X-盒-结合蛋白-1(XBP-1)蛋白表达。结果与control组比较,HFD组、HFD+Cocl2组小鼠血清中空腹血糖、TC、ALT、FGF21水平均明显升高(均P<0.05),肝脏内纤维化程度加重,肝脏组织TIMP-1、FGF21 mRNA以及FGF21、p-JNK、XBP-1蛋白表达均明显增加。与HFD组比较,HFD+Cocl2组小鼠血清中TG、ALT、FGF21水平均明显升高(均P<0.05),肝脏纤维化程度明显加重,肝脏组织TIMP-1、FGF21 mRNA以及FGF21、p-JNK、XBP-1蛋白表达均进一步增加。结论 Cocl2诱发急性化学缺氧可加重非酒精脂肪肝小鼠的肝脏损伤,上调FGF21的表达;内质网应激反应可能是缺氧诱导脂类代谢障碍的调控途径。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
化学缺氧论文参考文献
[1].胡晨,汪玉馨,孟长虹.姜黄素下调NF-κB信号通路抑制化学缺氧诱导的U87细胞炎症反应[J].药物评价研究.2018
[2].张学松,张谢,叶桦,宋毓飞.Cocl2诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响[C].第叁十届全国中西医结合消化系统疾病学术会议论文集.2018
[3].李雷.Rig-I调控化学缺氧诱导神经胶质炎症机制研究[D].南京医科大学.2018
[4].张学松,张谢,叶桦,宋毓飞.Cocl_2诱发急性化学缺氧对非酒精性脂肪肝小鼠的影响[J].浙江医学.2018
[5].李屹.组蛋白去乙酰化酶1抑制对化学缺氧致H9c2心肌细胞水肿的保护作用及分子生物学—力学耦合机制的研究[D].兰州大学.2017
[6].孙佳.TFPI-2参与SH-SY5Y细胞化学缺氧调控机制的研究[D].河北医科大学.2016
[7].包财盈,叶玉柱,朱成武,薛彬彬,袁培根.用亚硫酸钠制造新的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型[J].中国细胞生物学学报.2015
[8].赵彬.化学缺氧对肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞的影响[D].西北农林科技大学.2013
[9].王国红,毕凌云,李超堃,侯软玲,尹雅玲.氯化钴诱导化学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及机制[J].中国药理学通报.2013
[10].袁明,高玲,邹青靖,栗妍,汪雯雯.二氯化钴化学缺氧对子宫内膜间质细胞增殖、凋亡及侵润的影响[C].中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科内分泌会场（妇科内分泌学组、绝经学组、计划生育学组）论文汇编.2012
论文知识图
