导读:本文包含了抗菌肽基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:家蚕,眠期,抗菌肽基因,转录表达
抗菌肽基因论文文献综述
杨伟克,唐芬芬,刘增虎,董占鹏[1]（2019）在《眠期家蚕抗菌肽基因的转录表达分析》一文中研究指出【目的】探究家蚕眠期抗菌肽基因的表达变化规律,为深入拓展理解眠期家蚕免疫防御机制提供新线索。【方法】以四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的家蚕幼虫为实验材料,利用抑菌曲线法测定血淋巴的抑菌活性,采用实时荧光定量PCR检测脂肪体抗菌肽基因的表达情况。【结果】四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的血淋巴对金黄色葡萄球菌均无抑菌作用,而四龄眠12和24 h的血淋巴对大肠杆菌均有明显的抑菌作用。这表明眠期家蚕血淋巴出现了选择性抑菌活性。在四龄眠至五龄起蚕不同发育时间,抗菌肽基因Lebocin3和Moricin的表达量无显着变化;Attacin1基因仅在四龄眠24 h出现上调表达;CecropinB6和Gloverinv2基因的表达量逐渐减弱,呈现下调表达的趋势,而Enbocin2和DefensinB的表达量逐渐升高,呈现上调表达趋势。【结论】眠期家蚕抗菌肽基因表达规律并不一致,Attacin1、Enbocin2和DefensinB可能在家蚕眠期发挥一定的免疫防御功能。(本文来源于《西南农业学报》期刊2019年10期）
赵德刚[2]（2019）在《杜仲抗菌肽基因克隆与利用研究》一文中研究指出抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是生物体先天免疫系统的重要组成部分,广泛存在于包括细菌、植物和动物体中。由于抗生素的过度使用,病原微生物对抗生素的耐药性不断增强,迫切需要找到可以替代传统抗生素的药剂。研究发现,来源于植物的抗菌肽类型很多,包括硫堇、植物防御素、橡胶蛋白、Knottins、脂转移蛋白和Snakins等12类。植物抗菌肽具有广泛的生物活性,包括抗细菌、抗真菌、抗病毒、杀虫和抗癌,还具(本文来源于《中国植物保护学会2019年学术年会论文集》期刊2019-10-23）
王艳慧,陶妍[3]（2019）在《叁疣梭子蟹PtCrustin2抗菌肽基因优化及其在毕赤酵母中高效表达》一文中研究指出Crustin是一系列富含半胱氨酸的甲壳动物来源的抗菌肽,是甲壳动物非特异性免疫机制中的重要免疫因子,其生物学功能由C端的成熟肽区域决定。参考叁疣梭子蟹(Portunus trituberculatus) Pt Crustin2成熟肽的c DNA序列,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏爱性对其相关密码子进行优化,合成5'端含XhoⅠ限制性位点和Kex2信号肽酶切位点、3'端含XbaⅠ限制性位点和6×his标签的目的基因"sm Pt Crustin2";以p PICZαA为表达载体,构建重组表达载体p PICZαA-sm Pt Crustin2,将其转入毕赤酵母X-33细胞后,通过含高浓度博来霉素的抗性平板筛选高拷贝甲醇利用快速型酵母转化子;筛选获得的酵母转化子在28℃、250 r/min条件下,使用0. 5%甲醇诱导表达目的蛋白,并通过固化金属离子亲和层析(IMAC)对其进行分离纯化。Tricine-SDS-PAGE分析显示:纯化的重组体sm Pt Crustin2的分子量约为9. 6 ku,并形成分子量约20 ku的二聚体。Western Blot分析进一步证明了纯化产物为预期的目的蛋白。建立的毕赤酵母表达系统获得了表达量为22. 4 mg/L的重组体sm Pt Crustin2。(本文来源于《生物学杂志》期刊2019年04期）
陈千权,王野影[4]（2019）在《四纹豆象Toll与抗菌肽基因对种群密度的响应》一文中研究指出为揭示四纹豆象(Callosobruchus maculatus)免疫信号转导与抗菌肽基因表达量对种群密度的响应机制,利用tBLASTn在四纹豆象腹部转录组数据中鉴定Toll、IMD(Immune deficiency)及抗菌肽基因,并以FPKM值指示基因表达量。结果表明,从腹部转录组中鉴定到6个富含亮氨酸结构域的Toll信号通路受体基因,其中,Toll-1进化速率较快,Toll-3、Toll-10、Toll-7、Toll-8、Toll-6进化速率依次降低。鉴定到IMD信号通路的胞内关键信号分子基因IMD和受体肽聚糖识别蛋白LC基因(Peptidoglycan recognition protein LC,PGRP-LC)。IMD和PGRP-LC的进化速率与Toll-3相似。表达量方面,Toll-1表达量最低,其FPKM值为0.32,且种群密度对其表达量无显着影响,Toll-3、Toll-6、Toll-7、Toll-8、Toll-10的表达量在高密度群体中显着或极显着上调,其中,Toll-7表达量最高,其在高密度群体、低密度群体中的FPKM值分别为127.25、57.92。种群密度对IMD和PGRP-LC的表达量无显着影响。鉴定到7个抗菌肽基因,即1个Defensin(防御素基因)、1个Cecropin(天蚕素基因)、2个Apidaecin(蜜蜂抗菌肽基因)、3个Drosomycin(抗真菌肽基因),其中,Drosomycin在进化方面最保守。Apidaecin-1表达量最低,其FPKM值为6.58,Defensin表达量最高,高密度群体、低密度群体的FPKM值分别为1 277.23、683.87。种群密度对Apidaecin-1、Cecropin、Apidaecin-2的表达量无显着影响,Defensin和3个Drosomycin在高密度群体中上调。综上所述,Toll-3、Toll-6、Toll-7、Toll-8、Toll-10与Defensin、Drosomycin-1、Drosomycin-2、Drosomycin-3在高种群密度条件下上调表达。(本文来源于《河南农业科学》期刊2019年09期）
张志鹏[5]（2019）在《奶牛溶菌酶基因（Lyz）和气管抗菌肽基因（TAP）表达质粒的构建、抗菌效果及安全性评价》一文中研究指出随着乳制品消费水平的不断提高,人们越来越关注牛奶的质量。奶牛乳腺炎已经成为严重影响牛乳品质的重要因素,抗生素是比较有效的治疗手段,但抗生素带来的负效应日益凸显,病原菌耐药性增强、牛乳中抗生素残留等众多问题,导致奶牛产奶量降低和生乳品质下降。因此,研发新型可替代抗生素的产品,对于提升牧场经济效益、提高牛乳品质具有重大意义。本研究通过RT-PCR、同源重组等技术构建奶牛溶菌酶基因(Lyz)/气管抗菌肽基因(TAP)乳腺特异性表达质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz和pBLG-EGFP-N1-TAP。将上述质粒转染到奶牛的原代乳腺上皮细胞和泌乳高峰期的小鼠中,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白,荧光定量PCR和Western Blot检测技术验证上述质粒在乳腺上皮细胞水平和乳腺组织水平的特异性表达。通过细胞功毒实验分析表达产物抗菌效果,通过小鼠负重实验、耐缺氧实验、体重变化称量、血液生化指标和脏器指数评估重组质粒的安全性。旨在通过重组质粒实现奶牛溶菌酶、气管抗菌肽内源抗菌物质在乳腺组织的特异性表达,提高奶牛自身的免疫力,以达到防治乳腺炎和提高原料奶质量的目的。主要研究结果如下:1治疗奶牛乳腺炎表达质粒的构建通过RT-PCR从牛乳腺上皮细胞扩增Lyz、TAP基因编码序列,将其克隆到携带增强型绿色荧光蛋白通用型表达载体pEGFP-N1中,利用同源重组技术,以奶牛乳腺特异性表达β-乳球蛋白基因(BLG)启动子替换pEGFP-N1载体原有CMV启动子,构建了奶牛溶菌酶基因(Lyz)/气管抗菌肽基因(TAP)乳腺特异性表达质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz和pBLG-EGFP-N1-TAP。琼脂糖凝胶电泳结果显示,奶牛溶菌酶基因(LLz)、气管抗菌肽基因(TAP)和β-乳球蛋白基因(BLG)启动子序列,PCR扩增出与预期片段长度匹配的条带,且菌液PCR检测显示,每个目的片段均连接到增强型绿色荧光蛋白通用型表达载体pEGFP-N1中的所需位置。BLG基因启动子克隆测序后,通过BLAST比对发现,克隆的启动子序列与数据库中该基因5'上游相似性达99%。分析该片段,分别在第887bp-892bp、1188bp-1191bp、2080-2085bp位置存在GC-box、CAAT-box和TATA-box的启动子元件,表明所选片段为BLG基因的启动子片段。重组质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz和pBLG-EGFP-N1-TAP测序结果显示与目的片段长度相符,目的基因阅读框正确,未出现错误位置。2重组质粒细胞表达活性及抗菌效果采用脂质体转染法将重组质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz和pBLG-EGFP-N1-TAP分别转染至奶牛原代乳腺上皮细胞(bPMEC)和人肾脏上皮细胞(HEK293T),荧光显微镜观察到只有奶牛原代乳腺上皮细胞在转染两种重组质粒后均表现出绿色荧光,人肾脏上皮细胞无显色。荧光定量PCR检测也表明两种重组质粒只有在转染至奶牛原代乳腺上皮细胞后,基因Lyz、TAP相对表达量极显着高于未转染空白对照组,在人肾脏上皮细胞中无表达。用重组质粒转染的原代乳腺上皮细胞感染金黄色葡萄球菌后,细胞存活率显着高于未转染重组质粒的对照组,与未感染金黄色葡萄球菌、未转染重组质粒的空白组对比没有显着差异。细胞死亡率极显着低于对照组(P<0.01)。3重组质粒小鼠乳腺的表达和安全性评价通过尾静脉注射法使用基因体外转染试剂,将重组质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz和pBLG-EGFP-N1-TAP转染至处于泌乳高峰期的小鼠体内,荧光定量PCR结果显示,小鼠乳腺组织中基因TAP和Lyz的表达水平显着增加。在小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏中未检测到靶基因的表达。Western Blot检测显示,在转染重组质粒的小鼠乳腺组织中检测到重组质粒绿色荧光蛋白基因EGFP所表达的蛋白质产物,在未用重组质粒转染的小鼠乳腺组织中未检测到该表达产物。对小鼠的各种生理生化指标进行检测表明,发现重组质粒对小鼠行为活动指标、质量变化、血液生化指标、脏器指数无显着影响。本研究制备了两种新型乳腺特异性表达质粒,并验证了细胞水平、活体水平的表达情况和抗菌效果,为未来该质粒应用于奶牛乳腺炎的防治奠定了一定的基础,为奶牛乳腺炎的防治提供了新思路、新方法,为奶牛溶菌酶、奶牛气管抗菌肽在奶牛乳腺中特异性表达、研发新型可替代抗生素产品提供重要理论依据和技术支持。(本文来源于《扬州大学》期刊2019-05-30）
朱春玲,李梅,刘丽,刘少龙,夏小静[6]（2019）在《抗菌肽基因工程表达载体的研究进展》一文中研究指出近年来,由于传统抗生素的滥用,药物残留及耐药性问题日益严重,时刻威胁着人类的健康,寻找新的抗菌药物迫在眉睫。抗菌肽是一类分子量相对较小并由基因编码核糖体合成的生物活性肽[1]。Boman G.等人发现第1个天然抗菌肽天蚕素以来,便开启了抗菌肽研究的黄金时代。随着抗菌肽研究的不断深入,人们发现抗菌肽具有抗菌、抗病毒、抗癌、调节凋亡以及加快伤口愈合的功能。然而,天然抗菌肽的生产成本高、细胞选择性差,限制了天然多肽在临床上的应用[2],另外,(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2019年02期）
刘洋,柯晓静,于宏伟,郭润芳[7]（2019）在《一种新型抗菌肽基因决定簇的克隆与序列结构特征》一文中研究指出侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)S62-9菌株产生的抗菌肽BBL属于非核糖体合成肽,其生物合成涉及到一系列相关基因。为了获得完整的抗菌肽BBL基因决定簇,本研究基于部分已知的NRPS-A结构域基因序列,以S62-9菌株质粒DNA为模板,采用TAIL-PCR技术对NRPS-A结构域的上游进行扩增,得到一个大小为2.74kb的序列,该序列包含NRPS-A的5′末端序列、pp-binding序列以及1个ABC转运蛋白基因。该序列进一步与已知序列进行序列拼接及软件分析比对,最终获得一个大小为22.2kb的基因簇,该基因簇包含13个Bbl功能结构域,根据功能该基因簇分为3类功能相关基因:一类是编码转运相关蛋白,BblE包含3个ABC转运蛋白,负责抗菌肽向胞外渗透运输;二是催化短肽合成基因,Bbl F包含了pp-binding结构域和NRPS-A结构域,与氨基酸的装载和缩合有关,负责短肽的合成;叁是肽链修饰相关基因,Bbl D、Bbl E、Bbl M、Bbl K等基因负责肽的修饰。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2019年01期）
任大勇,朱剑威,刘宏妍,于寒松[8]（2018）在《抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌抗菌肽基因筛选及表达鉴定》一文中研究指出以具有抑菌效果的L2、L16、L19等7株乳酸菌为模板,通过PCR扩增验证部分菌株中含有PlnF、PlnE、PlnN、PlnJ、PlnK等抗菌肽基因,以pET28a为载体并在抗菌肽基因两端引入Nco I和Xho I酶切位点,经双酶切和T4连接酶反应构建pET28a-抗菌肽重组质粒,转化E.coli BL21(DE3),培养至OD_(600)=0.6时,加入0.5mmol/L的IPTG诱导6h,菌体在400 W、超声4s、间歇5s条件下破碎后以8mol/L尿素进行变性处理和Ni柱纯化透析复性后的蛋白与相对应未纯化的蛋白相比,仅PlnF纯化蛋白对金黄色葡萄球菌具有抑菌效果[抑菌圈直径为(13.43±0.21)mm],而其他蛋白几乎无抑菌活性。进一步通过Tricine-SDS-PAGE电泳和nanoLC-ESI-MS/MS验证,目的蛋白与PlnF抗菌肽具有97.6%的同源性。(本文来源于《食品与机械》期刊2018年09期）
王慧,杨文佳,骆建林,李国勇,张婷[9]（2018）在《大鲵抗菌肽基因KK1/KK5/KK8对嗜水气单胞菌的侵染响应》一文中研究指出【目的】探究大鲵(Andrias davidianus)抗菌肽家族基因对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)侵染的响应,为揭示抗菌肽家族基因的功能提供理论依据。【方法】通过腹腔注射嗜水气单胞菌感染大鲵后,采用Trizol提取组织总RNA,反转录合成cDNA,再以实时荧光定量PCR(qPCR)分析抗菌肽家族3个基因(KK1、KK5和KK8)在大鲵皮肤和肝脏器官的表达响应情况。【结果】经腹腔注射嗜水气单胞菌后,抗菌肽基因KK1、KK5和KK8在大鲵皮肤组织中的相对表达量在攻毒后12~36 h均显着高于注射PBS的对照组(P<0.05,下同);而在肝脏组织中,抗菌肽基因KK1、KK5和KK8的相对表达量分别在攻毒后24、12和24 h时显着高于对照组,其他时间点均低于对照组,说明这3个抗菌肽基因在早期积极响应嗜水气单胞菌的侵染,但相对于皮肤组织,其高表达量持续时间较短。【结论】抗菌肽家族基因KK1/KK5/KK8在嗜水气单胞菌侵染大鲵时积极作出应答,尤其在皮肤组织中的特异表达对启动机体天然免疫应答抵抗病原微生物感染具有重要作用。(本文来源于《南方农业学报》期刊2018年08期）
张敬梅,顾以韧,李江凌,陈晓晖,曾凯[10]（2018）在《乌金猪、青峪猪和成华猪免疫器官与组织Toll样受体和抗菌肽基因表达比较研究》一文中研究指出Toll样受体(TLRs)和抗菌肽是机体天然免疫系统的重要组成部分,是抵御外界有害微生物或病毒入侵的重要屏障。乌金猪、青峪猪、成华猪是中国优良地方猪种,具有繁殖力高、抗病耐逆性强等优点。本实验比较了8月龄乌金猪、青峪猪、成华猪与约克夏猪的消化道、呼吸道局部免疫组织和全身免疫器官的先天免疫特点,采用实时荧光定量PCR技术检测TLRs(TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR9)和抗菌肽(p BD-1、PR-39)基因在4种猪的胸腺、脾脏、扁桃体、肠系膜淋巴结和肺门淋巴结中的表达差异。结果显示,成华猪胸腺中TLR7、PR-39,脾脏中TLR4、TLR7,肠系膜淋巴结中TLR4、TLR9,肺门淋巴结中TLR1、TLR4、TLR7、TLR9 mRNA表达水平显着高于其他猪种(P <0. 05);乌金猪胸腺中TLR1、TLR9,扁桃体中TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR9、p BD-1,肠系膜淋巴结中TLR7 mRNA表达水平显着高于其他猪种(P <0. 05);青峪猪扁桃体和肠系膜淋巴结中PR-39 mRNA表达水平显着高于其他猪种(P <0. 05)。这些结果为进一步利用优良地方猪种杂交育种和筛选抗病分子标记提供了新的线索。(本文来源于《四川动物》期刊2018年05期）
抗菌肽基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是生物体先天免疫系统的重要组成部分,广泛存在于包括细菌、植物和动物体中。由于抗生素的过度使用,病原微生物对抗生素的耐药性不断增强,迫切需要找到可以替代传统抗生素的药剂。研究发现,来源于植物的抗菌肽类型很多,包括硫堇、植物防御素、橡胶蛋白、Knottins、脂转移蛋白和Snakins等12类。植物抗菌肽具有广泛的生物活性,包括抗细菌、抗真菌、抗病毒、杀虫和抗癌,还具
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗菌肽基因论文参考文献
[1].杨伟克,唐芬芬,刘增虎,董占鹏.眠期家蚕抗菌肽基因的转录表达分析[J].西南农业学报.2019
[2].赵德刚.杜仲抗菌肽基因克隆与利用研究[C].中国植物保护学会2019年学术年会论文集.2019
[3].王艳慧,陶妍.叁疣梭子蟹PtCrustin2抗菌肽基因优化及其在毕赤酵母中高效表达[J].生物学杂志.2019
[4].陈千权,王野影.四纹豆象Toll与抗菌肽基因对种群密度的响应[J].河南农业科学.2019
[5].张志鹏.奶牛溶菌酶基因（Lyz）和气管抗菌肽基因（TAP）表达质粒的构建、抗菌效果及安全性评价[D].扬州大学.2019
[6].朱春玲,李梅,刘丽,刘少龙,夏小静.抗菌肽基因工程表达载体的研究进展[J].中国兽医杂志.2019
[7].刘洋,柯晓静,于宏伟,郭润芳.一种新型抗菌肽基因决定簇的克隆与序列结构特征[J].河北农业大学学报.2019
[8].任大勇,朱剑威,刘宏妍,于寒松.抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌抗菌肽基因筛选及表达鉴定[J].食品与机械.2018
[9].王慧,杨文佳,骆建林,李国勇,张婷.大鲵抗菌肽基因KK1/KK5/KK8对嗜水气单胞菌的侵染响应[J].南方农业学报.2018
[10].张敬梅,顾以韧,李江凌,陈晓晖,曾凯.乌金猪、青峪猪和成华猪免疫器官与组织Toll样受体和抗菌肽基因表达比较研究[J].四川动物.2018