导读:本文包含了病毒膜潜伏蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人巨细胞病毒,UL138蛋白,血清学检测,酶联免疫吸附试验
病毒膜潜伏蛋白论文文献综述
陈文静,黄崇安,陈静,郭刚强,谢旺凯[1]（2015）在《潜伏相关抗原UL138蛋白的制备及其用于人巨细胞病毒感染血清学检测的评价》一文中研究指出目的:探讨基于人巨细胞病毒(HCMV)潜伏相关抗原UL138蛋白的ELISA方法用于HCMV感染血清学检测的意义。方法:生物信息学分析HCMV UL138蛋白的跨膜区结构,选择胞内区序列,经原核密码子优化后全基因合成,克隆至p ET21a(+)原核载体,将成功构建的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),诱导蛋白表达后,SDS-PAGE及Western blot法鉴定目的蛋白表达,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。将纯化的UL138蛋白包被ELISA板,检测173例人血清UL138特异性抗体,并与临床上使用的罗氏公司cobas 8000分析系统及配套试剂盒进行血清HCMV Ig G抗体检测比较,评价UL138蛋白作为HCMV感染血清学检测工具的效能。结果:利用原核表达系统成功表达了UL138蛋白,经镍柱亲和纯化后获得高纯度的目的蛋白;健康成人血清UL138特异性抗体的ELISA法检测结果显示,几乎所有的健康成人都存在UL138特异性抗体,与罗氏公司的化学发光(CLIA)法Ig G检测结果比较,灵敏性为100.0%,符合率为98.8%,差异无统计学意义(x2=0.5,P>0.05),而且具有较好的一致性(Kappa=0.496,P<0.001)。结论:潜伏相关抗原UL138是HCMV感染血清学检测重要候选抗原,可望为基于此蛋白的HCMV血清学检测试剂的研制提供依据。(本文来源于《温州医科大学学报》期刊2015年10期）
孟祥俊,苏云[2]（2015）在《单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白B基因疫苗对HSV-1原发及潜伏感染的抑制作用》一文中研究指出目的观察单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)糖蛋白B基因疫苗(pg B)在防治HSV-1原发及潜伏感染的作用。方法将BALB/c小鼠随机分为4组:A组(实验组,注射含质粒pg B的PBS)、B组(阳性对照组,注射灭活的HSV-1病毒液)、C组(载体对照组,注射含质粒pc DNA3的PBS)和D组(空白对照组,注射PBS)。各组小鼠均于双侧股四头肌多点注射,共免疫3次,间隔3周。于末次免疫3周后行角膜划痕接种HSV-1。术后1~14、21和28 d行角膜荧光素染色,在裂隙灯显微镜下观察角膜炎病变形成情况。角膜接种病毒第30天,处死全部小鼠,取叁叉神经节,接种Vero细胞,观察病毒潜伏感染形成情况。结果 A组和B组小鼠接种HSV-1后仅有轻度角膜上皮炎发生,且6 d内全部愈合,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);C组和D组小鼠接种后第2天角膜上皮炎达到高峰,7 d后炎症慢慢消失,与A组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。A组和B组小鼠接种后未发生角膜基质炎,且无1例死亡;C组和D组小鼠在接种后第5天出现炎症反应,并逐渐加重,接种后11~14 d角膜基质炎达到高峰,在接种后第30天有30%小鼠死亡。Vero细胞检测病毒潜伏感染,A组和B组未发生细胞病变,而C组和D组第5天发生细胞病变。结论 pg B能有效预防实验小鼠HSV-1原发感染,并抑制潜伏感染的形成。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2015年01期）
[3]（2011）在《EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1筛选鼻咽癌的初步结果(英文)》一文中研究指出Objective: Early diagnosis of nasopharyngeal carcinoma (NPC) is an important method to improve the survival rate.However,the sensitivity and specificity of the screening protocols which was widely used in clinic now are considered to be unsatisfactory.Epstein-Barr virus (EBV)-encoded latent membrane protein-1 (LMP-1) is one of the proteins that have been suggested to be a classic oncogene with transformation properties.The current study set out to discuss the clinical significance of LMP-1 on the screening of NPC.Methods: Three hundred patients who visited our institution (Department of Radiation Oncology,Fujian Provincial Cancer Hospital,Fuzhou,China) with ENT symptoms between 2007 and 2008 were involved in this study,and all of them were agreed to be involved in this investigation.Not only did they undergo nasopharyngeal swab to obtain cells for the LMP-1 polymerase chain reaction (PCR) analysis,but also nasopharyngeal biopsy were taken to identify the diagnosis.Results: An amount of DNA that was sufficient for PCR was extracted from 243 (81%) swab samples,the positive rate of LMP-1 of those with non-nasopharyngeal carcinoma was 3.85% (4/108),which was much lower than those with nasopharyngeal carcinoma (P < 0.05).By detecting LMP-1 in nasopharyngeal swabs,NPC was diagnosed with a sensitivity of 88.15% (119 of 135 patients),specificity of 96.30% (104 of 108 patients),a positive predictive value of 95.2% (119 of 123 patients),a negative predictive value of 86.67% (104 of 120 patients),accuracy of 91.77%,and Youden index of 84.45%.Conclusion: The nasopharyngeal swab coupled with PCR-based EBV LMP-1 detection have high sensitivity and specificity,and also good repeatability,it could serve as part of the screening program for high-risk populations.(本文来源于《Chinese-German Journal of Clinical Oncology》期刊2011年01期）
贾雪梅,王平,秦娣,卢春[4]（2011）在《重组腺病毒表达载体介导艾滋病毒Vif蛋白调控KSHV潜伏感染的初探》一文中研究指出目的:利用AdEasy腺病毒载体系统包装含人类免疫缺陷病毒1型(艾滋病毒:HIV-1)病毒体感染性因子(Vif)的重组腺病毒,使之感染原发性渗出性淋巴瘤细胞系BCBL-1细胞,并检测Vif蛋白对细胞中卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi′ssarcomaassociated herpesvirus,KSHV)潜伏感染与裂解性复制的影响。方法:从实验室先前构建的重组真核表达质粒pCI-neo-Vif中扩增出Vif基因,插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中构建成pAdTrack-Vif,酶切线性化的重组穿梭质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同转化感受态BJ5183细胞构建成重组腺病毒质粒。重组腺病毒在AD293细胞中得到包装和扩增。用荧光计数法测定腺病毒滴度,以感染复数(MOI)为1的病毒量感染靶细胞BCBL-1,荧光显微镜观察靶细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,并利用逆转录PCR(RT-PCR)和免疫印记(Western blot)技术分别检测Vif基因在靶细胞中的转录和表达情况,而且采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot分别检测KSHV裂解期基因ORF26 mRNA转录及裂解期蛋白vIL-6的表达。结果:经酶切鉴定、核酸序列测定、GFP表达和病毒上清液PCR证实成功包装了携带HIV-1 Vif基因的重组腺病毒,滴度为2.5×108 TU/ml。重组腺病毒感染BCBL-1细胞48 h后,80%以上的细胞中表达GFP,RT-PCR和Western blot均能够在相应位置检测到目的基因Vif的条带。Real-time PCR和Western blot结果显示,Vif降低KSHV ORF26 mRNA转录水平及vIL-6蛋白表达。结论:成功包装了含HIV-1 Vif基因的重组腺病毒且在BCBL-1细胞中表达的HIV-1 Vif蛋白能够抑制KSHV裂解性复制、增强病毒的潜伏感染。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2011年01期）
林隽,李瑞玉,陈明[5]（2010）在《EB病毒膜潜伏蛋白LMP1和基质金属蛋白酶MMP9表达与鼻咽癌转移的关系》一文中研究指出目的探讨EB病毒膜潜伏蛋白LMP1和基质金属蛋白酶MMP9在鼻咽癌组织表达的意义。方法采用免疫组织化学法对40例鼻咽癌组织进行标记及分析。结果鼻咽癌淋巴结转移组LMP1和MMP9阳性表达率明显高于无淋巴结转移组,二者阳性表达呈明显相关。结论 LMP1和MMP9的表达与鼻咽癌的浸润及转移密切相关,LMP1介导MMP9在鼻咽癌细胞扩散和转移起重要作用。(本文来源于《福建医药杂志》期刊2010年05期）
杨慧兰,白利利,樊建勇,王颖[6]（2010）在《稳定表达绿色荧光蛋白标记的人单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录体ORF2融合蛋白的Vero细胞株的建立》一文中研究指出目的建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)标记的人单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框2(ORF2)融合蛋白的Vero细胞株。方法构建重组真核表达质粒pEGFP-ORF2,经酶切及测序鉴定正确后,体外转染Vero细胞,经G418筛选稳定表达融合蛋白的克隆,扩大培养后,荧光显微镜观察EGFP的表达,RT-PCR检测目的基因的转录。结果重组真核表达质粒pEGFP-ORF2经酶切及测序鉴定构建正确,经G418培养20d筛选出的Vero细胞株荧光显微镜下可见融合蛋白表达,RT-PCR检测显示,转染了重组表达质粒的Vero细胞内有目的基因的表达。结论已成功建立了稳定表达EGFP-ORF2的Vero细胞株,为进一步研究HSV-2LATORF2的功能奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2010年06期）
林少俊,郭巧娟,林锦,宗井凤,韩露[7]（2010）在《EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1筛选鼻咽癌的初步结果》一文中研究指出背景与目的:早期诊断鼻咽癌是提高疗效的重要途径,而目前临床上用于鼻咽癌早期诊断的指标存在灵敏度及特异度不理想的问题,EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1是目前被证实的具有转化功能的蛋白质之一,本研究旨在探讨LMP-1作为鼻咽癌筛选指标的价值。方法:收集2007—2008年期间以耳鼻咽喉症状到福建省肿瘤医院放疗科就诊并同意参加本试验的患者300例,利用鼻咽拭子法取鼻咽部黏膜脱落细胞,提取DNA,聚合酶链反应法(PCR法)检测LMP-1基因的表达,所有入组患者均行鼻咽组织病理活检明确诊断。结果:300份鼻咽拭子标本提取了有效DNA样本数243份,合格率81%。非鼻咽癌的患者及健康者中,LMP-1的阳性表达率为3.70%(4/108),明显低于鼻咽癌患者(P<0.05)。LMP-1诊断鼻咽癌的灵敏度为88.15%(119/135),特异度为96.30%(104/108),阳性预测值为96.75%(119/123),阴性预测值为86.67%(104/120),正确率为91.77%,Youden指数为84.45%。结论:利用PCR法检测鼻咽拭子中鼻咽黏膜脱落细胞EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1的表达作为鼻咽癌筛选的指标可重复性好,具有较高的灵敏度和特异度,适合作为高危人群的筛查指标。(本文来源于《中国癌症杂志》期刊2010年06期）
黄敏,李久明,王平,卢春[8]（2010）在《人类免疫缺陷病毒-1 Rev蛋白调控卡波济肉瘤相关疱疹病毒的裂解性周期复制与潜伏感染》一文中研究指出目的:研究人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)Rev蛋白的表达水平对原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞BCBL-1中卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)裂解性周期复制与潜伏的影响。方法:自表达质粒pCI-neo-Rev中扩增出Rev基因,插入到pHAGE-CMV-MCS-IZsGreen中构建成慢病毒载体pLenti-Rev,利用脂质体将其与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转染293T细胞。荧光显微镜观察293T细胞中绿色荧光蛋白(IZsGreen)表达;收集培养上清经0.45μm滤器过滤后即获得病毒悬液。梯度稀释法测定病毒滴度并感染细胞,RT-PCR和Western blot检测Rev在293T细胞中的表达。用慢病毒感染BCBL-1细胞,同时将表达质粒pCI-neo-Rev转染该细胞,采用Western blot分别检测Rev以及KSHV Rta和vIL-6蛋白的表达;Real-timePCR进一步从mRNA水平上定量验证Rev对KSHV复制的影响。结果:限制性内切酶酶切反应和基因测序证实成功构建了携带Rev基因的慢病毒表达载体,病毒滴度为2×107TU/ml。重组慢病毒感染BCBL-1细胞72h后,能够检测到Rev蛋白的表达。Western blot结果显示,低水平表达的Rev能够上调KSHV裂解期蛋白Rta、vIL-6的表达,而高水平表达的Rev则能够抑制Rta和vIL-6的表达。Real-time PCR进一步验证了该结果,表明高水平表达的Rev能够显着抑制BCBL-1中Rta的mRNA转录,96h尤为明显。结论:成功构建了含Rev基因的慢病毒表达载体,获得的病毒能够有效感染BCBL-1细胞,并在其中大量表达Rev蛋白。Rev蛋白的表达水平对KSHV的复制与潜伏可能起到复杂的调控作用。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2010年06期）
张志伟,刘洁琼,余艳辉,欧阳咏梅,贺智敏[9]（2009）在《EB病毒潜伏性膜蛋白1转化NP69细胞的蛋白表达分析》一文中研究指出目的探讨EB病毒潜伏性膜蛋白1(LMP1)转化鼻咽上皮细胞NP69的表达蛋白。方法采用比较蛋白质组学方法,鉴定NP69-pLNSX与NP69-LMP1细胞系中的差异表达蛋白,分析LMP1在NP69细胞中参与调节的蛋白。结果鉴定了LMP1在NP69细胞中参与调节有22个蛋白(表达上调的蛋白9个,下调的13个)。结论LMP1在NP69细胞中可能通过调节Vimentin和Keratin 19等蛋白的表达而起转化作用。(本文来源于《南华大学学报(医学版)》期刊2009年02期）
杨慧兰,赵举峰,樊建勇,周翠,黄小晏[10]（2008）在《单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录子蛋白读码框2真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达》一文中研究指出目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录子蛋白读码框2(LAT ORF2)基因,构建真核表达载体并在真核细胞中表达,用于进一步研究LAT介导的HSV-2潜伏及激活感染机制。方法:以构建成功的pVAX-LAT重组质粒为模板,根据GenBank中HSV-2LATORF2基因的核苷酸序列设计引物,并在引物的5′端分别引入KpnⅠ和PstⅠ酶切位点。用PCR特异性扩增LAT基因ORF2片段,PCR产物纯化回收后经KpnⅠ、PstⅠ双酶切,再次回收后产物与同样经双酶切的pcDNA 6/myc-His B质粒进行连接,Amp抗性筛选阳性重组子,双酶切及测序鉴定连接产物。在脂质体介导下瞬时转染Vero细胞,用RT-PCR及SDS-PAGE检测其在Vero细胞中的表达。结果:重组质粒经KpnⅠ和PstⅠ双酶切获得预期大小的两条片段,测序表明ORF2正确,RT-PCR及SDS-PAGE显示转染了重组质粒的Vero细胞内有目的基因及其编码蛋白的表达。结论:成功构建了ORF2-pcDNA6/myc-His B重组质粒,并可在Vero细胞内有效表达。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2008年09期）
病毒膜潜伏蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)糖蛋白B基因疫苗(pg B)在防治HSV-1原发及潜伏感染的作用。方法将BALB/c小鼠随机分为4组:A组(实验组,注射含质粒pg B的PBS)、B组(阳性对照组,注射灭活的HSV-1病毒液)、C组(载体对照组,注射含质粒pc DNA3的PBS)和D组(空白对照组,注射PBS)。各组小鼠均于双侧股四头肌多点注射,共免疫3次,间隔3周。于末次免疫3周后行角膜划痕接种HSV-1。术后1~14、21和28 d行角膜荧光素染色,在裂隙灯显微镜下观察角膜炎病变形成情况。角膜接种病毒第30天,处死全部小鼠,取叁叉神经节,接种Vero细胞,观察病毒潜伏感染形成情况。结果 A组和B组小鼠接种HSV-1后仅有轻度角膜上皮炎发生,且6 d内全部愈合,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);C组和D组小鼠接种后第2天角膜上皮炎达到高峰,7 d后炎症慢慢消失,与A组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。A组和B组小鼠接种后未发生角膜基质炎,且无1例死亡;C组和D组小鼠在接种后第5天出现炎症反应,并逐渐加重,接种后11~14 d角膜基质炎达到高峰,在接种后第30天有30%小鼠死亡。Vero细胞检测病毒潜伏感染,A组和B组未发生细胞病变,而C组和D组第5天发生细胞病变。结论 pg B能有效预防实验小鼠HSV-1原发感染,并抑制潜伏感染的形成。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
病毒膜潜伏蛋白论文参考文献
[1].陈文静,黄崇安,陈静,郭刚强,谢旺凯.潜伏相关抗原UL138蛋白的制备及其用于人巨细胞病毒感染血清学检测的评价[J].温州医科大学学报.2015
[2].孟祥俊,苏云.单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白B基因疫苗对HSV-1原发及潜伏感染的抑制作用[J].中国生物制品学杂志.2015
[3]..EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1筛选鼻咽癌的初步结果(英文)[J].Chinese-GermanJournalofClinicalOncology.2011
[4].贾雪梅,王平,秦娣,卢春.重组腺病毒表达载体介导艾滋病毒Vif蛋白调控KSHV潜伏感染的初探[J].南京医科大学学报(自然科学版).2011
[5].林隽,李瑞玉,陈明.EB病毒膜潜伏蛋白LMP1和基质金属蛋白酶MMP9表达与鼻咽癌转移的关系[J].福建医药杂志.2010
[6].杨慧兰,白利利,樊建勇,王颖.稳定表达绿色荧光蛋白标记的人单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录体ORF2融合蛋白的Vero细胞株的建立[J].中国生物制品学杂志.2010
[7].林少俊,郭巧娟,林锦,宗井凤,韩露.EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1筛选鼻咽癌的初步结果[J].中国癌症杂志.2010
[8].黄敏,李久明,王平,卢春.人类免疫缺陷病毒-1Rev蛋白调控卡波济肉瘤相关疱疹病毒的裂解性周期复制与潜伏感染[J].南京医科大学学报(自然科学版).2010
[9].张志伟,刘洁琼,余艳辉,欧阳咏梅,贺智敏.EB病毒潜伏性膜蛋白1转化NP69细胞的蛋白表达分析[J].南华大学学报(医学版).2009
[10].杨慧兰,赵举峰,樊建勇,周翠,黄小晏.单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录子蛋白读码框2真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达[J].医学研究生学报.2008