一、抑癌基因PTEN在口腔鳞癌中的表达及其意义（论文文献综述）
王晶[1]（2021）在《人舌鳞癌中PTEN、STING、IRF3的表达及临床意义》文中指出目的:探究人舌鳞癌中PTEN、STING、IRF3的表达情况,分析其表达情况与临床病理参数各因素间的关系,并对上述三因子在TSCC中表达的相关性进行分析。方法:采用免疫组化En Vision法检测65例TSCC组织和癌旁正常组织中PTEN、STING和IRF3蛋白的表达情况。应用SPSS20.0软件包分析PTEN、STING、IRF3与临床病理参数的关系;三因子间表达的相关性;三因子与患者预后的关系。结果:1.PTEN阳性表达主要位于细胞质。在TSCC中的阳性表达率为64.62%,明显低于癌旁正常组织（P<0.01）;PTEN的阳性表达率与临床分期、淋巴结转移、病理分级显着相关（P<0.05）,与患者性别、年龄无关（P>0.05）;经Log-rank法单因素生存分析发现,PTEN低表达与患者不良预后存在显着关系（c2=6.325,P=0.012）。2.STING阳性表达主要位于细胞质。在TSCC中的阳性表达率为78.46%,明显高于癌旁正常组织中的阳性表达率（P<0.01）;PTEN的阳性表达与临床分期、淋巴结转移、病理分级有关系（P<0.05）,与患者性别、年龄无关（P>0.05）。经Log-rank法单因素生存分析发现,STING高表达与患者不良预后存在显着相关性（c2=6.047,P=0.014）。3.IRF3阳性表达主要位于细胞质。在TSCC中的阳性表达率为81.54%,明显高于癌旁正常组织中的阳性表达率（P<0.01）;IRF3的阳性表达与临床分期、淋巴结转移、病理分级有关系（P<0.05）,与患者性别、年龄无关（P>0.05）。经Log-rank法单因素生存分析发现,IRF3高表达与患者不良预后存在显着相关性（c2=4.945,P=0.026）。4.在TSCC中PTEN与STING呈负性相关（r=-0.309,P=0.012）,PTEN与IRF3呈负性相关（r=-0.269,P=0.030）,STING与IRF3呈正相关（r=0.908,P<0.001）。结论:1.PTEN在TSCC中的阳性表达率低,在癌旁正常组织中高,且其表达水平的差异与临床分期、病理分级、淋巴结转移相关,提示PTEN的低或不表达可能在促进TSCC的发生、发展中起到一定的作用。2.STING、IRF3在TSCC中阳性表达率高,在癌旁正常组织中低,且其表达水平的差异与临床分期、病理分级、淋巴结转移相关,提示STING、IRF3的过表达可能在促进TSCC发生、发展中起到一定的作用。3.在TSCC中,PTEN与STING、IRF3在TSCC中呈负性相关,由此推测PTEN可能对STING、IRF3的表达起到一定的调控作用。4.PTEN低表达、STING高表达、IRF3高表达均与患者不良预后存在明显相关性,由此推断PTEN、STING、IRF3可能参与TSCC的发生、发展并对患者的预后评估起到一定的作用。
孙婉芬[2]（2020）在《ACTN-4基因在口腔鳞状细胞癌表达及对SCC15细胞凋亡的影响研究》文中研究说明目的:探讨ACTN-4在口腔鳞状细胞癌组织表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:qPCR检测ACTN-4在口腔鳞状细胞癌组织中的mRNA表达;免疫组化检测ACTN-4在口腔鳞状细胞癌组织蛋白表达情况;将口腔鳞状细胞癌SCC15细胞分为空白组（细胞无特殊的处理）、NC组（细胞中转染脂质体2000及NC siRNA）及si-ACTN-4（细胞中转染脂质体2000及设计合成的ACTN-4特异性siRNA）,Western blotting检测转染siRNA 48h后细胞ACTN-4、Bcl-2、Bax、AKT和p-AKT表达,流式细胞术检测细胞凋亡率;MTT法检测转染siRNA 24h、48h和72h的细胞增殖情况。结果:（1）ACTN-4在口腔鳞癌组织mRNA表达明显高于癌旁组织（P<0.05）。（2）ACTN-4定位于口腔癌细胞的胞浆或胞膜,以胞浆或胞膜中呈现出明显的黄色或棕褐色的阳性细胞,其阳性细胞表现出弥漫性分布;（3）ACTN-4特异性siRNA转染SCC15细胞48h后,si-ACTN-4组ACTN-4蛋白表达明显低于空白组（P<0.05）。（4）si-ACTN-4转染SCC15细胞24h,si-ACTN-4组细胞OD值与空白组比较差异无统计学意义（P>0.05）,si-ACTN-4转染SCC15细胞48h和72h,si-ACTN-4组细胞OD值与空白组比较差异有统计学意义（P<0.05）。（5）si-ACTN-4转染SCC15细胞48h,si-ACTN-4组细胞凋亡率明显高于空白组（P<0.05）。（6）si-ACTN-4转染SCC15细胞48h,与空白组比较,si-ACTN-4组p-AKT和Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显升高（P<0.05）,三组间AKT蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）结论:ACTN-4在口腔鳞癌组织中阳性表达,抑制ACTN-4表达可明显降低口腔鳞癌SCC15细胞增殖,诱导口腔鳞癌SCC15细胞凋亡,下调p-AKT和Bcl-2表达,上调Bax表达。抑制ACTN-4表达可能通过抑制AKT信号通路的活化从而抑制口腔鳞癌SCC15细胞增殖及诱导细胞凋亡,可能作为口腔鳞癌靶向治疗的潜在靶点。
屈直[3]（2020）在《USP13在口腔鳞癌中的作用及其分子机制》文中研究表明第一部分USP13在口腔鳞癌中的表达及与预后的相关性分析目的:本研究通过对口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者肿瘤组织中USP13的表达情况进行检测,并探究其变化情况与患者临床病理指标及预后的关系。研究方法:收集95例原发OSCC患者肿瘤组织作为试验组;同时收集距肿瘤切缘l cm以上,形态学正常粘膜组织作为对照组。使用TRIzol法分别提取肿瘤组织和癌旁正常组织中总RNA,并反转录成c DNA。根据USP13基因组序列合成USP13特异性引物,以5S RNA为内参照,通过荧光定量PCR检测肿瘤组织和正常粘膜组织中USP13m RNA表达水平的差异。分组依据荧光定量PCR检测结果的中位数,并将纳入的患者分为高表达组和低表达组。SPSS 25.0统计学软件用于本次研究数据的统计学分析。分类资料中,USP13表达与临床病理指标间关系使用卡方检验来分析;患者的生存及预后情况使用Kaplan-Meier生存分析;患者无病生存期（DFS）的计算采取自肿瘤诊断之日起至明确病理学发生局部复发、远处转移或死亡的时间。当P<0.05认为差异有统计学意义。结果:95例OSCC样本中,荧光定量PCR和免疫组织化学（IHC）检测结果显示癌组织中USP13的表达水平显着低于癌周正常组织（P<0.05）。其中,低表达组有54例患者,高表达组有41例患者。病理资料研究中,USP13的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小（T分期）、颈部淋巴结转移（N分期）及是否饮酒无关（所有P值均>0.05）;USP13表达与肿瘤的原发部位（P=0.001）、组织分化程度（P=0.011）、临床分期（P=0.031）、以及是否吸烟有关（P=0.034）。生存分析结果表明,USP13表达水平与OSCC患者预后相关（P<0.01）。结论:OSCC患者肿瘤组织中USP13的表达水平下降,USP13的表达受患者肿瘤原发部位、组织分化程度、临床分期以及是否吸烟的影响。USP13表达下降显示OSCC患者有较差的预后。第二部分USP13表达水平对OSCC生理功能影响的机制研究目的:近年研究表明,泛素特异性肽酶13（USP13）是肿瘤发生过程中的重要泛素化酶调控因子。然而,该因子在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的作用却仍然不是十分的明确。本部分通过体内外实验探讨USP13在OSCC发生发展中的作用及分子机制,以期为USP13可能作为OSCC治疗的靶点提供理论基础。研究方法:我们构建了稳定过表达USP13的口腔鳞癌细胞和干扰USP13表达的慢病毒,并通过体外研究USP13对口腔鳞癌细胞生物学功能的影响。同时进行体内裸鼠成瘤实验,研究USP13对种植瘤生长的影响。结果:在本部分研究中,我们发现人OSCC组织标本中USP13表达下降,并且下降趋势与患者的临床分期有关。细胞学研究显示,过表达的USP13可抑制细胞的增殖,侵袭转移,葡萄糖的摄取,乳酸的产生,并促进细胞发生凋亡;小鼠体内研究显示,过表达的USP13可抑制肿瘤的生长。此外,过表达的USP13诱导了PTEN的过表达,并抑制AKT的激活以及下游效应物葡萄糖转运蛋白-1（GLUT1）和己糖激酶-2（HK2）的表达。结论:本部分研究结果表明,USP13可通过调控OSCC细胞中的PTEN/AKT信号通路而发挥抑制癌细胞的作用。本研究提供了OSCC研究的新思路,并为OSCC患者的治疗提供了新的靶点。
张瑜[4]（2020）在《lncRNA MAGI2-AS3调控miR-374a-5p/PTEN对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响》文中指出目的探讨lncRNA MAGI2-AS3调控miR-374a-5p/PTEN对口腔鳞癌细胞增值、克隆、周期、侵袭、迁移和凋亡的作用和机制。方法1、qRT-PCR方法测定口腔鳞癌组织以及对应癌旁组织中lncRNA MAGI2反义链RNA3（MAGI2-AS3）表达变化,检测口腔鳞癌细胞CAL-27、SCC15、HSQ-89和正常口腔黏膜细胞h NOK中MAGI2-AS3表达水平;在口腔鳞癌细胞中转染MAGI2-AS3过表达载体,同时转染阴性对照载体,MTT测定细胞增殖,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移。2、生物信息学软件预测MAGI2-AS3靶基因,荧光素酶报告系统鉴定MAGI2-AS3和miR-374a-5p的靶向关系,qRT-PCR方法测定转染MAGI2-AS3过表达载体的口腔鳞癌细胞中miR-374a-5p表达水平。3、qRT-PCR方法测定口腔鳞癌组织以及对应癌旁组织中miR-374a-5p表达变化,检测口腔鳞癌细胞CAL-27、SCC15、HSQ-89和正常口腔黏膜细胞h NOK中miR-374a-5p表达水平;在口腔鳞癌细胞中转染miR-374a-5p mimics和MAGI2-AS3过表达载体,同时转染mimics control,MTT测定细胞增殖,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移。4、生物信息学软件预测miR-374a-5p靶基因,荧光素酶报告系统鉴定miR-374a-5p和第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）的靶向关系,qRT-PCR和Western blot方法测定转染miR-374a-5p mimics的口腔鳞癌细胞中PTEN表达水平。5、qRT-PCR方法测定口腔鳞癌组织以及对应癌旁组织中PTEN表达变化,检测口腔鳞癌细胞CAL-27、SCC15、HSQ-89和正常口腔黏膜细胞h NOK中PTEN表达水平;在口腔鳞癌细胞中转染miR-374a-5p mimics和PTEN过表达载体,同时转染阴性对照载体,MTT测定细胞增殖,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/P双染法检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移。结果1、口腔鳞癌组织中MAGI2-AS3表达水平低于癌旁组织,口腔鳞癌细胞CAL-27、SCC15、HSQ-89中MAGI2-AS3表达水平低于正常口腔黏膜细胞h NOK;与转染阴性对照载体的细胞比较,转染MAGI2-AS3过表达载体的细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力降低,细胞G0/G1期比例升高,细胞凋亡增多。2、MAGI2-AS3靶向抑制口腔鳞癌细胞中miR-374a-5p表达水平。3、口腔鳞癌组织中miR-374a-5p表达水平高于癌旁组织,口腔鳞癌组织中miR-374a-5p和MAGI2-AS3表达呈负相关,口腔鳞癌细胞CAL-27、SCC15、HSQ-89中miR-374a-5p表达水平高于正常口腔黏膜细胞h NOK;与转染mimics control和MAGI2-AS3过表达载体的细胞比较,转染miR-374a-5p mimics和MAGI2-AS3过表达载体的细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力升高,细胞G0/G1期比例降低,细胞凋亡减少。4、miR-374a-5p靶向抑制口腔鳞癌细胞中PTEN表达水平。5、口腔鳞癌组织中PTEN表达水平低于癌旁组织,口腔鳞癌组织中PTEN和MAGI2-AS3表达呈正相关,口腔鳞癌组织中PTEN和miR-374a-5p表达呈负相关,口腔鳞癌细胞CAL-27、SCC15、HSQ-89中PTEN表达水平低于正常口腔黏膜细胞h NOK;与转染miR-374a-5p mimics和阴性对照载体的细胞比较,转染miR-374a-5p mimics和PTEN过表达载体的细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力降低,细胞G0/G1期比例升高,细胞凋亡增多。结论lncRNA MAGI2-AS3调控miR-374a-5p/PTEN抑制口腔鳞癌细胞增殖、克隆、侵袭、迁移,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡。
王小玢[5]（2020）在《microRNA-99a-5p通过靶向FGFR3调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭及转移的功能机制研究》文中研究表明目的:口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）简称口腔鳞癌,多发生于40～60岁成人,男性多于女性,好发部位以舌、颊、牙龈、腭等为主的上皮源性恶性肿瘤。近年来报道,OSCC是口腔颌面部最常见肿瘤,其发病率约占口腔肿瘤的90%,其死亡率约占世界癌症死亡率的第六位。在临床上,OSCC侵犯到患者面部血管、神经等部位时会出现颌面部剧烈疼痛或麻木等症状。严重时甚至会威胁生命,极大地影响患者生活质量。OSCC发病隐匿、病情进展快、恶性程度高、易复发等特点,且大部分患者确诊时已属中、晚期。而且OSCC容易发生淋巴结转移、局部侵袭性很强,因此预后一般都较差。在治疗方面,以手术为主的综合治疗依然是目前最有效的治疗手段。随着相关研究的不断进展,OSCC患者治愈率有所改善,但患者预后仍然较差,给临床治疗带来了很大困难。因此如何实现早期预防、早期诊断、探索OSCC的敏感诊断标记物以及有效治疗的个体化治疗方案,提高临床治愈率及生存率是目前备受关注的问题之一。微小RNA（microRNA,mi RNA）是一种小的非编码的RNA,通过作用于靶基因的mRNA 3′非编码区（3′untranslated region,3′UTR）使得靶基因mRNA表达沉默,在转录后水平上参与基因的表达调控,从而影响mRNA稳定性或干扰蛋白质翻译,进而发挥癌基因或者抑癌基因的作用。大量研究表明miRNA参与肿瘤的演变并发挥着重要的作用,作为抑癌基因或原癌基因参与了肿瘤的发生发展。本研究首先利用TCGA数据库（The Cancer Genome Atlas,TCGA）,结合临床病理资料的生存分析及分层分析,筛选与HNSCC和OSCC生物学行为及预后相关的差异性miRNA;综合生物信息学预测分析和其他研究成果,我们锁定has-microRNA-99a-5p可能作为抑癌基因,分子生物信息学分析其可能通过特异性靶点抑制,在OSCC肿瘤细胞的增殖和侵袭中发挥作用。近年来,有关miRNA-99a-5p可作为抑癌基因抑制多种肿瘤细胞的增殖和侵袭的研究已有一些报道,作为一类新发现的miRNA,其调控机制尚不完全清楚,尤其在OSCC的发病机制中研究尚少。因此,本实验拟对miRNA-99a-5p在OSCC中的表达及相关功能进行研究,并进一步探索其作用的相关分子调控机制,旨在为OSCC寻找敏感的诊断标记物及特异性干预治疗靶点,提高临床诊断治疗水平。研究方法:1、数据收集,通过数据库网站下载HNSCC患者相关临床病例资料（https://portal.gdc.cancer.gov/）。利用编程软件R语言对下载数据资料进行系统整理和统计学分析。通过Active Perl、R和RStudio软件进行miRNA表达谱分析,经过单因素、多因素Cox回归分析筛选差异表达miRNA。2、利用Kaplan-Meier和ROC曲线分析（ROC curve analysis）方法进行生存分析,并建立判断预后的风险模型;同时利用DAVID在线工具对选定的差异表达miRNA进行生物信息学功能注释与通路分析预测;miRanda、TargetScan7.1、picTar网络数据库软件进行靶基因靶点的分析和分子通路预测。3、实时定量荧光PCR技术检测口腔鳞癌组织和体外细胞miR-99a-5p基因的表达。利用CCK-8方法、划痕及Transwell实验,来观察miR-99a-5p在OSCC细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用。4、结合数据库和网站预测miR-99a-5p可能与FGFR3存在靶向结合位点,进一步通过双荧光素酶报告证实FGFR3与miR-99a-5p之间的靶向关系。利用real time PCR和western blot检测FGFR3在正常口腔角质细胞系和不同的口腔鳞癌细胞系中在mRNA和蛋白表达水平的差异。利用CCK-8、划痕及Transwell实验检测FGFR3的敲低对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,进一步证明miR-99a-5p能够介导FGFR3对OSCC的生物学性能产生影响。5、统计学分析:实验结果及数据分析利用版本SPSS 22.0（SPSS Inc.,Chicago,IL,USA）软件进行统计分析,P<0.05表示组间比较统计学上有差异。结果:1、基于TCGA数据库分析结果,我们发现三个特异性差异表达miRNA（hsamiR-99a（P=0.0078）、hsa-miR-499a（P=0.0023）、hsa-miR-1911（P=0.0304））,它们为HNSCC患者生存显着相关的独立风险因素。2、miRNA signature risk score的生存分析结果显示hsa-miR-499a和hsa-miR-1911系数为正,表明其高表达与短生存及不良预后相关;而hsa-mi R-99a系数为负,表明其高表达与长生存及好的预后相关。作为保护因素的hsa-miR-99a在低风险组中的表达高,而作为危险因素的hsa-miR-499a和hsa-miR-1911在高风险组中表达高。3、KEGG和GO分析提示HNSCC可能与多个分子信号通路相关。其中JAKSTAT信号通路、酪氨酸代谢等代谢途径及激素相关蛋白基因的变化可能与HNSCC的密切相关。4、miR-99a-5p在OSCC组织中为低表达,与癌旁正常组织相比,其相对表达量下调0.46倍（**P<0.01）。5、miR-99a-5p在四种OSCC细胞系CAL-27、Tca8113、HSC-3、SCC-4中的表达水平显着低于正常人口腔角质细胞株HOK细胞。其相对表达量分别是人正常口腔角质细胞系HOK的0.48倍、0.30倍、0.16倍和0.19倍,显着下调（**P<0.01）。6、miR-99a-5p mimics过载后能够明显降低OSCC的侵袭和迁移功能（*P<0.05）,对细胞增殖的无明显影响（P>0.05）。7、生物信息学预测结果提示:FGFR3基因的3′UTR区与miR-99a-5p存在靶向结合位点,FGFR3可能是miR-99a-5p直接作用的重要靶分子。8、FGFR mRNA和FGFR3蛋白表达量在OSCC细胞系CAL-27和Tca8113中明显高于正常人口腔角质细胞。9、Pearson correlation相关分析显示FGFR3的表达水平与miR-99a-5p的表达水平呈负相关,miR-99a-5p mimics过载后能够明显下调FGFR3。10、双荧光素酶实验进一步证实miR-99a-5p与下游FGFR3存在靶基因结合位点。11、miR-99a-5p能够负向调控FGFR3,靶向敲减FGFR3后,OSCC的增殖、转移和侵袭功能均下降。上述结果提示miR-99a-5p通过靶向FGFR3调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭及转移功能这一分子学机制。结论:1、基于TCGA数据库生物信息学分析及实验结果,我们发现miR-99a-5p作为OSCC特异性表达miRNA之一,在肿瘤中低表达,是生存相关的独立风险因素;miR-99a-5p具有降低OSCC细胞的侵袭和迁移功能,提示具有潜在的抑制侵袭转移能力。2、双荧光素酶实验证实miR-99a-5p与下游FGFR3存在靶基因结合位点;miR-99a-5p mimics过载后能够明显下调FGFR3;miR-99a-5p能够负向调控FGFR3,靶向敲减FGFR3后,OSCC的增殖、转移和侵袭功能均下降。综上结果提示microRNA-99a-5p通过靶向FGFR3调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭及转移这一分子机制。
仇永乐[6]（2019）在《人口腔鳞状细胞癌差异表达lncRNA转录组学分析及相关功能验证》文中指出口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）的侵袭性强,死亡率较高。虽然OSCC的诊治已取得很突出的成绩,但是中晚期患者生存质量仍然很差。为了扩展OSCC的治疗手段和提高OSCC患者的生存期,探索OSCC发病的分子机制、寻找诊断及预后的生物标志物以及治疗靶点的研究是目前亟待解决的课题。近些年,基因组微阵列以及全基因组测序技术的进步,提供了基因的基因组学证据,利于从整体的角度全面研究基因。研究者发现非编码RNA在机体生长、发育及病理方面发挥了重要作用,尤其是长链非编码RN A（long non-coding RNA,LncRNA）调控着恶性肿瘤的发病、转移以及复发,甚至参与了肿瘤的耐药。因此,有必要深入探讨lncRNA在OSCC发病过程中的作用机制。为此,我们应用lncRNA表达谱芯片对OSCC和对应正常组织样本中的lncRNA进行筛选,以期发现OSCC中差异表达的lncRNA;根据构建差异表达基因的共表达网络,发掘OSCC发病过程中节点lncRNA,分析其与OSCC临床病理资料的关系;选取共表达网络中的lncRNA进行细胞功能实验,观察其对OSCC细胞的增殖、侵袭、凋亡等生物学行为的影响,并初步研究其可能机制。本次研究将有助于揭示OSCC的发病机制,同时也为OSCC的诊断、预后的生物标志物及靶向治疗药物的寻找与开发提供实验基础。第一部分 人口腔鳞状细胞癌lncRNA差异表达谱的筛选及验证目的:为探讨口腔鳞癌中lncRNA的表达情况,本实验应用lncRNA表达谱芯片检测口腔鳞癌中的lncRNA表达谱,明确lncRNAs和mRNAs在口腔鳞癌与正常组织中的表达是否存在差异。方法:提取3例口腔鳞癌患者的肿瘤组织和正常组织中的RNA,应用lnc RNA表达谱芯片构建口腔鳞癌中lnc RNA及m RNA差异表达谱,建立差异表达的lnc RNAs及m RNAs共表达网络。通过GO分析及KEGG富集分析,预测差异表达lnc RNAs的生物学功能。利用cis和trans调控,预测差异表达lnc RNAs的靶基因。选取部分差异表达的lnc RNAs,应用qRT-PCR验证芯片结果。结果:1.芯片筛选出2294条差异表达lnc RNAs（上调lnc RNAs为933条,下调lnc RNAs为1361条）;1938条差异表达m RNAs（上调m RNAs为891条,下调m RNAs为1047条）。2.GO分析显示,差异表达基因分别在分子功能（MF）、生物过程（BP）和细胞成分（CC）中富集。其中,富集度排名前三位的是interleukin-1binding（GO:0019966;Ontology:molecular function;P=0.0003）、response to interferon-alpha（GO:0035455;Ontology:biological process;P=1.37E-10）、establishment of epithelial cell apical/basal polarity（GO:0045198;Ontology:biological process;P=0.0003）。KEGG通路分析显示,差异表达的m RNAs主要富集在38个生物学通路中。其中,很多通路与癌症相关,如“pathways in cancer”（富含36个差异表达基因）,“bladder cancer”（富含8个差异表达基因）,“metabolic pathways”（富含109个差异表达基因）、“pancreatic cancer”（富含11个差异表达基因）和“PPAR signaling pathway”（富含11个差异表达基因）。3.靶基因预测结果表明,1470个差异表达的lnc RNAs具有cis或trans调控靶基因。其中,1356个lnc RNAs作用于1250个cis靶基因,370个lnc RNAs作用于2454个trans靶基因,256个lnc RNAs既作用于cis靶基因又作用于trans靶基因。4.通过构建差异表达lnc RNAs和m RNAs的共表达网络,发现306个lnc RNAs与其他m RNAs和lnc RNAs发生着相互作用,其中TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1为发生相互作用最多的基因,是整个网络的节点基因。5.选取10个差异表达的lnc RNAs,在72例口腔鳞癌及正常组织中进行qRT-PCR验证。结果显示,在口腔鳞癌中lnc-MANSC4-8:1、CXCR2P1、NRIR、lnc-CMPK2-1:3和lnc-GLI3-4:1显着上调,而TMPRSS11BNL、MEG3、lnc-WRN-10:1、DANCR和lnc-TPP2-7:2显着下调,说明验证结果和芯片结果一致。小结:1.实验筛选出2294条差异表达lnc RNAs和1938条差异表达m RNAs,下调表达基因多于上调表达基因。2.Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1是共表达网络的节点基因。3.qRT-PCR验证结果与芯片结果相一致,说明芯片结果可靠。第二部分 人口腔鳞状细胞癌中长链非编码RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1的表达及意义目的:研究lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1在口腔鳞癌和正常组织中的差异表达,分析其表达水平与口腔鳞癌临床病理特征之间的关系。方法:收集2015年01月-2016年10月在河北医大四院手术切除的72例患者的口腔鳞癌及对应正常组织,采用qRT-PCR方法检测lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1的表达水平,分析其表达水平与临床病理特征及患者预后之间的关系。采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析,计量资料采用t检验,计数资料采用卡方检验,生存分析采用Kaplan-Meier方法并进行Log-rank检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1在口腔鳞癌中低表达。2.Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1表达水平与口腔鳞癌患者的年龄、性别、吸烟、肿瘤位置无关,与患者临床分期、淋巴结转移、远处转移和生存状态有关。3.Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1低表达的口腔鳞癌患者有着较短的无进展生存时间和总生存时间。小结:Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1在口腔鳞癌组织中低表达,并与患者临床分期、淋巴结转移、远处转移和生存状态有关。Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1低表达的口腔鳞癌患者有着较短的无进展生存时间和总生存时间。第三部分 长链非编码RNA MEG3对口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞生物学功能的影响目的:探讨lnc RNA MEG3对口腔鳞癌Tca8113细胞生物学功能的影响。方法:利用脂质体转染技术使lnc RNA MEG3在口腔鳞癌Tca8113细胞中过表达,通过MTT、Transwell迁移和侵袭实验、流式细胞技术测定口腔鳞癌Tca8113细胞增殖、迁移和侵袭、凋亡的变化。借助Western blot和qRT-PCR观察lnc RNA MEG3过表达对p53蛋白表达的影响。结果:1.Lnc RNA MEG3在口腔鳞癌Tca8113细胞中低表达。2.Lnc RNA MEG3过表达,可以显着抑制口腔鳞癌Tca8113细胞的增殖、迁移和侵袭的能力,诱导细胞凋亡,并促进p53蛋白的表达。小结:Lnc RNA MEG3在口腔鳞癌Tca8113细胞中过表达,可以显着抑制口腔鳞癌Tca8113细胞的生物学行为。结论:1.芯片筛选出2294条差异表达lnc RNAs和1938条差异表达m RNAs。下调表达基因多于上调表达基因,说明下调表达基因可能在口腔鳞癌发病过程中发挥更为重要作用。2.qRT-PCR验证结果与芯片结果相一致,提示芯片结果可靠。3.Lnc RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1可能是口腔鳞癌发病过程中关键节点基因,并与患者临床分期、淋巴结转移、远处转移和生存状态密切相关。4.Lnc RNA MEG3发挥着抑癌基因的作用,可以显着抑制口腔鳞癌Tca8113细胞的生物学活性。
贾玉保[7]（2019）在《bFGF/FGFR2及凋亡相关基因P53、BCL-2表达在口腔扁平苔藓癌变中的作用》文中研究指明目的:口腔扁平苔藓（Oral Lichen Planus,OLP）是一种慢性黏膜皮肤炎症性疾病,OLP的病变具有一定的复发性,尽管过去几年来曾多次尝试过阐明OLP的病因和发病机制,但是至今这种疾病的发病机制尚不清楚,关于其发病病因和机制仍在研究。OLP有一定的癌变潜能,它已经被世界卫生组织（WHO）列为癌前状态。关于口腔扁平苔藓癌变的发病机制已经受到越来越多学者的关注。近年来,国内外关于口腔扁平苔藓癌变的病因尚无定论,一直处于探索中。为探索bFGF/FGFR2、BCL-2、P53在口腔扁平苔藓癌变过程中的重要作用,本实验采用组织芯片法和免疫组织化学法研究正常口腔黏膜组织、口腔扁平苔藓组织和口腔鳞癌组织中bFGF/FGFR2、BCL-2、P53蛋白的表达情况,检测bFGF/FGFR2、BCL-2、P53在这三种不同组织中的表达差异,探讨bFGF/FGFR2、BCL-2、P53与口腔扁平苔藓发生癌变的关系。方法:本研究利用组织芯片法结合免疫组织化学法检测正常口腔黏膜组织,口腔扁平苔藓组织,口腔鳞癌组织中bFGF/FGFR2、BCL-2、P53在组织中的表达情况。通过计算染色细胞比例和染色强度,使用半定量积分法来比较bFGF/FGFR2、BCL-2、P53因子在不同组织中的表达水平差异,并对结果进行统计学方法进行分析,对比差异性。结果:免疫组化实验染色结果显示:1.bFGF在口腔鳞癌中的表达均高于口腔扁平苔藓和正常口腔黏膜中的表达,三者差异有统计学意义（P<0.05）,糜烂型和非糜烂型OLP有统计学差异。2.FGFR2在口腔鳞癌中的表达均高于口腔扁平苔藓和正常口腔黏膜中的表达,三者差异有统计学意义（P<0.05）,糜烂型和非糜烂型OLP无统计学差异。3.BCL-2在正常口腔黏膜,口腔扁平苔藓,口腔鳞癌的表达依次增高,三者差异有统计学意义（P<0.05）,糜烂型和非糜烂型OLP无统计学差异。4.P53在正常口腔黏膜,口腔扁平苔藓,口腔鳞癌的表达依次增高,三者差异有统计学意义（P<0.05）,糜烂型和非糜烂型OLP有统计学差异。结论:bFGF/FGFR2、BCL-2、P53在正常口腔黏膜,口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中的表达依次增加,提示bFGF/FGFR2、BCL-2、P53可能参与了口腔扁平苔藓癌变为口腔鳞癌的过程,与口腔扁平苔藓癌变有着密切的关系,并起到重要的作用,它们可能成为口腔扁平苔藓发生癌变的早期生物学标志物。
王伟[8]（2019）在《miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达及对口腔鳞癌细胞株CAL-27功能影响的研究》文中研究指明第一部分miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达目的:采用实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR）技术检测miRNA-197在口腔鳞癌组织与正常口腔粘膜组织中的表达量,分析探讨miRNA-197与口腔鳞癌发生、发展及淋巴结转移的关系。方法:1采用q RT-PCR技术检测miRNA-197在口腔鳞癌及正常口腔粘膜组织中的表达水平,其中男性患者22例,女性患者14例,年龄在40-76岁,中位数年龄65岁。伴有颈部淋巴结转移患者16例,设置为淋巴结转移组;未发生颈部淋巴结转移患者20例,设置为非淋巴结转移组。2统计学分析采用SPSS21.0统计软件,应用独立样本配对t检验与两组独立样本比较的t检验,对比分析各组实验数据之间的差异,取P<0.05,认为差异有统计学意义。结果:1 miRNA-197在口腔鳞癌组织和正常口腔黏膜组织中的表达量分别为14.06±0.33、13.13±0.38,miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达量高于正常口腔粘膜组织,差异有统计学意义（P<0.05）。2 miRNA-197在淋巴结转移组和非淋巴结转移组口腔鳞癌组织中的表达量分别为15.30±1.21、13.07±1.94,miRNA-197在淋巴结转移组中的表达量高于非淋巴结转移组,差异有统计学意义（P<0.05）。小结:miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达高于正常口腔粘膜组织,其表达量与颈淋巴结转移呈正相关,推测miRNA-197在口腔鳞癌中可能起促癌基因的作用,并参与了口腔鳞癌的发生、发展及转移过程。第二部分miRNA-197对口腔鳞癌细胞株CAL-27功能的影响目的:体外细胞模型研究miRNA-197对口腔鳞癌细胞株CAL-27增殖、迁移功能的影响,为探讨miRNA-197在口腔鳞癌发生发展过程中的分子机制奠定一定的理论基础。方法:1选用口腔鳞癌CAL-27细胞株进行复苏、培养、传代。2将合成的miRNA-197抑制物与阴性对照物（inhibitor/NC）转染至CAL-27中设置为实验组与阴性对照组;同时设置未做任何处理的空白对照组。3 MTS比色分析法对比检测0h、24h、48h、72h、96h时段的OD值,绘制细胞生长曲线。4细胞克隆实验对比检测实验组、阴性对照组与空白对照组的CAL-27细胞集落形成情况。5 Transwell细胞迁移实验对比检测实验组、阴性对照组与空白对照组的CAL-27细胞迁移能力。6应用SPSS21.0软件对数据进行统计分析,数据以均数±标准差表示。两组间配对样本选择t检验,两组间独立样本采用Mann-Whitney检验。结果:1转染24h后,口腔鳞癌细胞实验组、阴性对照组与空白对照组中mi RNA-197的表达量分别为12.65±0.24、14.85±0.07、14.51±0.08,差异有统计学意义（P﹤0.05）。2在MTS实验48h后,实验组、阴性对照组及空白对照组的OD值分别为0.44±0.04、0.56±0.03、0.58±0.01,差异有统计学意义（P﹤0.05）。3在细胞克隆形成实验中,实验组、阴性对照组及空白对照组的细胞克隆形成率分别为3.97±0.26%、7.50±0.42%和7.78±0.21%,差异有统计学意义（P﹤0.05）。4在细胞迁移实验中,实验组、阴性对照组及空白对照组的迁移细胞数分别为115.33±3.68、163.67±4.01和167.33±5.3,差异有统计学意义（P﹤0.05）。小结:下调miRNA-197在口腔鳞癌细胞CAL-27中的表达可抑制其增殖和迁移功能,推测miRNA-197在口腔鳞癌的增殖和迁移过程中可能作为促癌基因发挥作用,有望成为口腔鳞癌治疗的新的潜在靶点。结论:口腔鳞癌组织中的miRNA-197的表达普遍上调,尤其在淋巴结转移组表达上调现象尤为明显,并且调控其表达量能够影响口腔鳞癌细胞CAl-27增殖、迁移等生物学行为。推测miRNA-197可能作为促癌基因在口腔鳞癌发生、发展和迁移过程中发挥作用,并可能成为口腔鳞癌诊断、治疗新的生物学标志物。
吴训[9]（2016）在《COX-2和SPARC在口腔鳞癌中表达的研究》文中研究表明口腔颌面-头颈鳞状细胞癌（Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC/Squamous Cell Carcinoma of the Head and Neck,HNSCC）占成人恶性肿瘤的8%[1],口腔颌面-头颈部肿瘤占全身恶性肿瘤的6.6%,而这其中鳞状细胞癌又占到55.8%,口腔和下咽部为高发部位（20.9%）,并呈逐年递增的趋势[2]。2015年中国约有新发浸润性癌病例数429.2万,有281.4万癌症死亡病例,其中,唇、口腔、咽癌年新发病例4.81万,年死亡病例2.21万[3]。几乎22%的全球新发癌症病例出现在中国,27%的癌症死亡病例在中国[3]。OSCC大多临近重要的组织器官,使手术的范围受到严重的制约,而且由于头颈颌面组织血管、淋巴管丰富以及舌的频繁机械运动,常发生早期颈淋巴结转移,预后较差,死亡率高达50%[1],严重威胁着人们的生命健康。尽管肿瘤综合治疗的不断发展,口腔鳞癌的治疗取得了一定的进步,但是近20年,五年生存率没有明显改善。由于口腔颌面-头颈鳞状细胞癌患者总体生存率很低,其发病相关的分子机制尚未明确,关于它的诊断与治疗始终是恶性肿瘤治疗领域的研究热点。尽管众多与肿瘤发生发展相关的生物标志在多项前瞻性研究和Meta分析中得到反复确证,但仍缺乏足够的证据支持临床应用,因此,与OSCC/HNSCC发生发展相关的分子标志的研究仍需不断的探索。初步研究显示,环氧化酶-2（Cyclooxygenases,COX-2）与富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine,SPARC）在OSCC/HNSCC组织中上调明显,提示其与OSCC/HNSCC发生和发展可能有相关性,可能是OSCC/HNSCC复发、转移和治疗指导方面有价值的关键节点基因[4-6]。目的:检测SPARC和COX-2基因在口腔鳞状细胞癌、癌旁、淋巴结以及正常组织中的表达,研究它们在肿瘤发生发展过程中的可能作用机制以及相互关系;对SPARC和COX-2的甲基化情况进行初步的探讨,验证甲基化修饰水平是否能够调控SPARC和COX-2在口腔鳞癌中的表达。方法:应用免疫组织化学、蛋白质免疫印迹、实时定量聚合酶链反应技术检测SPARC和COX-2基因在口腔鳞状细胞癌、癌旁、淋巴结以及正常组织中的表达。甲基化特异性PCR（MSP）检测上述样本中这两个基因的甲基化状态。统计学方法分析上述实验结果。结果:1.免疫组化显示COX-2在癌组织高表达,在正常组织中几乎无表达;其表达含量随肿瘤分化程度降低而逐渐增高,与肿瘤的临床分期、病理分级、淋巴结转移存在明显正相关性。COX-2m RNA的表达量在癌、癌旁、转移淋巴结组织标本中均高于正常粘膜组织,其中在癌组织的表达量最高（P<0.01）;除Ⅳ区与Ⅴ区淋巴结组织中COX-2m RNA的表达量相比不具有统计学意义以外,其余各组间COX-2m RNA的表达均具有明显统计学意义（P<0.01）。2.免疫组化显示SPARC在正常粘膜和癌旁组织呈现高表达,在癌组织中呈低表达或不表达。其表达与肿瘤分化程度和淋巴结转移呈负相关。与正常粘膜组的SPARC m RNA表达量相比,除癌旁组织和Ⅴ区淋巴结不具有统计学意义以外,其余各组表达均低于正常粘膜组织（P<0.05）。3.Western blot发现COX-2和SPARC在正常组织、癌旁组织、口腔鳞癌和淋巴结组织中有不同程度的表达,且蛋白表达水平与二者m RNA表达趋势一致。4.COX-2m RNA和SPARCm RNA的相对表达量在口腔癌组织、癌旁组织、颈部Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ区淋巴结中表现为显着的负相关性P=0.000。5.在头颈鳞癌多个细胞系中COX-2的表达强烈,SPARC表达沉默或低下,二者表达趋势与所测癌组织中表达结果一致。6.在OSCC组织样本中,在癌组织,淋巴结组织中SPARC基因启动子均出现了高甲基化,而COX-2基因启动子则出现非甲基化状态。在正常组织中,COX-2基因启动子则出现高甲基化,SPARC基因启动子则表现出了非甲基化状态。在癌旁组织中,COX-2和SPARC均表现为非甲基化。7.在头颈肿瘤Scc-9、Scc-25、Tca8113、HN13多个细胞系均发现SPARC基因启动子区出现甲基化修饰,而COX-2基因启动子区无甲基化条带。在正常上皮细胞系h OMK则发现COX-2甲基化和SPARC非甲基化。8.在舌癌细胞株中COX-2基因启动子23个Cp G岛仅有36个位点出现甲基化,甲基化率不足10%;SPARC的17个Cp G岛全部出现甲基化修饰。去甲基化处理后,SPARCm RNA的表达出现明显上调（P=0.000）;COX-2m RNA的表达无明显变化,组间比较无统计学差异（P=0.064）。9.COX-2和SPARC蛋白表达状态与启动子区甲基化均存在着负相关关系,P=0.000。结论:1、COX-2在口腔鳞状细胞癌中高表达,与临床TNM分期的密切相关,可能是口腔鳞状细胞癌的促进因子。2、SPARC在口腔鳞状细胞癌中低表达,其表达缺失与临床TNM分期关系密切,可能是口腔鳞状细胞癌的抑制因子,可以作为口腔鳞状细胞癌诊断的分子生物学标志物。3、癌组织中SPARC启动子区甲基化和COX-2启动子区去甲基化是引起二者蛋白表达及m RNA表达异常的重要原因。4、COX-2和SPARC的表达沿纵形淋巴链呈梯度变化,且它们的表达存在着负相关关系,二者在OSCC的发生发展过程中可能存在着某种拮抗作用。
李善昌,赵聪,姜炳华,闫磊,宁尚波,沈柏芳[10]（2015）在《PI3K与PTEN蛋白在口腔鳞癌中的表达及相关性研究》文中提出目的探讨口腔鳞癌中PTEN、PI3K的表达情况,并对其表达水平与临床特征之间的关系进行相关性分析,探讨其与口腔鳞癌发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化SP法对52例口腔鳞癌石蜡标本及20例癌旁正常组织中PTEN、PI3K蛋白的表达情况进行研究,分析其与临床病理特征的关系。结果 PTEN在口腔鳞癌中表达明显低于癌旁正常组织。PI3K表达明显高于癌旁正常组织。PTEN与PI3K表达与细胞分化、临床分期、淋巴结转移相关。PTEN与PI3K阳性表达之间呈负相关。结论 PI3K在口腔鳞癌中的表达上调,PTEN在口腔鳞癌中的表达下调。PTEN与PI3K蛋白表达呈负相关。
二、抑癌基因PTEN在口腔鳞癌中的表达及其意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、抑癌基因PTEN在口腔鳞癌中的表达及其意义（论文提纲范文）
（1）人舌鳞癌中PTEN、STING、IRF3的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢词 |
| 附录 |
| 附录 A:中英文缩略词对照表 |
| 附录 B:个人简历及已发表论文 |
| 附录 C:综述 PTEN 在肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
（2）ACTN-4基因在口腔鳞状细胞癌表达及对SCC15细胞凋亡的影响研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 ACTN-4 基因在口腔鳞状细胞癌表达 |
| 2.1.1 qPCR结果 |
| 2.1.2 HE染色及免疫组化结果 |
| 2.2 ACTN-4对SCC15 细胞的影响 |
| 2.2.1 转染效果 |
| 2.2.2 si-ACTN-4对SCC15 细胞增殖的影响 |
| 2.2.3 si-ACTN-4对SCC15 细胞凋亡的影响 |
| 2.2.4 si-ACTN-4对SCC15 细胞凋亡相关蛋白及PI3K/AKT信号通路的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）USP13在口腔鳞癌中的作用及其分子机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 1 前言 |
| 第一部分 :USP13在口腔鳞癌中的表达及与预后的相关性分析 |
| 1 主要试剂、材料与仪器设备 |
| 1.1 试剂 |
| 1.2 仪器设备 |
| 1.3 临床病例 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 总RNA的提取 |
| 2.2 q RT-PCR检测USP13 m RNA表达水平 |
| 2.3 免疫组织化学分析 |
| 2.4 统计学分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 本研究收集的OSCC患者基线特征 |
| 3.2 OSCC中 USP13 表达变化 |
| 3.3 在OSCC中 USP13 表达水平与患者年龄的关系 |
| 3.4 在OSCC中 USP13 表达水平与患者性别的关系 |
| 3.5 在OSCC中 USP13 表达水平与患者肿瘤分化程度的关系 |
| 3.6 在OSCC中 USP13 表达水平与患者肿瘤TNM分期的关系 |
| 3.7 在OSCC中 USP13 表达水平与患者吸烟及饮酒的关系 |
| 3.8 在OSCC中 USP13 表达水平与患者预后的关系 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 USP13 表达水平对OSCC生理功能影响的机制研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要试剂和仪器 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 人USP13过表达慢病毒载体的构建 |
| 1.2.3 USP13-p LVX慢病毒包装 |
| 1.2.4 稳定过表达USP13的口腔鳞癌细胞系的筛选 |
| 1.2.5 人USP13基因慢病毒载体的构建 |
| 1.2.6 sh RNA USP13 干扰慢病毒的包装 |
| 1.2.7 sh RNA USP13 干扰片段的筛选 |
| 1.2.8 MTT检测细胞增殖能力 |
| 1.2.9 2-NBDG葡萄糖摄取实验 |
| 1.2.10 乳酸测定 |
| 1.2.11 流式细胞术检测细胞的凋亡 |
| 1.2.12 Transwell细胞迁移实验 |
| 1.2.13 Transwell侵袭实验 |
| 1.2.14 裸鼠成瘤实验 |
| 1.2.15 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同细胞系USP13表达的比较 |
| 2.2 构建并验证人USP13的干扰慢病毒转染效率 |
| 2.3 构建人USP13的过表达慢病毒的转染效率 |
| 2.4 USP13对OSCC细胞增殖的影响 |
| 2.5 USP13 过表达抑制OSCC细胞的糖酵解 |
| 2.6 PTEN/AKT通路参与了USP13在OSCC细胞中的生物学功能 |
| 2.7 USP13 促进CAL27 细胞凋亡的影响 |
| 2.8 过表达USP13 表达对CAL27 细胞侵袭、转移的的影响 |
| 2.9 USP13对OSCC肿瘤细胞生长的抑制 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）lncRNA MAGI2-AS3调控miR-374a-5p/PTEN对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 lncRNA 在肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在校科研成绩 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）microRNA-99a-5p通过靶向FGFR3调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭及转移的功能机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 :基于TCGA数据库头颈鳞癌miRNA标志物的筛选及生物学功能预测分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 数据下载 |
| 2.2 差异表达miRNA筛选 |
| 2.3 Kaplan-Meier生存分析和ROC曲线分析 |
| 2.4 GO功能富集分析和KEGG信号通路分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 HNSCC预后相关表达谱分析及差异性miRNA筛选 |
| 3.1.1 临床病理资料 |
| 3.1.2 差异性miRNA的筛选和风险因素分析 |
| 3.2 差异表达三种miRNA的 Kaplan-Meier生存分析和ROC曲线分析 |
| 3.2.1 miR-99a、miR-499a、miR-1911 的生存分析和ROC曲线分析 |
| 3.2.2 miRNA signature risk score的生存分析 |
| 3.3 差异表达miRNA相关的分子信号通路的生物信息学分析及功能预测 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二部分 :microRNA-99a-5p在口腔鳞状细胞癌中的表达及生物学功能研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 临床组织标本收集 |
| 2.1.2 细胞株来源及组织来源 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 实验设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养、传代、冻存、复苏 |
| 2.2.2 Trizol法提取组织标本总RNA |
| 2.2.3 细胞RNA提取 |
| 2.2.4 qRT-PCR检测miRNA的表达水平 |
| 2.2.5 Lipofectamine2000 介导的瞬间细胞转染 |
| 2.2.6 CCK-8细胞增殖实验 |
| 2.2.7 划痕愈合实验 |
| 2.2.8 Transwell实验 |
| 2.3 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 miRNA-99a-5p在口腔鳞癌组织中的表达 |
| 3.2 miRNA-99a-5p在口腔鳞癌细胞系中的表达 |
| 3.3 细胞转染实验 |
| 3.4 miR-99a-5p对口腔鳞癌细胞增殖水平的影响 |
| 3.5 miR-99a-5p对口腔鳞癌细胞迁移能力的影响 |
| 3.6 miR-99a-5p对口腔鳞癌细胞侵袭能力的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分 :microRNA-99a-5p通过靶向FGFR3 调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭及迁移的分子机制研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞系来源 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 实验设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 miR-99a-5p靶基因预测 |
| 2.2.3 荧光素酶活性检测报告 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法 |
| 2.2.5 Western Blot方法 |
| 2.2.6 靶向敲减FGFR3的si RNA转染细胞 |
| 2.3 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 生物信息学分析预测miR-99a-5p靶基因 |
| 3.2 FGFR3在口腔鳞癌细胞中的表达水平 |
| 3.2.1 实时荧光定量PCR检测口腔鳞癌细胞中FGFR3m RNA的表达 |
| 3.2.2 Western blot检测口腔鳞癌细胞中FGFR3 蛋白的表达 |
| 3.2.3 口腔鳞癌细胞中miR-99a-5p与 FGFR3 的表达相关性分析 |
| 3.3 双荧光素酶活性检测实验验证miR-99a-5p与FGFR33′UTR结合情况 |
| 3.4 过表达miR-99a-5p对 OSCC细胞表达FGFR3 的影响 |
| 3.4.1 过表达miR-99a-5p对 CAL-27、Tca8113 细胞中FGFR3m RNA的影响 |
| 3.4.2 过表达miR-99a-5p对 CAL-27、Tca8113 细胞中FGFR3 蛋白的影响 |
| 3.5 FGFR3对OSCC细胞功能影响 |
| 3.5.1 FGFR3-siRNA转染效率的检测 |
| 3.5.2 siFGFR3对OSCC细胞增殖水平的影响 |
| 3.5.3 si-FGFR3 对口腔鳞癌细胞迁移能力的影响 |
| 3.5.4 si-FGFR3 对口腔鳞癌细胞侵袭能力的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）人口腔鳞状细胞癌差异表达lncRNA转录组学分析及相关功能验证（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 人口腔鳞状细胞癌lncRNA差异表达谱的筛选及验证 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 人口腔鳞状细胞癌中长链非编码RNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1的表达及意义 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 长链非编码RNA MEG3对口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞生物学功能的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 长链非编码RNA与恶性肿瘤关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）bFGF/FGFR2及凋亡相关基因P53、BCL-2表达在口腔扁平苔藓癌变中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 口腔扁平苔藓癌变相关基因蛋白研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达及对口腔鳞癌细胞株CAL-27功能影响的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 miRNA-197对口腔鳞癌细胞株CAL-27功能的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 miRNA及其与口腔鳞癌关系的研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）COX-2和SPARC在口腔鳞癌中表达的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 标本收集与标本库的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 COX-2 与SPARC在口腔鳞状细胞癌中的表达与临床病理特征的相关性研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 主要材料 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 实验耗材 |
| 1.5 实验用主要试剂的配置 |
| 1.6 实验用器械的处理 |
| 1.7 实验方法 |
| 1.8 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 免疫组化检测结果 |
| 2.2 实时荧光定量 PCR 检测结果 |
| 2.3 Western Blot 检测结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三部分 口腔鳞状细胞癌中COX-2、SPARC的DNA甲基化修饰研究 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文 |
（10）PI3K与PTEN蛋白在口腔鳞癌中的表达及相关性研究（论文提纲范文）
| 材料和方法 |
| 1．材料 |
| 2．实验试剂 |
| 3．免疫组化检测 |
| 4．结果判定 |
| 5．统计学分析 |
| 结果 |
| 1.PI3K在口腔鳞癌组织中的表达 |
| 2.PI3K的表达与临床病理的关系 |
| 3.PTEN在口腔鳞癌组织中的表达情况 |
| 4.PTEN的表达与口腔鳞癌临床病理的关系 |
| 讨论 |
四、抑癌基因PTEN在口腔鳞癌中的表达及其意义（论文参考文献）
- [1]人舌鳞癌中PTEN、STING、IRF3的表达及临床意义[D]. 王晶. 蚌埠医学院, 2021(01)
- [2]ACTN-4基因在口腔鳞状细胞癌表达及对SCC15细胞凋亡的影响研究[D]. 孙婉芬. 山西医科大学, 2020(10)
- [3]USP13在口腔鳞癌中的作用及其分子机制[D]. 屈直. 中国医科大学, 2020(01)
- [4]lncRNA MAGI2-AS3调控miR-374a-5p/PTEN对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响[D]. 张瑜. 锦州医科大学, 2020(05)
- [5]microRNA-99a-5p通过靶向FGFR3调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭及转移的功能机制研究[D]. 王小玢. 中国医科大学, 2020(01)
- [6]人口腔鳞状细胞癌差异表达lncRNA转录组学分析及相关功能验证[D]. 仇永乐. 河北医科大学, 2019(01)
- [7]bFGF/FGFR2及凋亡相关基因P53、BCL-2表达在口腔扁平苔藓癌变中的作用[D]. 贾玉保. 河北医科大学, 2019(01)
- [8]miRNA-197在口腔鳞癌组织中的表达及对口腔鳞癌细胞株CAL-27功能影响的研究[D]. 王伟. 河北医科大学, 2019(01)
- [9]COX-2和SPARC在口腔鳞癌中表达的研究[D]. 吴训. 广西医科大学, 2016(11)
- [10]PI3K与PTEN蛋白在口腔鳞癌中的表达及相关性研究[J]. 李善昌,赵聪,姜炳华,闫磊,宁尚波,沈柏芳. 北京口腔医学, 2015(03)