肝素亲和柱在乳铁蛋白检测中的应用优化

肝素亲和柱在乳铁蛋白检测中的应用优化

论文摘要

乳铁蛋白是一种极具营养价值的活性糖蛋白,广泛应用到婴幼儿乳粉中,目前国内外未建立乳铁蛋白测定相关的标准。将肝素亲和柱(HiTrap TM Heparin HP柱)或相当者应用到乳铁蛋白检测前处理的净化过程中,建立一种高效、便捷的食品中乳铁蛋白测定的分析方法。试样中的乳铁蛋白经磷酸氢二钠溶液(0.20 mol/L,p H=8.00±0.5)提取,提取液经肝素亲和柱净化后,用磷酸氢二钠溶液淋洗,磷酸氢二钠-氯化钠溶液洗脱,并定容至3.0 mL。采用反相高效液相色谱柱分离,以紫外或者二极管阵列检测器于280 nm处检测,外标法定量。该方法系首次提出将肝素亲和柱应用到乳铁蛋白检测前处理过程中。该检测方法适合检测机构或乳品企业日常样品中乳铁蛋白的检测。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试剂与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 肝素亲和柱的应用比较
  •     1.2.2 肝素亲和柱承载量的测定
  •     1.2.3 磷酸盐浓度的优化
  •     1.2.4 磷酸盐pH值的优化
  •     1.2.5 洗脱液盐浓度的优化
  •     1.2.6 洗脱液pH值的优化
  •     1.2.7 肝素亲和柱洗脱体积的测定
  •     1.2.8 自制肝素亲和柱性能的比较
  •   1.3 液相色谱条件
  • 2 结果与分析
  •   2.1 肝素亲和柱的应用比较
  •   2.2 肝素亲和柱承载量的测定
  •   2.3 磷酸盐浓度的优化
  •   2.4 磷酸盐pH值的优化
  •   2.5 洗脱液盐浓度的优化
  •   2.6 洗脱液pH值的优化
  •   2.7 肝素亲和柱洗脱体积的测定
  •   2.8 自制肝素亲和柱性能的比较
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 楼飞,杨秀敏,章寅

    关键词: 乳铁蛋白,肝素亲和柱,磷酸盐缓冲液,高效液相色谱法

    来源: 食品研究与开发 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 上海市农业科学院庄行综合试验站,沈阳市动物疫病预防控制中心,上海德诺产品检测有限公司

    分类号: TS252.7

    页码: 161-165

    总页数: 5

    文件大小: 230K

    下载量: 137

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