导读:本文包含了克隆与测序论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,序论,籽粒,山茱萸,病毒,生长激素,体细胞。
克隆与测序论文文献综述
王丽君,李艳青,谢舒平,石雨荷,朱敏[1]（2019）在《基于转录组测序黑老虎角鲨烯合酶基因克隆和生物信息学分析》一文中研究指出目的研究黑老虎[Kadsura coccinea(Lem.)A. C. Smith]转录组特征,克隆叁萜生物合成上游途径的关键酶基因角鲨烯合酶(KcSQS),为黑老虎资源利用奠定基础。方法对黑老虎不同部位进行转录组测序分析,根据筛选出的KcSQS候选基因序列设计引物,利用PCR技术进行基因克隆,并借助生物学软件进行生物信息学分析。结果克隆得到一个KcSQS基因,包含全长1 227 bp的开放阅读框(ORF),编码408个氨基酸,预测其蛋白分子量为46.65 kD,定位于细胞质膜,含一段跨膜超螺旋结构。该基因在黑老虎叶片中表达量最高,与同科植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd. et Wils.)角鲨烯合酶(MoSQS)蛋白序列相似性为76.77%,预测为角鲨烯合酶。结论该研究对黑老虎植物根、茎和叶进行转录组测序,成功克隆了角鲨烯合酶基因,并对其进行生物信息学分析,可为进一步研究黑老虎叁萜类化合物的生物合成提供依据。(本文来源于《中药新药与临床药理》期刊2019年07期）
初砚硕[2]（2019）在《基于肿瘤测序数据的亚克隆重构方法研究》一文中研究指出肿瘤中含有多种从单个祖先细胞种群通过连续获取突变而形成的在基因组水平不同的细胞种群。通过自然选择,这种肿瘤内基因异质性能够使肿瘤获得适应性,从而导致治疗失败。肿瘤中含有某变异的所有的细胞的集合称为该变异的亚克隆种群(Subclonal population)。亚克隆重构(Subclonal reconstruction),即重构肿瘤中变异的亚克隆种群的进化树,能够有助于识别与癌症的发生和进展相关的重要驱动变异,进而设计更有效的治疗方案。现有基于测序数据进行亚克隆重构的算法依据变异的亚克隆种群比例推导肿瘤的进化结构。随着测序技术发展和测序成本的降低,在癌症发展的进程中,通过多种测序技术、多次测序来进行分析肿瘤成为可能,然而目前没有基于多种测序技术的多次肿瘤测序数据进行亚克隆重构的自动化方法。针对该问题,本文开展了肿瘤中最常见的体细胞拷贝数突变(Somatic copy number alternation,SCNA)的亚克隆重构相关的研究,相关的主要工作包括以下四个方面。(1)提出了一种基于贝叶斯概率模型和层次聚类的肿瘤测序数据偏差校正方法。现有基于肿瘤和其对照样本的测序短片段(Read)数量比值来分析SCNA及其亚克隆种群的方法认为,发生SCNA的区域中对齐的肿瘤和其对照样本的测序短片段具有相同的偏差特性,因此测序短片段数量比值不受偏差影响。然而,本文通过研究发现,测序短片段数量比值仍然受偏差影响且该比值与对应基因组区间的GC含量呈现对数线性关系。利用该偏差特性,本文提出一种贝叶斯偏差校正模型。该偏差校正模型使用马尔科夫链蒙塔卡洛(Markov chain monte carlo,MCMC)方法从校正后的数据的分布中选取最佳校正数据。最佳校正数据的似然设置为校正后的数据的测序短片段数量比值的对数的核密度曲线峰值之和。密度峰值的个数设置为预先设定的亚克隆种群个数和最大拷贝数的乘积。实验结果表明,与现有的Loess回归、线性回归偏差校正方法相比,该方法能够更好并且更快速地校正该类偏差。(2)分析亚克隆比例的解空间并提出一种基于均值漂移和层次聚类的变异片段聚合方法。现有的基于二代测序数据的SCNA检测工具通过比较肿瘤和其对照样本的二代测序片段数量的差异来判断对应的基因组区域是否发生变异,具有灵敏度越高受误差影响越大的性质。由于后续的亚克隆比例求解工具认为两个相邻断点之间只含有同一类型的变异,所以为了降低断点的误发现率,使用高灵敏度的变异检测工具检测变异断点。然而过多的假阳性断点使得求解亚克隆比例耗时且不准确。本文提出的片段聚合方法首先使用层次聚类对片段按照测序短片段数量比值的对数进行聚类,然后使用均值漂移对聚类后的每一类片段集合按照片段中杂合性等位基因(Allele)位点的B等位基因频率(B allele frequency,BAF)值进行分解,最后合并同类别相邻的片段。实验结果表明,本文的片段聚合方法能够有效去除假阳性断点,降低求解亚克隆种群比例的时间消耗且结果更加准确。(3)提出基于贝叶斯网络的亚克隆比例计算方法。现有的求解SCNA的亚克隆比例的方法的计算结果精度差且为了使求解过程收敛,现有方法人为地额外限制求解空间或者人为地加入额外没有科学依据的假设。为了解决以上问题,本文基于(2)中的SCNA的解空间分析和(1)中对SCNA的偏差分析,提出了一种基于贝叶斯网络的SCNA的亚克隆种群比例模型并使用MCMC方法求解亚克隆比例。在该模型内,本文根据Lander-Waterman的测序短片段覆盖度模型将SCNA片段内对齐的肿瘤测序短片段数量设置成服从泊松分布,将SCNA片段内的杂合等位基因位点对齐的肿瘤测序短片段的B等位基因(B allele)数量设置为服从二项分布,将将亚克隆种群比例的先验分布设置为服从狄利克雷过程。实验结果表明,本文提出的亚克隆比例计算方法能够更准确地求解亚克隆比例且能够求解现有方法无法求解的亚克隆个数多于3个以上的亚克隆比例。(4)提出了多阶段树学习方法和基于多阶段树学习的亚克隆重构方法。本文在现有的应用变异的亚克隆种群比例进行亚克隆重构的拓扑规则基础上提出一种称为时序拓扑规则的基于变异发生的先后顺序约束肿瘤变异的亚克隆进化结构的亚克隆重构拓扑规则。基于该规则,本文提出一种称为多阶段树学习的树结构学习方法。该树结构学习方法在对变异的亚克隆种群进化树结构进行MCMC抽样时,按照变异发生的先后顺序抽取其亚克隆所在树节点,并在抽取当前变异的亚克隆所在节点时,通过限制当前节点不抽中先发生的变异的亚克隆所在的节点的祖先节点,使抽取的树结构更符合亚克隆的进化过程。本文在多阶段树学习的基础上提出的扩展算法能够结合二代测序数据和靶向测序、单细胞测序数据来求解亚克隆进化树。本文将多阶段树学习和(1)、(2)、(3)提出的方法组成亚克隆重构流程,实验结果表明,本文提出的多阶段树学习方法能够结合多种测序技术的数据对SCNA进行更准确的亚克隆重构。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2019-06-01）
王智锋[3]（2019）在《单细胞全外显子组测序在转移性结直肠癌克隆进化中的初步应用》一文中研究指出癌症是全人类共同面对的“健康杀手”之一,肿瘤转移是癌症致死的重要原因。在结直肠癌中,肝转移是常见的肿瘤转移类型。随着二代测序技术在肿瘤领域的普及应用,结直肠癌中存在广泛的遗传异质性,尤其是在转移性结直肠癌中,肿瘤之间和肿瘤内部的异质性以及肿瘤转移的深层机制仍然未能彻底得到剖析。单细胞测序技术可以从单细胞水平揭示肿瘤内部每个细胞的基因型和表型,非常适用于研究肿瘤的异质性、肿瘤细胞谱系追踪和肿瘤微环境等问题。随着单细胞测序技术在肿瘤科学和临床研究上的应用,肿瘤的诊断和治疗水平将得到很大的提高。在本研究中,本研究从单细胞基因组层面研究了1例转移性结直肠癌患者102个单细胞的遗传特征和肿瘤克隆演化过程。首先,本研究通过手术切除收集了患者结直肠癌原发灶的肿瘤组织和癌旁组织,以及肝转移灶的肿瘤组织,同时利用单细胞分离技术分离获得高质量的肿瘤单细胞并采用多重链置换扩增方法进行单细胞全基因组的扩增。通过全外显子组深度测序和低深度全基因组测序,检测不同肿瘤病灶来源的组织的单碱基水平遗传变异和拷贝数变异,以及单细胞层面的体细胞突变。分析发现原发肿瘤与转移肿瘤的突变位点和突变基因均存在60%的一致性,包括结直肠癌中常见的TP53、BRAF、SMAD4等基因,推断该名患者的肿瘤转移符合中晚期转移模型。此外,通过单细胞水平的肿瘤细胞谱系追踪分析,深入分析了部分关键的肿瘤驱动基因突变在转移性结直肠癌肿瘤演化过程中的作用,发现APC抑癌基因的突变模式变化可能对该名患者的肿瘤发生发展起到重要作用。本研究还发现了肿瘤形成早期的驱动基因变异,促使肿瘤转移的关键驱动基因SMAD4的突变,在肿瘤演化的晚期存在与细胞分裂、细胞黏附相关的基因变异,如CDH23、DLG2等。最后,本研究从单细胞基因组层面深入分析了转移性结直肠癌的肿瘤演化进程,可以精细推断具有不同遗传特征的细胞亚群在肿瘤发生发展不同阶段的关键作用。将来单细胞基因组测序技术在通量和成本上得到突破,大规模的单细胞全基因组测序必然会丰富我们对肿瘤转移机制的认识。单细胞测序技术的发展及其临床实践必将对转移性癌症患者的临床诊断、治疗产生深远的影响。(本文来源于《华南理工大学》期刊2019-03-22）
俎峰,李霞,何晓莹,张国建,张建昆[4]（2019）在《甘蓝型油菜BnEOD3基因克隆与比较测序分析》一文中研究指出【目的】克隆拟南芥籽粒大小发育母体效应基因EOD3在甘蓝型油菜籽粒中表达的同源基因拷贝,并在大、小籽粒材料间开展序列比较分析。【方法】以1份大籽粒与1份小籽粒种质发育中的籽粒为研究材料,利用RT-PCR克隆发育中籽粒表达的BnEOD3基因拷贝,结合生物信息学手段在大、小籽粒材料间进行差异比较分析。【结果】生物信息学分析发现BnEOD3基因在甘蓝型油菜中有4个同源拷贝(BnaC04g00760D,BnaA05g01200D,BnaC04g50960D,BnaA04g27100D)。其中BnaA04g27100D在大、小籽粒材料发育籽粒中均有表达,且在第114碱基处存在SNP变异(大籽粒为C,小籽粒为G),BnaC04g50960D则仅在小籽粒材料中检测到表达,BnaC04g00760D与BnaA05g01200D基因则在大、小籽粒中均未检测到表达。【结论】BnEOD3基因仅有2个拷贝(BnaA04g27100D和BnaC04g50960D)在发育籽粒中检测到表达,其中BnaA04g27100D在第114碱基处的SNP变异导致氨基酸序列甘氨酸(G)与丙氨酸(A)的氨基酸的差异,可能与大、小籽粒性状有关。(本文来源于《西南农业学报》期刊2019年01期）
龙熙,张廷焕,赵久刚,蓝静,柴捷[5]（2018）在《猪EIF2S3基因克隆测序及其组织表达谱分析》一文中研究指出【目的】克隆猪EIF2S3基因mRNA全长,并进行生物信息学分析及检测其在猪各组织中的表达特征,为研究真核翻译起始因子2(eIF2)蛋白γ亚基的生物学功能打下基础。【方法】以荣昌猪胸腺mRNA为模板,采用RCAE-PCR克隆EIF2S3基因的m RNA全长序列,在线完成各种生物信息学分析后,利用实时荧光定量PCR分析猪EIF2S3基因的组织表达特征。【结果】猪EIF2S3基因mRNA全长1813 bp,其中蛋白质编码区(CDS)长1419 bp,5'UTR区、3'UTR区分别长14和380 bp,编码472个氨基酸。EIF2S3蛋白分子量51.1 kD,理论等电点(pI)8.62,包含58个带正电的氨基酸和52个带负电的氨基酸,其前体蛋白靠近N端区域有一个强疏水区;EIF2S3蛋白的空间结构由α-螺旋、β-折迭、延伸及无规则卷曲构成。EIF2S3蛋白氨基酸序列与狗和大白鼠的相似性最高(99.6%),其次是马、猫、牛、羊和人类(99.4%),与斑马鱼的相似性最低(96.6%)。EIF2S3基因在猪的心脏、胸腺和淋巴组织中表达量较高,在脾脏和肌肉中呈中度表达,在肾脏中的表达量较低,而在肝脏中基本不表达。【结论】猪EIF2S3基因全长1813 bp,在核酸和氨基酸水平上与其他物种的EIF2S3基因高度同源,尤其与狗和大白鼠的遗传距离最近;其在猪心脏、胸腺和淋巴组织中的表达量较高,在肝脏中基本不表达,据此推测EIF2S3参与合成的蛋白更多地参与心脏泵血和免疫相关功能,基本不发挥能量代谢功能。(本文来源于《南方农业学报》期刊2018年10期）
韩昊莹,郑慧华,陈红英[6]（2018）在《FAV-4 Hexon全基因的扩增、克隆、测序及遗传进化分析》一文中研究指出引言FAV-4是引起禽心包积水-包涵体肝炎综合征的主要病毒,多呈急性暴发,引发鸡群的其他鸡只感染,本病主要发生于3～5周龄的肉鸡、麻鸡,也偶见于蛋鸡。根据群特异性抗原,禽腺病毒可分为3个群,FAV-4属于禽腺病毒Ⅰ群,非折迭的二十面体结构,病毒粒子大小在70～90nm之间。该病毒粒子有252个衣壳粒,包含240个六邻体(Hexon)和12个五邻体(顶点衣壳粒)~([1])。已证实Hexon蛋白(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21）
郭奎,徐朋丽,赵宇,郑慧华,杨明凡[7]（2018）在《PCV3河南株Cap基因的克隆、测序及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出为研究猪圆环病毒3型(PCV3)Cap基因在大肠杆菌中的表达产物是否具有免疫原性,根据GenBank中发表的PCV3基因组序列,设计1对特异性引物,PCR扩增PCV3 Cap基因,克隆到pMD18-T载体。测序结果表明获得了Cap基因,其大小为543bp。并将Cap亚克隆到原核表达载体pET-28a中,再转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,获得重组菌株。获得的重组菌37℃、0.6mmol/L IPTG诱导6h,进行SDS-PAGE及Western blot分析。重组菌破碎后从沉淀中获取1条约24 600的新蛋白带,可与小鼠抗His单克隆抗体发生特异性反应。有研究表明PCV3与PCV2不具有免疫交叉保护作用,因此本试验表达的具有良好的抗原性PCV3 Cap蛋白,为PCV3新型亚单位疫苗和ELISA诊断试剂盒的研制奠定了基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年11期）
邢漫萍,黄丽丽,王峰,郑心力,林哲敏[8]（2018）在《海南文昌鸡生长激素基因克隆测序及生物信息学分析》一文中研究指出为了克隆文昌鸡的生长激素(growth hormone,GH)基因,获得该基因序列并分析基因结构和相关遗传变异,采用PCR方法扩增GH基因组序列,通过克隆测序寻找基因中的突变位点,利用PCR产物直接测序检测GH基因的多态性。结果显示:在鸡GH基因组中共发现7处碱基突变位点,分别位于GH基因的5'端、第1内含子、第4外显子和第4内含子中;多态性分析发现,在GH基因-391 bp处的A/G突变位点、-360bp处的A/G突变位点、-121 bp处的C/T突变位点上,文昌鸡的优势基因型分别是AA、GG和CC;鸡GH基因启动子区域发现多种潜在的转录因子结合位点,如GATA序列结合因子1(GATA-binding factor 1,GATA-1)、环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(c AMP response element-binding protein,CREB)、核因子1(nuclear factor 1,NF-1)、上游刺激因子(upstream stimulatory factor,USF)、增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPalp)等。本试验为进一步研究文昌鸡GH基因的功能提供了参考。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2018年10期）
焦文强,徐引弟,王治方,张青娴,朱文豪[9]（2018）在《我国部分省份猪流行性腹泻病毒M基因的克隆测序及遗传进化分析》一文中研究指出为了解我国部分省份猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传进化情况,试验采用RT-PCR方法对2014—2017年采集的源自河南、河北、山西、山东、甘肃、湖北、江西等地区不同猪场的98份腹泻样品进行了PEDV检测,并对25份PEDV阳性样品进行M基因的克隆与测序和遗传进化分析。结果表明:25株M基因序列长度均为618 bp;25株M基因序列间核苷酸同源性为98.2%~100%,其编码的氨基酸序列同源性为97.8%~99.6%,与经典毒株CV777及国内外流行毒株核苷酸同源性为97.7%~98.6%,氨基酸序列的同源性分别为97.8%~98.7%;25株M基因序列与国内外早期分离株(如CV777、CH/S等代表毒株)不在一个进化分支上,与近年来分离株处在一个进化分支上。说明PEDV M基因一直处于变异进化过程中。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年17期）
侯典云,李炯,杨萌萌,张红晓,胥华伟[10]（2018）在《基于转录组测序的山茱萸转录因子CobHLH34的克隆与分析》一文中研究指出山茱萸为中国常用的药食同源的中药材之一,是很多复方中药的主要成分,同时也是园林绿化的常用树种,应用非常广泛。近几年,山茱萸在降血糖、降血脂以及抗血栓等方面的功效备受关注。为深入研究b HLH类转录因子参与调控山茱萸有效成分合成途径的分子机制,本研究在对山茱萸果实开展转录组测序的前提下,以转录本unigene c98416_g2为参考序列,设计特异引物,通过RT-PCR技术,扩增山茱萸的b HLH34转录因子,命名为Cob HLH34,采用DNAstar、Protparatam和psipred等在线分析软件,解析该序列的分子组成、蛋白的分子量以及二级结构预测,结果表明:山茱萸Cob HLH34的c DNA序列长度为740 bp,其ORF序列编码232个氨基酸,理论等电点为7.95,α-螺旋和无规则卷曲是Cob HLH34蛋白的主要组成部分。基于NCBI-Blast比对和MEGA 6.0构建的系统进化树显示,就Cob HLH34而言,山茱萸与橡胶树、胡桃和狭叶羽扇豆聚为一支,具有较高的同源性。本研究有助于探讨Cob HLH34的功能。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年08期）
克隆与测序论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
肿瘤中含有多种从单个祖先细胞种群通过连续获取突变而形成的在基因组水平不同的细胞种群。通过自然选择,这种肿瘤内基因异质性能够使肿瘤获得适应性,从而导致治疗失败。肿瘤中含有某变异的所有的细胞的集合称为该变异的亚克隆种群(Subclonal population)。亚克隆重构(Subclonal reconstruction),即重构肿瘤中变异的亚克隆种群的进化树,能够有助于识别与癌症的发生和进展相关的重要驱动变异,进而设计更有效的治疗方案。现有基于测序数据进行亚克隆重构的算法依据变异的亚克隆种群比例推导肿瘤的进化结构。随着测序技术发展和测序成本的降低,在癌症发展的进程中,通过多种测序技术、多次测序来进行分析肿瘤成为可能,然而目前没有基于多种测序技术的多次肿瘤测序数据进行亚克隆重构的自动化方法。针对该问题,本文开展了肿瘤中最常见的体细胞拷贝数突变(Somatic copy number alternation,SCNA)的亚克隆重构相关的研究,相关的主要工作包括以下四个方面。(1)提出了一种基于贝叶斯概率模型和层次聚类的肿瘤测序数据偏差校正方法。现有基于肿瘤和其对照样本的测序短片段(Read)数量比值来分析SCNA及其亚克隆种群的方法认为,发生SCNA的区域中对齐的肿瘤和其对照样本的测序短片段具有相同的偏差特性,因此测序短片段数量比值不受偏差影响。然而,本文通过研究发现,测序短片段数量比值仍然受偏差影响且该比值与对应基因组区间的GC含量呈现对数线性关系。利用该偏差特性,本文提出一种贝叶斯偏差校正模型。该偏差校正模型使用马尔科夫链蒙塔卡洛(Markov chain monte carlo,MCMC)方法从校正后的数据的分布中选取最佳校正数据。最佳校正数据的似然设置为校正后的数据的测序短片段数量比值的对数的核密度曲线峰值之和。密度峰值的个数设置为预先设定的亚克隆种群个数和最大拷贝数的乘积。实验结果表明,与现有的Loess回归、线性回归偏差校正方法相比,该方法能够更好并且更快速地校正该类偏差。(2)分析亚克隆比例的解空间并提出一种基于均值漂移和层次聚类的变异片段聚合方法。现有的基于二代测序数据的SCNA检测工具通过比较肿瘤和其对照样本的二代测序片段数量的差异来判断对应的基因组区域是否发生变异,具有灵敏度越高受误差影响越大的性质。由于后续的亚克隆比例求解工具认为两个相邻断点之间只含有同一类型的变异,所以为了降低断点的误发现率,使用高灵敏度的变异检测工具检测变异断点。然而过多的假阳性断点使得求解亚克隆比例耗时且不准确。本文提出的片段聚合方法首先使用层次聚类对片段按照测序短片段数量比值的对数进行聚类,然后使用均值漂移对聚类后的每一类片段集合按照片段中杂合性等位基因(Allele)位点的B等位基因频率(B allele frequency,BAF)值进行分解,最后合并同类别相邻的片段。实验结果表明,本文的片段聚合方法能够有效去除假阳性断点,降低求解亚克隆种群比例的时间消耗且结果更加准确。(3)提出基于贝叶斯网络的亚克隆比例计算方法。现有的求解SCNA的亚克隆比例的方法的计算结果精度差且为了使求解过程收敛,现有方法人为地额外限制求解空间或者人为地加入额外没有科学依据的假设。为了解决以上问题,本文基于(2)中的SCNA的解空间分析和(1)中对SCNA的偏差分析,提出了一种基于贝叶斯网络的SCNA的亚克隆种群比例模型并使用MCMC方法求解亚克隆比例。在该模型内,本文根据Lander-Waterman的测序短片段覆盖度模型将SCNA片段内对齐的肿瘤测序短片段数量设置成服从泊松分布,将SCNA片段内的杂合等位基因位点对齐的肿瘤测序短片段的B等位基因(B allele)数量设置为服从二项分布,将将亚克隆种群比例的先验分布设置为服从狄利克雷过程。实验结果表明,本文提出的亚克隆比例计算方法能够更准确地求解亚克隆比例且能够求解现有方法无法求解的亚克隆个数多于3个以上的亚克隆比例。(4)提出了多阶段树学习方法和基于多阶段树学习的亚克隆重构方法。本文在现有的应用变异的亚克隆种群比例进行亚克隆重构的拓扑规则基础上提出一种称为时序拓扑规则的基于变异发生的先后顺序约束肿瘤变异的亚克隆进化结构的亚克隆重构拓扑规则。基于该规则,本文提出一种称为多阶段树学习的树结构学习方法。该树结构学习方法在对变异的亚克隆种群进化树结构进行MCMC抽样时,按照变异发生的先后顺序抽取其亚克隆所在树节点,并在抽取当前变异的亚克隆所在节点时,通过限制当前节点不抽中先发生的变异的亚克隆所在的节点的祖先节点,使抽取的树结构更符合亚克隆的进化过程。本文在多阶段树学习的基础上提出的扩展算法能够结合二代测序数据和靶向测序、单细胞测序数据来求解亚克隆进化树。本文将多阶段树学习和(1)、(2)、(3)提出的方法组成亚克隆重构流程,实验结果表明,本文提出的多阶段树学习方法能够结合多种测序技术的数据对SCNA进行更准确的亚克隆重构。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
克隆与测序论文参考文献
[1].王丽君,李艳青,谢舒平,石雨荷,朱敏.基于转录组测序黑老虎角鲨烯合酶基因克隆和生物信息学分析[J].中药新药与临床药理.2019
[2].初砚硕.基于肿瘤测序数据的亚克隆重构方法研究[D].哈尔滨工业大学.2019
[3].王智锋.单细胞全外显子组测序在转移性结直肠癌克隆进化中的初步应用[D].华南理工大学.2019
[4].俎峰,李霞,何晓莹,张国建,张建昆.甘蓝型油菜BnEOD3基因克隆与比较测序分析[J].西南农业学报.2019
[5].龙熙,张廷焕,赵久刚,蓝静,柴捷.猪EIF2S3基因克隆测序及其组织表达谱分析[J].南方农业学报.2018
[6].韩昊莹,郑慧华,陈红英.FAV-4Hexon全基因的扩增、克隆、测序及遗传进化分析[C].中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集.2018
[7].郭奎,徐朋丽,赵宇,郑慧华,杨明凡.PCV3河南株Cap基因的克隆、测序及其在大肠杆菌中的表达[J].中国兽医学报.2018
[8].邢漫萍,黄丽丽,王峰,郑心力,林哲敏.海南文昌鸡生长激素基因克隆测序及生物信息学分析[J].畜牧与兽医.2018
[9].焦文强,徐引弟,王治方,张青娴,朱文豪.我国部分省份猪流行性腹泻病毒M基因的克隆测序及遗传进化分析[J].黑龙江畜牧兽医.2018
[10].侯典云,李炯,杨萌萌,张红晓,胥华伟.基于转录组测序的山茱萸转录因子CobHLH34的克隆与分析[J].基因组学与应用生物学.2018
论文知识图
