炭样小单孢菌JXNU-1基因打靶载体的构建

论文摘要

小单孢菌属放线菌是许多生物活性物质的重要来源,但自然条件下小单孢菌的活性产物产率普遍偏低,基因编辑与改造对提高小单孢菌属放线菌活性产物的产率具有重要意义。然而,有效的遗传转化体系成为小单孢菌属放线菌基因编辑改造的瓶颈。炭样小单孢菌JXUN-1是实验室从南昌瑶湖农田土壤样品中分离到的一株具有广谱抗菌活性的放线菌,其基因组具有GC含量高的特点。本研究以敲除炭样小单孢菌JXNU-1中抗生素合成相关基因P450为例,以温敏型质粒pKC1139为模板,构建了炭样小单孢菌JXNU-1 P450基因打靶载体p FD306,然后通过电转化将pFD306导入炭样小单孢菌JXNU-1新鲜菌丝体内,通过双交换获得基因缺失株炭样小单孢菌JXNU-ΔP450,最后通过PCR验证了菌株P450基因的缺失,表明炭样小单孢菌JXNU-1基因打靶载体pFD306构建成功。本研究确证了质粒pKC1139可以用于炭样小单孢菌JXNU-1基因组的编辑,为炭样小单孢菌JXNU-1抗生素合成相关基因的筛选及其功能研究提供有效帮助。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王智玮,龙中儿,江云,黄运红

关键词: 炭样小单孢菌,基因敲除,载体构建

来源: 基因组学与应用生物学 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学

单位: 江西师范大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金项目(31360018),江西省自然科学基金项目(20132BAB204007)共同资助

分类号: Q782

DOI: 10.13417/j.gab.038.002613

页码: 2613-2619

总页数: 7

文件大小: 678K

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标签：炭样小单孢菌论文;  基因敲除论文;  载体构建论文;