导读:本文包含了溶血相关毒素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:弧菌,毒素,杆菌,大肠杆菌,阴沟,溶血性,毒物。
溶血相关毒素论文文献综述
杨样[1]（2015）在《产肠毒素大肠杆菌溶血素HlyA的原核表达、多抗制备及相关功能探析》一文中研究指出产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC)是一种重要的食源性致病菌,可引起人或幼畜(初生羔羊、犊牛及断奶仔猪)的腹泻,是断奶仔猪腹泻的主要病原菌,其高发病率和高死亡率的特点给养殖业造成严重的经济损失。K88ac+ETEC血清型为国内初生及断奶仔猪腹泻的优势血清型,其主要毒力因子包括黏附素菌毛、肠毒素、内毒素、水肿病毒素、溶血素等。ETEC的黏附素菌毛、不耐热肠毒素(Heat-labile enterotoxin,LT)、耐热性肠毒素(Heat-stable enterotoxin, ST)等毒力因子受到广泛关注,但作为尿路致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli,UPEC)、肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhage Escherichia coli, EHEC)重要毒力因子的溶血素在ETEC致病机理中的功能却鲜有报道,故本研究选择K88ac+ETEC作为试验对象,初步探究溶血素在ETEC致病中的作用。通过PCR方法扩增负责表达大肠杆菌C83902溶血素亚单位HlyC、HlyA的基因hlyC, hlyA,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET-28a(+)-hlyCA,经酶切验证、测序,确定质粒的成功构建。将重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导和Ni-NTA亲和层析获得高纯度的融合蛋白HlyA。纯化后的重组蛋白用两种方法免疫新西兰白兔,获得特异性较高的兔源抗HlyA多克隆抗体血清。本研究构建、表达并获得高纯度的融合蛋白HlyA,经免疫后成功获得兔源HlyA抗体,为进一步探究大肠杆菌溶血素HlyA的生物学功能及致病机理奠定基础。利用ETEC标准株C83902、已构建的溶血素hlyA基因缺失株C83902A hlyA和回补株C83902A hlyA/phlyA,通过荧光定量PCR从转录水平研究溶血素与ETEC其他重要毒力因子的关系,初步探索了溶血素在细菌胞外的存在形式,并对仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2细胞系进行了粘附和粘附抑制试验、细胞形态学观察、细胞毒性试验等一系列功能性探索。Real-time PCR试验结果表明溶血素的缺失使得sepA(编码丝氨酸蛋白酶主要结构亚基)的转录水平上调了83%(p<0.01),fimH(编码Ⅰ型菌毛主要结构亚基)和eltB(编码热不稳定肠毒素主要结构亚基)分别下调约40%和21%(p<0.01),faeG(编码K88菌毛主要结构亚基)显着下调了约24%(p<0.05),而对fliC(编码鞭毛丝蛋白主要结构亚基)的转录无显着影响。上述结果表明溶血素与丝氨酸蛋白酶可能存在相互调控机制,且溶血素的表达可能与细菌对宿主细胞的黏附有关。对外膜囊泡(outer membrane vesicle, OMV)及溶血素进行分离鉴定后,发现溶血素除游离形式存在外,还能以与外膜囊泡结合的形式存在于细菌上清中,验证了外膜囊泡可以作为溶血素运输载体的假说。IPEC-J2的细胞黏附与黏附抑制试验结果表明溶血素缺失株组的细菌粘附数量为野生株组的2.13倍(p<0.01),细胞形态学观察发现细胞经溶血素作用后形态变圆变小,且细胞毒性试验结果表明溶血素可引起细胞死亡,综合IPEC-J2细胞的各项试验可以说明溶血素对仔猪空肠上皮细胞具有细胞毒性,且可能降解细胞间连接蛋白,因而引起上皮细胞脱落从而使得细菌可以从肠道排出,这种排菌机制理论与溶血素缺失株细菌黏附数量提高的试验结果相一致。(本文来源于《扬州大学》期刊2015-04-01）
苏建新,聂军,苏桂栋,王珊珊,黄佳亮[2]（2004）在《副溶血性弧菌直接溶血相关毒素蛋白的纯化及性质初探》一文中研究指出目的 纯化副溶血性弧菌直接溶血相关毒素 (TRH)蛋白 ,鉴定表达产物的生物学活性和免疫原性 ,为构建副溶血性弧菌快速检测方法奠定物质基础。方法 构建trh基因的原核融合表达系统PRⅡ (trh/pGEX 3X/DE3) ,在 31℃条件下 0 6mmol/LIPTG诱导表达。用SDS PAGE分析蛋白表达 ,溶血试验检测表达蛋白的溶血活性。将表达产物皮下注射免疫兔 ,溶血抑制实验检测该抗体体外对TRH溶血活性的抑制作用。结果 PRⅡ在上述条件下诱导后 ,TRH呈可溶性、融合性表达。溶血试验表明 ,表达的蛋白具有溶血活性。用表达的蛋白免疫兔产生的相应抗体 ,在体外具有抑制TRH溶血活性的作用。结论 trh基因在原核融合表达系统pGEX 3X/DE3中获得成功表达 ,并得到纯度较高的TRH蛋白 ,为基因工程大规模制备高纯度TRH抗原、制备抗TRH的多克隆和 (或 )单克隆抗体、构建基因工程菌苗、阐明该菌的致病机制奠定了基础(本文来源于《华南预防医学》期刊2004年01期）
苏桂栋,苏建新[3]（2003）在《副溶血性弧菌直接溶血毒素和溶血相关毒素的研究进展》一文中研究指出副溶血性弧菌 (vibrioparahaemolyticus,Vp)是一种嗜盐性细菌 ,最早于 1 95 0年在日本发生的一次暴发性食物中毒中发现并分离成功 ,以后便经常从食物中毒患者中分离出。该菌主要存在于近海岸的海水、海底沉积物及鱼贝类等海产品中 ,(本文来源于《广东医学》期刊2003年12期）
苏建新,聂军,苏桂栋,李兴国,李志峰[4]（2003）在《副溶血性弧菌溶血相关毒素基因原核融合表达载体的构建》一文中研究指出目的:实现副溶血性弧菌溶血相关毒素TRH基因在大肠杆菌中的融合表达,以获得纯度较高的蛋白产物。方法:构建trh基因的原核融合表达系统PRⅡ(trh/pGEX—3X/DE3),并在31℃条件下,用0.6mmol/L IPTG诱导表达。用SDS-PAGE分析蛋白表达。结果:PRⅡ在上述条件下诱导后,目的蛋白呈高效、可溶、融合性表达。薄层扫描显示,细菌的周质腔中的蛋白量最高,SDS-PAGE表明,融合蛋白的相对分子量(Mr)为49Kda,与预期结果一致。结论:trh基因在原核融合表达系统pGEX-3X/DE3中获得成功表达,为基因工程大规模制备高纯度TRH抗原、构建基因工程菌苗、阐明该菌的致病机制奠定了基础。(本文来源于《华南国防医学杂志》期刊2003年05期）
张继明[5]（1996）在《产类志贺毒素Ⅱ相关毒素阴沟肠杆菌感染与溶血尿毒综合征》一文中研究指出溶血尿毒综合征(HUS)在临床上以急性肾功能衰竭、血小板减少和微血管性溶血性贫血为特征。HUS的发生与某些微生物的感染有密切关系,如产类志贺毒素(SLT)的大肠杆菌(血清群为O157,尤其是O157:H7)和产志贺毒素的痢疾志贺菌1型感染均可并发HUS。此外,某些产SLT-Ⅱ相关毒素的弗劳地枸橼酸杆菌也可引起腹泻和HUS。本文作者发现,HUS还可能由产SLT-Ⅱ相关性细胞毒素的阴沟肠杆菌感染所引起。作者报告的病例为5个月龄的女婴,出(本文来源于《国外医学(微生物学分册)》期刊1996年06期）
宋秀宇[6]（1993）在《肠凝聚性大肠杆菌分泌一种与大肠杆菌溶血素抗原性相关的热不稳定毒素》一文中研究指出肠凝聚性大肠杆菌(EAggEC)是流行病学上与婴儿腹泻有关的菌株,本文报道EAggEC分泌一种与大肠杆菌溶血素抗原性相关的热不稳定蛋白质。作者用钙指示剂氟-3染色显示:感染了EAggEC JPN-10株对数生长期肉汤培养物(约10~3个菌)的HEp-2单层细胞比未感染细胞的钙依赖性荧光水平明显增高,同体积的JPN-10株培养上清液也能增强荧光,热处理的培养上清液则无此作用,表明这种增强(本文来源于《国外医学(微生物学分册)》期刊1993年01期）
溶血相关毒素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 纯化副溶血性弧菌直接溶血相关毒素 (TRH)蛋白 ,鉴定表达产物的生物学活性和免疫原性 ,为构建副溶血性弧菌快速检测方法奠定物质基础。方法 构建trh基因的原核融合表达系统PRⅡ (trh/pGEX 3X/DE3) ,在 31℃条件下 0 6mmol/LIPTG诱导表达。用SDS PAGE分析蛋白表达 ,溶血试验检测表达蛋白的溶血活性。将表达产物皮下注射免疫兔 ,溶血抑制实验检测该抗体体外对TRH溶血活性的抑制作用。结果 PRⅡ在上述条件下诱导后 ,TRH呈可溶性、融合性表达。溶血试验表明 ,表达的蛋白具有溶血活性。用表达的蛋白免疫兔产生的相应抗体 ,在体外具有抑制TRH溶血活性的作用。结论 trh基因在原核融合表达系统pGEX 3X/DE3中获得成功表达 ,并得到纯度较高的TRH蛋白 ,为基因工程大规模制备高纯度TRH抗原、制备抗TRH的多克隆和 (或 )单克隆抗体、构建基因工程菌苗、阐明该菌的致病机制奠定了基础
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
溶血相关毒素论文参考文献
[1].杨样.产肠毒素大肠杆菌溶血素HlyA的原核表达、多抗制备及相关功能探析[D].扬州大学.2015
[2].苏建新,聂军,苏桂栋,王珊珊,黄佳亮.副溶血性弧菌直接溶血相关毒素蛋白的纯化及性质初探[J].华南预防医学.2004
[3].苏桂栋,苏建新.副溶血性弧菌直接溶血毒素和溶血相关毒素的研究进展[J].广东医学.2003
[4].苏建新,聂军,苏桂栋,李兴国,李志峰.副溶血性弧菌溶血相关毒素基因原核融合表达载体的构建[J].华南国防医学杂志.2003
[5].张继明.产类志贺毒素Ⅱ相关毒素阴沟肠杆菌感染与溶血尿毒综合征[J].国外医学(微生物学分册).1996
[6].宋秀宇.肠凝聚性大肠杆菌分泌一种与大肠杆菌溶血素抗原性相关的热不稳定毒素[J].国外医学(微生物学分册).1993
论文知识图
