导读:本文包含了链基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,丝素,家蚕,遗传学,弧菌,大黄鱼,血友病。
链基因论文文献综述
叶青,张莹莹,王晶晶,毛建华[1]（2019）在《Ⅳ型胶原α5链基因突变致奥尔波特综合征两家系遗传学分析》一文中研究指出目的:分析奥尔波特(Alport)综合征的遗传学特征。方法:对原因不明的反复尿检异常的2名先证者进行基于高通量测序技术的全外显子组测序,通过基因突变的致病性、孟德尔遗传规律和临床表型的综合分析,筛选出致病的基因突变,最后通过Sanger测序在家系成员中验证基因突变。结果:两个家系中分别鉴定出COL4A5基因上的2个杂合性剪接位点突变:c.2147-2A>T(IVS27)和c.646-2A>G(IVS11)(NM_033380),且这2个杂合突变分别与2个家系的患病成员呈现共分离关联。结论:Alport综合征主要通过女性直系患者遗传,临床上可以通过有效的遗传咨询进行产前诊断。(本文来源于《浙江大学学报(医学版)》期刊2019年04期）
吴金妃[2]（2019）在《猪蛔虫微管蛋白α-链基因(13E09)在不同发育期的mRNA表达研究》一文中研究指出猪蛔虫病严重危害我国养猪业的发展,通过研究在感染期的表达基因来研究其发育繁殖机制,以达到预防和控制该病的目的已成为猪蛔虫研究的发展趋势。本研究以β-actin为内参,采用半定量RT-PCR方法鉴定分析猪蛔虫微管蛋白α-链基因(13E09)丰度随不同阶段虫体在虫体不同发育阶段的mRNA表达水平的变化,结果显示,该在感染期幼虫呈高丰度表达外,肠四期即(L4)幼虫也有多量表达,在雄虫、虫卵期也有少量表达,但在雌虫和肺叁期幼虫均未检测出该基因的表达,该基因是在感染期幼虫呈高丰度表达的基因,可能在感染宿主过程中起重要作用。这为进一步研究该基因的功能提供了科学依据。(本文来源于《福建畜牧兽医》期刊2019年03期）
陈艳花,蒋涛,王雪珍,钱平,唐顺明[3]（2019）在《家蚕bmo-miR-0031-3p体内下调丝素轻链基因BmFib-L的表达》一文中研究指出为了研究家蚕微RNA(microRNA, miRNA)对丝素轻链基因BmFib-L表达的调控作用,以BmFib-L mRNA的3′非翻译区(3′untranslated region, 3′UTR)为靶标,通过RNAhybrid软件分析,筛选出种子序列与BmFib-L 3′UTR完全互补的家蚕miRNA——bmo-miR-0031-3p(简称"miR-0031-3p")。分别构建miR-0031-3p表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-pre-miR-0031-3p-SV40]和BmFib-L 3′UTR融合萤光素酶报告基因重组表达质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3′UTR-SV40],以海肾萤光素酶表达载体pRL-CMV为内参,共转染BmN细胞,通过检测双萤光素酶活性验证miR-0031-3p的功能;人工合成miR-0031-3p的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor),再进一步验证miR-0031-3p对BmFib-L的调控功能。结果显示,在BmN细胞中,miR-0031-3p显着抑制BmFib-L的表达。为了进一步验证miR-0031-3p在家蚕体内对BmFib-L表达的调控作用,在5龄第2天幼虫体腔内注射转染物,分别在体内过表达和抑制内源性miR-0031-3p,荧光定量分析靶基因表达水平。结果显示,miR-0031-3p在幼虫体内能够下调BmFib-L的表达。该研究结果有利于阐明家蚕miRNA功能和蚕丝蛋白表达调控的分子机制。(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2019年02期）
王红[4]（2019）在《广西一种石蚕丝轻链基因的克隆与序列分析》一文中研究指出石蚕是一种水生吐丝昆虫,石蚕丝丝素的两种主要蛋白为重链蛋白和轻链蛋白,这两种蛋白与鳞翅目和毛翅目的重链蛋白和轻链蛋白具有同源性。石蚕丝在水中保持粘性以及在石蚕丝断裂的情况下依然具有拉伸性是石蚕丝的重要特征。实验通过PCR的方法,克隆石蚕轻链的基因。分析其碱基组成、氨基酸排列序列、亲水性与疏水性,为将来充分的研究石蚕丝提供实验数据。(本文来源于《智富时代》期刊2019年01期）
陈艳花[5]（2018）在《家蚕miR-2805和miR-0031-3p对丝素轻链基因BmFib-L表达调控的研究》一文中研究指出microRNAs(miRNAs)是一类内源性功能小RNA,在动物中广泛参与细胞分化、发育形态、神经系统发育、肌肉的发育和维持细胞存活等方面的调控,主要在转录后水平通过降解靶基因mRNA、抑制翻译等作用机制调控基因表达。蚕丝蛋白基因的表达不仅有转录因子的协同参与,而且还和miRNAs在转录后水平的调控有着密切的联系。虽然有很多蚕丝蛋白合成调控机制的报道,但其精密的调控机制尚未完全清晰。研究家蚕miRNAs对蚕丝蛋白表达的调控作用,有助于深入了解miRNAs的功能,并为阐明蚕丝蛋白合成调控的分子机制提供新的实验数据。本研究以家蚕丝素轻链基因为靶基因,采用生物信息学分析获得2个候选miRNAs,即miR-2805和miR-0031-3p;在半定量RT-PCR进行表达水平分析的基础上,分别构建靶基因和miRNAs的重组表达载体,利用双荧光素酶报告基因检测系统和qRT-PCR技术,分别在细胞、离体组织和个体水平分析miRNAs对靶基因的调控作用,取得以下主要结果。1、生物信息学预测到2个调控BmFib-L表达的候选家蚕miRNA从miRBase下载家蚕miRNAs和本实验室前期测序获得可能参与蚕丝蛋白调控的35个新家蚕miRNAs,利用生物信息学软件RNAhybrid分析,根据miRNA5’端的第2-8碱基(种子序列)与靶位点的配对水平和折迭自由能<-20.0kcal/mol的原则,筛选出2个对BmFib-L具有潜在调控作用的候选家蚕miRNA,即miR-2805和miR-0031-3p,进行后续的验证实验。2、建立了一种TC-100培养基体外培养丝腺组织进行基因瞬时表达分析的方法取健康家蚕5龄2 d幼虫,解剖获取丝腺组织,放入含有800μL TC-100培养基的12孔细胞培养板中,每孔4条丝腺,27℃培养。将构建的含有绿色荧光蛋白的表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-SV40]用EntransterTM-H4000试剂转染到丝腺组织中,48 h后用荧光显微镜观察,培养基清澈,丝腺组织外形完好、发出亮绿色荧光,表明egfp在丝腺中得到了表达,离体培养丝腺组织进行基因瞬时表达是可行的。该方法的建立为研究蚕丝蛋白基因表达调控的分子机制提供新的技术途径,也为家蚕其他组织的体外培养和研究提供借鉴。3、组织和个体水平证实miR-2805显着上调BmFib-L基因的表达从NCBI中下载miR-2805的前体序列(pre-miR-2805)和BmFib-L 3’UTR序列,分别构建pre-miR-2805的表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-pre-miR-2805-SV40]和BmFib-L 3’UTR重组质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3'UTR-SV40],共转染BmN细胞,检测miR-2805对BmFib-L调控功能;再用人工合成miR-2805的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor),进一步验证miR-2805的功能,结果显示,miR-2805在卵巢来源的BmN细胞中,通过与BmFib-L 3'UTR结合负调控其表达。为了验证miR-2805在家蚕体内对BmFib-L表达的调控作用,分别采用5龄幼虫丝腺离体培养和体腔注射的方法,进行过表达或抑制内源性表达,荧光定量分析结果显示,miR-2805在离体培养丝腺和幼虫体内都具有显着上调BmFib-L表达的作用。4、证实miR-2805通过上调BmAwh和Bmdimm的表达间接调控BmFib-L的表达为了明确细胞和组织及个体水平差异的原因,根据NCBI数据库中转录因子(TF)SGF-1、SGF-3、MBF1、FMBP-1、BmAwh和Bmdimm的序列,设计引物;以上述个体注射处理幼虫RNA为模板,A3为内参,qRT-PCR技术定量分析了体内过表达miR-2805或抑制表达后,丝腺细胞特异性转录因子的表达水平。结果显示,miR-2805能促进BmAwh和Bmdimm的表达。而且生物信息学分析显示miR-2805能结合BmAwh的CDS区和Bmdimm的5’UTR。因此,我们推测miR-2805通过BmAwh和Bmdimm间接上调BmFib-L基因的表达。5、体内体外实验证实miR-0031-3p抑制BmFib-L基因的表达按照上述同样的方法,构建miR-0031-3p表达载体,并人工合成miR-0031-3p的mimic、mimic negative、inhibitor和inhibitor negative。在细胞水平进行过表达和抑制内源性表达验证,结果显示miR-0031-3p抑制BmFib-L基因表达。并进一步在组织水平进行抑制功能验证,将miR-0031-3p的inhibitor及其negative control转染到放有丝腺组织的培养孔中,荧光定量PCR检测靶基因BmFib-L的表达量。结果显示,inhibitor抑制miR-0031-3p的作用,促使BmFib-L的表达量上升,即miR-0031-3p能够下调BmFib-L的表达。采用5龄2d幼虫体腔注射方法进行体内验证,结果再次表明,miR-0031-3p抑制BmFib-L 3’UTR基因的表达。研究结果有利于深入理解家蚕miRNA的功能,为蚕丝蛋白表达调控分子机理提供新的实验数据。(本文来源于《江苏科技大学》期刊2018-12-10）
刘卫刚,韩坤煌,谢芳靖,邹鹏飞,张子平[6]（2018）在《大黄鱼免疫球蛋白M重链基因全长cDNA序列的克隆与表达》一文中研究指出从本实验室自建的大黄鱼表达标签数据库中获取了大黄鱼免疫球蛋白M重链(LcIgMH)基因片段,并以此设计SMART-RACE引物,最终得到1917 bp的全长c DNA序列。经分析发现其含6 bp的5'非编码区(5'UTR)、176 bp的3'UTR以及1738 bp的开放阅读框(ORF);预测的ORF共编码584个氨基酸,蛋白质分子量为65. 2 ku,等电点为5. 84;利用Singal P 4. 1 Server发现其5'端含有信号肽(1-19 aa);Blast P Server的结果显示,其与红笛鲷的IgMH序列一致性最高,达到64%;利用IMGT/Domain Gap Align进行重链可变区与恒定区预测,发现含有1个重链可变区与4个重链恒定区,同时,预测还发现可变区含有典型的3个高变区与4个骨架区结构。实时荧光定量PCR结果显示该基因在头肾与脾脏中大量表达,并显着高于其他各组织,同时雌雄鱼LcIgMH在各组织中表达量均无显着性差异,表明LcIgMH表达与性别无关。注射副溶血弧菌进行感染4 d后,脾脏内LcIgMH表达量最高,并且与对照组之间存在显着性差异(P <0. 05),但感染后第8天的表达水平已与对照组无显着性差异(P> 0. 05),显示LcIgMH与大黄鱼的免疫应答反应相关。(本文来源于《集美大学学报(自然科学版)》期刊2018年06期）
王佳佳,李健,葛倩倩,高海钰,李吉涛[7]（2019）在《脊尾白虾肌球蛋白重链和肌球蛋白轻链基因的克隆与表达分析》一文中研究指出肌球蛋白重链和肌球蛋白轻链是粗肌丝的重要组成单位,其表达量的高低影响肌纤维的组成和肌肉生长。为了解析肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,MHC)和肌球蛋白轻链(Myosin light chain,MLC)基因在脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)生长发育中的作用,采用RACE技术,克隆了脊尾白虾EcMHC2、EcMLC1全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR方法分析了EcMHC2、EcMLC1在脊尾白虾不同组织、不同幼体发育时期及大小差异个体在不同生长时期的表达特征。研究显示,脊尾白虾EcMHC2基因(GenBank:MG545144)全长5 929bp,开放阅读框5 727bp,编码1 909个氨基酸;脊尾白虾EcMLC1基因(GenBank:MG545145)全长1 506bp,开放阅读框459bp,编码153个氨基酸。脊尾白虾肌球蛋白重链和肌球蛋白轻链在系统进化上与其它十足目甲壳动物的关系较近。脊尾白虾EcMHC2、EcMLC1在各组织中均有表达,但主要在肌肉组织内表达。在脊尾白虾幼体发育的不同时期,EcMHC2、EcMLC1在溞状幼体Ⅱ期的表达量显着高于溞状幼体的其它时期;仔虾第一天,EcMHC2、EcMLC1的表达量显着高于其它时期。在脊尾白虾生长的四个阶段中,大个体组EcMHC2的表达量均显着的高于小个体组;60、80和120日龄时期,大个体组的EcMLC1表达量显着的高于小个体组;在大个体和小个体组中,EcMHC2、EcMLC1在80日龄的表达量最高。脊尾白虾EcMHC2、EcMLC1在大个体组与小个体组的差异表达提示它们在脊尾白虾生长发育过程中发挥重要作用。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
陈艳花,蒋涛,谭志承,薛鹏,许瑾[8]（2018）在《家蚕miR-2805体内上调丝素轻链基因BmFib-L的表达》一文中研究指出MicroRNA是生物体内的天然调节性微小RNA,主要在转录后水平上对基因表达进行调控,参与各个生命活动过程。本实验以家蚕丝素轻链基因BmFib-LmRNA 3’UTR为靶标,通过生物信息学分析筛选获得能与之互补的家蚕miR-2805,分别构建miR-2805表达载体pcD NA3.0[ie1-egfp-pre-mir-2805-SV40]和Bm Fib-L 3’UTR融合荧光素酶报告基因重组质粒pG L3.0[A3-luc-Fib-L-3'UTR-SV40],以海肾荧光素酶表达载体pRL-CMV为内参,共转染家蚕BmN细胞,通过检测双荧光素酶活性验证miR-2805的功能;再用人工合成miR-2805的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor),进一步验证miR-2805的功能,结果显示,miR-2805在卵巢来源的BmN细胞中,通过与Bm Fib-L 3'UTR结合负调控其表达。为了验证miR-2805在家蚕体内对BmF ib-L表达的调控作用,分别采用5龄幼虫丝腺离体培养和体腔注射的方法,分析转染表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-pre-mir-2805-SV40]、mimic、inhibitor+pcD NA3.0[ie1-egfp-pre-mir-2805-SV40]和pcD NA3.0[ie1-egfp-SV40]后靶基因表达水平的变化,荧光定量分析结果显示,miR-2805在离体培养丝腺和幼虫体内都具有显着上调BmF ib-L表达的作用。研究结果有利于阐明家蚕miR NA功能和蚕丝蛋白表达调控分子机理。(本文来源于《中国蚕学会2018年学术年会论文集》期刊2018-10-11）
付晓红,赵敏,余云湖,周航,付臣志[9]（2018）在《Ⅲ型胶原蛋白α1链基因rs1800255多态性与颅内动脉瘤发病关系的系统评价》一文中研究指出目的系统评价Ⅲ型胶原蛋白α1(COL3A1)基因rs1800255 G>A多态性与颅内动脉瘤(IA)发病关系。方法截止2017年7月31日,联合检索NCBI PubMed、中国引文数据库(CNKI)及万方数据库等关于rs1800255G>A多态性与颅内动脉瘤发病相关病例-对照研究。应用Stata 12.0软件检测所纳入研究进行发表偏倚及异质性检验,以合并效应的OR及95%置信区间(95%CI)评估rs1800255 G>A多态性与颅内动脉瘤发病风险的关系。结果共6个研究数据,包含3 664例研究对象纳入研究。Meta合并分析结果显示,在显性遗传模型下,rs1800255 G>A多态性与颅内动脉瘤发病相关,与GG基因型比较,A等位基因携带者颅内动脉瘤的发病风险增高,整体合并效应的风险比[OR=1.68(95%CI:1.43,1.98)];隐性模型下,与GG+GA基因型比较,AA基因型可升高颅内动脉瘤的发病风险,合并效应的风险比[OR=1.62(95%CI:1.12,2.35)]。结论 COL3A1基因rs1800255 G>A多态性可能影响个体对颅内动脉瘤的易感性。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2018年18期）
张威[10]（2018）在《AAV介导的人FⅧ重链与大鼠FⅧ轻链基因治疗血友病甲的研究》一文中研究指出研究目的:血友病甲(HA)的基因治疗,可以克服传统替代疗法的弊端,并且通过构建有较高表达效率的FⅧ表达元件,从而降低转运载体(AAV)的剂量,降低免疫反应,可在一定程度上减少抑制物的形成。关于提高FⅧ的表达效率,除密码子优化策略以外,也有研究表明,不同物种来源的FⅧ,其生物学活性可比人FⅧ(hFⅧ)活性高,然而关于比较大鼠FⅧ(rFⅧ)与hFⅧ活性的研究未见相关报道,并且基于rFⅧ与hFⅧ在核苷酸及氨基酸水平均有较高的同源性(分别为61%、51%),我们研究的目的是想通过比较rFⅧ与hFⅧ活性差异,通过差异氨基酸替换的方法,对hFⅧ序列进行点突变,进而期望为AAV介导的HA的基因治疗及构建有较高表达效率的FⅧ表达元件提供基础研究数据。研究方法:我们将hFⅧ-BDD-SQ、rFⅧ-BDD SQ、hHC、hLC、rHC、rLC分别克隆到带有CB promoter(泛表达)和ApoE-hAAT promoter(肝脏特异表达)的质粒表达载体中,采取单链策略及HC、LC分开的双链策略,转染293T和HepG2细胞,收转染后指定时间点的培养上清,检测FⅧ的活性(APTT法)及转染上清中FⅧ的抗原表达量(ELISA及Western blot法)。质粒高压注射HA小鼠,取高压注射后指定时间点小鼠外周血血浆样本,进行FⅧ的活性和抗原表达量检测。将ApoE-hAAT promoter携带的hHC、hLC、rHC、rLC分别包装、纯化AAV病毒,按HC:LC=1:1的比例,分为高剂量组(2×10~(13)vg/kg)和中剂量组(8×10~(12)vg/kg),尾静脉注射HA小鼠,每两周采集外周血监测FⅧ在HA小鼠体内的长期表达效果,并评价AAV载体介导的HA基因治疗的安全性。研究结果:我们通过体内外研究发现,rFⅧ活性高于hFⅧ活性。并且,体外细胞转染结果显示,rLC联合hHC能够提高FⅧ的活性,而对FⅧ抗原表达量的影响不大,提高FⅧ比活性约4-5倍;rLC联合hHC提高FⅧ的活性,可排除通过提高转染上清中FⅧ的热稳定性实现,考虑主要受rLC分子本身性质的影响。在体内,HA小鼠高压注射结果显示,rLC能够提高FⅧ的活性和比活性,其比活性提高约4.5倍;AAV病毒携带的hHC、hLC、rLC注入HA小鼠体内,无论是中剂量组还是高剂量组,rLC均能够提高FⅧ的活性,尤其在高剂量组,hHC+rLC与hHC+hLC活性总体具有显着的统计学差异,AAV介导的FⅧ均能够在HA小鼠体内长期表达至36周,且小鼠肝脏功能基本保持正常,在高剂量组有一只小鼠有抑制物产生。研究结论:体内外研究结果提示,rFⅧ活性高于hFⅧ;rLC联合hHC能够提高FⅧ的活性、比活性;AAV介导的FⅧ基因治疗HA小鼠,可使小鼠体内FⅧ长期维持在治疗水平,且总体上,hHC+rLC活性高于hHC+hLC活性;并且rLC与hLC氨基酸序列差异,在提高FⅧ活性、比活性中起主要作用。该研究为AAV介导的HA的基因治疗及构建有着较高表达效率的FⅧ表达元件提供了基础研究数据,也为构建能提高hFⅧ活性的新型FⅧ序列提供了新的选择。(本文来源于《上海交通大学》期刊2018-05-01）
链基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
猪蛔虫病严重危害我国养猪业的发展,通过研究在感染期的表达基因来研究其发育繁殖机制,以达到预防和控制该病的目的已成为猪蛔虫研究的发展趋势。本研究以β-actin为内参,采用半定量RT-PCR方法鉴定分析猪蛔虫微管蛋白α-链基因(13E09)丰度随不同阶段虫体在虫体不同发育阶段的mRNA表达水平的变化,结果显示,该在感染期幼虫呈高丰度表达外,肠四期即(L4)幼虫也有多量表达,在雄虫、虫卵期也有少量表达,但在雌虫和肺叁期幼虫均未检测出该基因的表达,该基因是在感染期幼虫呈高丰度表达的基因,可能在感染宿主过程中起重要作用。这为进一步研究该基因的功能提供了科学依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
链基因论文参考文献
[1].叶青,张莹莹,王晶晶,毛建华.Ⅳ型胶原α5链基因突变致奥尔波特综合征两家系遗传学分析[J].浙江大学学报(医学版).2019
[2].吴金妃.猪蛔虫微管蛋白α-链基因(13E09)在不同发育期的mRNA表达研究[J].福建畜牧兽医.2019
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[5].陈艳花.家蚕miR-2805和miR-0031-3p对丝素轻链基因BmFib-L表达调控的研究[D].江苏科技大学.2018
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[8].陈艳花,蒋涛,谭志承,薛鹏,许瑾.家蚕miR-2805体内上调丝素轻链基因BmFib-L的表达[C].中国蚕学会2018年学术年会论文集.2018
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