木犀草素与叶酸对黄曲霉毒素B1致食管上皮细胞毒性及MTHFR基因高甲基化的影响

木犀草素与叶酸对黄曲霉毒素B1致食管上皮细胞毒性及MTHFR基因高甲基化的影响

论文摘要

目的:研究木犀草素(luteolin,LUT)与叶酸(folic acid,FA)对黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)诱导损伤的人正常食管上皮细胞(human normal esophageal epithelial cells,HEEC)MTHFR基因甲基化的影响。方法:不同浓度(0、13、25、50、100、200 μmol/L)AFB1染毒HEEC 24、48、72 h,CCK-8法检测细胞活力;将HEEC分为空白对照组、AFB1染毒组(200 μmol/L)、LUT干预组(160 μmol/L)、FA干预组(20、200 μmol/L)以及联合干预组(160 μmol/L LUT+20 μmol/L FA、160 μmol/L LUT+200 μmol/L FA),处理24 h后CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blot检测MTHFR蛋白的表达水平,MassARRAY甲基化检测MTHFR基因启动子区甲基化的情况。结果:不同浓度的AFB1染毒HEEC 24、48、72 h均可以抑制细胞增殖,而经LUT和FA干预后,与AFB1染毒组相比,LUT及联合干预组细胞周期阻滞显著减少(P<0.05),细胞抑制率及凋亡率显著降低(P<0.05),MTHFR蛋白表达上调有所改善(P<0.05)。且LUT与FA及二者联合对MTHFR基因启动子区高甲基化水平均有降低作用(P<0.05)。结论:AFB1对HEEC有毒性作用,表现在增殖抑制、周期阻滞,促进凋亡,上调了MTHFR蛋白的表达,LUT干预可减弱这些损伤,对AFB1所致毒性起到一定的保护作用。AFB1提高了MTHFR基因启动子区甲基化水平,导致表观遗传的改变。LUT与FA及联合作用可以降低该甲基化水平,改善该表观遗传的改变。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 细胞培养
  •     1.3.2 AFB1对HEEC活力的影响
  •     1.3.3 LUT与FA对AFB1染毒的HEEC的干预
  •       1.3.3. 1 CCK-8法检测细胞活力
  •       1.3.3. 2 流式细胞术检测细胞周期
  •       1.3.3. 3 流式细胞术检测细胞凋亡
  •       1.3.3. 4 Western Blot检测MTHFR蛋白表达情况
  •       1.3.3. 5 MassARRAY甲基化检测HEEC的MTHFR基因启动子区甲基化情况
  •   1.4 数据统计分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 AFB1对HEEC活力的影响
  •   2.2 LUT及FA对AFB1染毒的HEEC的影响
  •     2.2.1 LUT及FA对AFB1染毒细胞增殖的影响
  •     2.2.2 LUT及FA对AFB1染毒的HEEC细胞周期的影响
  •     2.2.3 LUT及FA对AFB1染毒HEEC细胞凋亡的影响
  •     2.2.4 Western Blot检测MTHFR蛋白表达结果
  •     2.2.5 MassARRAY甲基化检测HEEC的MTHFR基因启动子区甲基化情况
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 付凌萌,吴逸,王菁,魏婕,王少康,孙桂菊

    关键词: 木犀草素,叶酸,黄曲霉毒素,人正常食管上皮细胞,基因,甲基化,表观遗传

    来源: 食品科学 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 东南大学公共卫生学院营养与食品卫生学系

    基金: 国家自然科学基金面上项目(81673147,81372985)

    分类号: TS201.3

    页码: 142-150

    总页数: 9

    文件大小: 3611K

    下载量: 116

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