导读:本文包含了猪干扰素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干扰素,基因,抗病毒,酵母,因子,蛋白,胸腺。
猪干扰素论文文献综述
胡涛,何志远,张文昌,赵俊,王明丽[1]（2019）在《鸡粒细胞巨噬细胞集落刺激因子-猪干扰素α1融合基因在大肠埃希菌中的可溶性表达及其生物学活性研究》一文中研究指出为可溶性表达重组鸡粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(ChGM-CSF)与猪干扰素α1 (PoIFNα1)融合蛋白,并研究其生物学活性,本研究分别提取鸡、猪肝脏细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增ChGM-CSF和PoIFNα1基因,经linker连接上述两种基因后将其克隆于pET-32a原核表达载体,转化E.coli BL21 (DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE和western blot检测融合蛋白表达产物。在ST细胞/VSV病毒测定系统以细胞病变抑制法滴定该融合蛋白的抗病毒活性;同时用MTT法检测其对鸡淋巴细胞增殖活性的促进作用。结果显示,PCR扩增并融合后的ChGM-CSF和PoIFNα1融合基因约为1 000 bp,构建重组表达载体后,诱导表达的rChGM-CSF-PoIFNα1融合蛋白分子量约55 ku,主要存在于破碎菌体的上清中,表达量较高。Western blot检测结果显示,该融合蛋白分别能够与ChGM-CSF多抗和PoIFNα单克隆抗体特异性结合,其抗病毒比活性约为1.1×10~6 IU/mg,并且具有促进鸡淋巴细胞增殖的活性。本研究为rChGM-CSF-PoIFNα1重组融合蛋白的研制及其相关活性的测定提供实验依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年06期）
郭佳宏,夏叶,李春华,缪德年[2]（2018）在《猪干扰素α的基因工程研究与应用》一文中研究指出我国是养猪大国,养猪业在国民经济中居于十分重要的地位。但猪圆环病毒病、猪瘟、口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎等病毒性疫病已成为当前困扰养猪业发展的重大问题,每年因病毒感染而造成的损失无法估量。对这些常见的病毒病,虽然有些可用疫苗作常规免疫,但由于免疫程序、疫苗本身和动物个体等原因,使其在实际应用中的效果并不十分理想。干扰素(interferon,INF)是由细胞产生的一类(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2018年06期）
钟颖,牛婷,代洪波,蔡雨函,廖果[3]（2018）在《重组猪干扰素α6在毕赤酵母中表达及其活性研究》一文中研究指出为获得稳定表达重组猪α6干扰素的毕赤酵母。人工合成Po IFN-α6基因片段,连接至pPICZαA质粒,构建PoIFN-α6毕赤酵母表达质粒pPICZαA-PoIFNα6;经Sac I酶线性化后转化至毕赤酵母X33感受态细胞,筛选阳性克隆;优化毕赤酵母表达条件,并对表达产物进行了体外抗病毒活性测定。结果表明,成功构建了表达重组猪α6干扰素的毕赤酵母,以1%甲醇诱导72 h后,菌体上清SDS-PAGE可见20 kDa左右目的条带,Western blot检测为阳性;表达的重组猪干扰素α活性在PRRSV/Marc-145、VSV/MDBK、PRV/Vero、PEDV/Vero、PPV/PK-15、PCV2/PK-15和TGEV/PK-15系统中均具有良好的抗病毒活性。说明PoIFN-α6在细胞上清中表达成功,并且在不同宿主细胞中均有抗病毒活性。(本文来源于《湖北畜牧兽医》期刊2018年08期）
刘敏,张晨瑶,王飞,翟彦生,肖颖[4]（2017）在《融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定》一文中研究指出猪干扰素α(IFN-α)是在特定条件下由细胞产生的一种具有广谱、高效抗病毒活性的可溶性糖蛋白,胸腺素α1(Tα1)是一种具有免疫调节的活性肽.本研究中将Tα1基因与去掉信号肽序列的猪IFN-αN端融合,构建酵母表达载体PHBM-Tα1-IFNα,同时构建单独表达IFNα的重组质粒PHBM-IFNα,重组质粒电转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株,甲醛诱导表达.利用SDS-PAGE法检测融合蛋白的表达,并用细胞病变抑制法测定干扰素的效价.实验结果表明,酵母表达上清中IFNα的效价为2.916×10~6U/m L;Tα1-IFNα的效价为2.860×10~7U/m L,该结果证实胸腺素α1可提高融合表达蛋白猪干扰素的活性,因此,通过酵母表达体系获得高活性胸腺素-猪干扰素融合蛋白,可为高效、低成本获得抗病毒药物提供一种新的模式.(本文来源于《湖北大学学报(自然科学版)》期刊2017年04期）
查映丽,赵雨,戚仕梅,赵俊,俞海洋[5]（2016）在《应用RP-HPLC法检测重组猪干扰素α成品蛋白含量》一文中研究指出目的:建立测定重组猪干扰素α成品中蛋白含量的反相高效液相色谱法(RP-HPLC),并进行验证。方法:应用RP-HPLC法测定重组猪干扰素α标准品及供试品的蛋白含量,并对方法的线性、精密度、稳定性、重复性进行验证。采用已建立的RP-HPLC检测方法测定7批重组猪干扰素α样品的蛋白含量,与Lowry法的检测结果进行比较。结果:重组猪干扰素α在6.141 7~25μg范围内,与峰面积呈现良好的线性关系(R2=0.985 9)。用所建立的方法测定同一标准品,进样6次,计算得到RSD(相对标准偏差)为1.7%;同一批样品进样12次,检测供试品的干扰素α蛋白含量,计算得到RSD为3.9%;同一批样品,取6份分别进样,检测供试品的干扰素α蛋白含量,计算得到RSD为0.9%。结论:建立了用RP-HPLC法测定重组猪干扰素α蛋白含量的方法。该方法简便、精密度、稳定性、重复性好,将蛋白分离成单一组分峰,紫外定量测定各峰吸光度,集定量与定性、纯度检验合一,定量范围可小于10μg,测定体积只需几微升,可用于重组猪干扰素α成品蛋白含量检测。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2016年13期）
周梦娇,李传民,李建伟,张晓军,孙博兴[6]（2016）在《猪干扰素γ诱导蛋白30基因表达载体的构建及验证》一文中研究指出干扰素γ诱导蛋白30基因(IFI30)能够在特异抗原递呈细胞中组成性表达,在其他细胞中能被IFN-γ诱导表达,IFI30在MHC-Ⅱ限制性抗原加工递呈过程中起关键性作用。为了构建猪IFI30表达载体并验证其在体外细胞表达情况。本试验从猪肺脏组织中扩增出IFI30中长度741bp的CDS区,将其克隆到带有红色荧光的真核表达pEF1a-IRES-DsRed-Express2上,用脂质体转染法转染到Marc145细胞中,用RT-PCR以及Western blot检测其mRNA表达量和蛋白表达量。结果表明,成功构建出猪IFI30表达载体并在Marc145细胞中高效表达。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年05期）
姜博[7]（2016）在《猪干扰素诱导跨膜蛋白的原核表达与多克隆抗体制备及PRRSV感染对其影响》一文中研究指出干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM)是美国科学家通过在家禽和猪身上进行试验,发现的一类抗病毒蛋白,该蛋白能够激发身体自身抑制多种有或者无胞膜病毒的复制而起到抗病毒作用。2009年Cell首次报道IFITM在甲型流感病毒感染早期显着抑制病毒的复制,使人们开始对该家族成员的抗病毒活性有了全新的认识和更深刻的理解。本论文首先以干扰素刺激的猪外周血淋巴细胞总RNA为模板克隆猪IFITM基因序列,在对序列进行分子生物学信息分析的基础上采用原核表达系统表达猪IFITM,并进行表达蛋白的纯化,然后免疫小鼠制备多克隆抗体,同时初步研究了PRRSV感染对猪不同组织中IFITMs mRNA表达水平的影响。本研究主要获得以下结果:1.参照GenBank公布的Swine IFITM基因序列,用Primer Premier 5软件设计3对扩增猪干扰素跨膜蛋白基因的特异性引物,从干扰素刺激的猪外周淋巴细胞中提取RNA,通过RT-PCR扩增目的基因,经过转化、连接步骤最终将目的基因正确连接到克隆载体pMD18-T Vector(simple)上,构建重组质粒。将测序结果进行核酸序列比对,序列比对正确的重组质粒标记为pMD18-IFITM1/2/3。2.将IFITM基因连接到了原核表达载体p ColdⅠ上,构建了原核表达载体pColdⅠ-IFITM,转化进入大肠杆菌BL21感受态细胞中,经诱导剂IPTG诱导表达,超声破碎菌体后经SDS-PAGE和Western blot分析,表明诱导表达获得了相应大小的重组蛋白,重组蛋白以可溶性的形式存在于上清中。3.选择亲和层析介质Ni-NTA Resin对诱导表达的蛋白进行纯化,得到纯度较高的目的蛋白。将纯化的目的蛋白腹腔注射免疫小鼠,经过3次免疫后,摘除眼球采集血液,分离血清,采用间接ELISA方法检测抗体效价。结果表明血清中IFITM1、IFITM2、IFITM3抗体效价最高达到了1∶1024000。4.采用荧光定量PCR技术检测采集的正常猪和PRRSV感染猪不同组织中IFITM mRNA表达水平。结果表明IFITM在所有检测组织中均有表达,但是表达量有明显差异。同一种组织相比较,IFITM基因在PRRSV感染猪组织中比正常猪组织中表达水平高,且差异显着。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2016-05-01）
李红,刘成倩,严华祥,王家豪,易建中[8]（2016）在《猪干扰素-δ基因原核表达载体的构建及高效表达》一文中研究指出干扰素(interferon,IFN)因具有广谱抗病毒、抗肿瘤活性及免疫调节作用而备受关注。本研究根据GenBank上公布的猪IFN-δ核苷酸序列设计1对引物,通过PCR方法扩增出猪IFN-δ基因,片段大小为513bp,并将其克隆到原核表达载体上得到重组质粒。将重组质粒转化大肠杆菌Transetta BL21(DE3)受体菌,经SDS-PAGE电泳分析,结果表明,pET-30a-DsbA-IFN-δ表达量较高,表达的融合蛋白分子质量约20ku,且主要以包涵体形成存在,经Western blotting分析发现表达的融合蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2016年04期）
李红,刘成倩,严华祥,王家豪,易建中[9]（2016）在《猪干扰素-δ基因原核表达载体的构建及高效表达》一文中研究指出干扰素因具有广谱抗病毒、抗肿瘤活性及免疫调节作用而受到重视。本研究根据GenBank上公布的猪IFN-δ核酸序列设计1对引物,通过RT-PCR方法扩增出猪IFN-δ基因,其大小为513 bp,并将其克隆到原核表达栽体上,得到重组质粒。将重组质粒转化大肠杆茵Transetta BL(DE3)感受态细胞,经SDS-PAGE电泳分析,结果表明pET-30a-DsbA-IFN-δ表达量较高,表达的融合蛋白分子质量约20 kD,且主要以包涵体形成存在,经Western blotting分析发现表达的融合蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应。(本文来源于《第叁届规模化养猪新技术国际研讨会论文集》期刊2016-03-09）
李永涛,常洪涛,赵永祥,赵军,陈陆[10]（2016）在《猪干扰素调节因子1在细胞抗病毒天然免疫应答中的作用》一文中研究指出从猪肺泡巨噬细胞中克隆了猪干扰素调节因子1(interferon regulatory factors 1,IRF1)基因,并构建了真核表达载体pCAGGS-HA-IRF1。将该质粒转染PK-15后通过Western-blot确定IRF1蛋白在细胞内能够高效表达。通过体外抗病毒试验发现,过表达IRF-1能够显着抑制H1N1流感病毒和猪水泡性口炎病毒的复制。进一步通过双荧光报告系统发现,IRF1显着促进polyI:C诱导的猪IFN-β、ISRE和NF-κB启动子的活性,说明IRF1可能通过增强细胞的天然免疫应答进而发挥抗病毒功能。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年01期）
猪干扰素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
我国是养猪大国,养猪业在国民经济中居于十分重要的地位。但猪圆环病毒病、猪瘟、口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎等病毒性疫病已成为当前困扰养猪业发展的重大问题,每年因病毒感染而造成的损失无法估量。对这些常见的病毒病,虽然有些可用疫苗作常规免疫,但由于免疫程序、疫苗本身和动物个体等原因,使其在实际应用中的效果并不十分理想。干扰素(interferon,INF)是由细胞产生的一类
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
猪干扰素论文参考文献
[1].胡涛,何志远,张文昌,赵俊,王明丽.鸡粒细胞巨噬细胞集落刺激因子-猪干扰素α1融合基因在大肠埃希菌中的可溶性表达及其生物学活性研究[J].中国预防兽医学报.2019
[2].郭佳宏,夏叶,李春华,缪德年.猪干扰素α的基因工程研究与应用[J].上海畜牧兽医通讯.2018
[3].钟颖,牛婷,代洪波,蔡雨函,廖果.重组猪干扰素α6在毕赤酵母中表达及其活性研究[J].湖北畜牧兽医.2018
[4].刘敏,张晨瑶,王飞,翟彦生,肖颖.融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定[J].湖北大学学报(自然科学版).2017
[5].查映丽,赵雨,戚仕梅,赵俊,俞海洋.应用RP-HPLC法检测重组猪干扰素α成品蛋白含量[J].中国新药杂志.2016
[6].周梦娇,李传民,李建伟,张晓军,孙博兴.猪干扰素γ诱导蛋白30基因表达载体的构建及验证[J].中国兽医学报.2016
[7].姜博.猪干扰素诱导跨膜蛋白的原核表达与多克隆抗体制备及PRRSV感染对其影响[D].西北农林科技大学.2016
[8].李红,刘成倩,严华祥,王家豪,易建中.猪干扰素-δ基因原核表达载体的构建及高效表达[J].中国畜牧兽医.2016
[9].李红,刘成倩,严华祥,王家豪,易建中.猪干扰素-δ基因原核表达载体的构建及高效表达[C].第叁届规模化养猪新技术国际研讨会论文集.2016
[10].李永涛,常洪涛,赵永祥,赵军,陈陆.猪干扰素调节因子1在细胞抗病毒天然免疫应答中的作用[J].中国兽医学报.2016
论文知识图
