钙信号在酸刺激促进Barrett食管发生中的作用研究

钙信号在酸刺激促进Barrett食管发生中的作用研究

论文摘要

目的探讨酸刺激促进Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)形成的过程中细胞内钙信号的作用。方法免疫组织化学方法检测比较25对正常人食管粘膜和Barrett食管粘膜中CDX2的蛋白表达变化,细胞实验分为对照组(pH7.4)及酸刺激组(pH5.5),动态钙离子成像技术检测不同pH溶液及内钙螯合剂刺激正常食管粘膜细胞株HEEC后胞内钙浓度的变化。蛋白免疫印迹法检测pH5.5及内钙螯合剂孵育HEEC细胞24 h后CDX2的蛋白表达变化。结果免疫组织化学结果显示CDX2在正常食管粘膜组织和Barrett食管粘膜组中均有阳性表达,并且Barrett食管中CDX2的表达较正常食管粘膜明显升高,差异有统计学意义(P<0.001)。动态钙离子检测发现与对照组(pH 7.4)相比,pH5.5及pH5.0酸刺激组能明显促进HEEC细胞内的钙离子浓度升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而pH7.0、6.5、6.0等酸刺激组对细胞内钙水平没有明显影响(P>0.05),pH5.5刺激的同时加入细胞内钙螯合剂BAPTA-AM共同作用,HEEC细胞内增高的钙离子水平能被显著抑制(P<0.001);Western blot结果发现,与pH7.4孵育24h相比,HEEC细胞pH5.5孵育24h后CDX2的表达显著上调(P<0.001),加入细胞内钙螯合剂BAPTA-AM共同作用后,CDX2蛋白表达的上调被明显逆转(P<0.01)。结论细胞内钙变化是酸暴露上调CDX2表达,促进Barrett食管发生的关键环节。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 HEEC细胞培养与分组
  •     1.2.2 免疫组化检测正常食管和Barrett食管的CDX2表达
  •     1.2.3 Western-blot技术检测HEEC细胞的CDX2表达
  •     1.2.4 激光共聚焦显微镜检测HEEC细胞内Ca2+动态变化
  •   1.3 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 CDX2在Barrett食管粘膜的表达水平显著高于正常食管粘膜
  •   2.2 酸刺激对HEEC细胞内钙离子水平的影响
  •   2.3 酸刺激对HEEC细胞CDX2蛋白表达的影响
  •   2.4 钙螯合剂BAPTA-AM对酸刺激诱导的CDX2表达变化的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 谢睿,徐靖宇

    关键词: 食管,酸暴露,钙信号,尾型同源盒转录因子

    来源: 遵义医科大学学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 消化系统疾病

    单位: 遵义医科大学附属医院消化内科

    基金: 国家自然科学基金资助项目(NO:81660099)

    分类号: R571

    DOI: 10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2019.0107

    页码: 667-672

    总页数: 6

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