桂郁金醇提物含药血清对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

桂郁金醇提物含药血清对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

论文摘要

目的:探究桂郁金醇提物含药血清对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用。方法:32只SD大鼠随机分为4组:空白对照组及桂郁金醇提物高(10 g/kg)、中(5 g/kg)、低(1 g/kg)剂量组,灌胃给药2次/d,连续3 d,最后一次给药1 h后,用10%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,制备含药血清。使用不同浓度的H2O2诱导HUVEC细胞3 h,建立细胞氧化应激模型,采用CCK-8试剂检测细胞存活率,明确H2O2的最适造模浓度为800μmol/L;利用CCK-8试剂进行含药血清对HUVEC细胞及H2O2损伤的HUVEC细胞存活率的影响;利用试剂盒检测细胞培养上清液中SOD、GSH-Px、MDA、LDH、NO、t-PA、PAI-1、IL-6、TNF-α水平;采用Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡情况;利用RT-PCR技术检测细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达。结果:与模型组比较,各剂量含药血清均能升高细胞存活率,高剂量能升高SOD、GSH-Px、NO、PAI-1水平,降低LDH、MDA、t-PA、IL-6、TNF-α水平及Caspase-3、Bax mRNA表达,升高Bcl-2/Bax比值;中剂量能升高SOD、GSH-Px、NO、PAI-1水平及Bcl-2 mRNA表达及Bcl-2/Bax比值,降低LDH、t-PA水平及Caspase-3 mRNA表达;低剂量能升高NO水平,降低t-RA水平及Caspase-3 mRNA表达。结论:桂郁金醇提物含药血清对H2O2诱导的HUVEC细胞具有保护作用,其机制可能与升高SOD、GSH-Px活性,降低LDH、MDA含量,升高扩血管因子NO,调节纤溶系统,减少炎症因子含量,减少细胞凋亡,调控Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达有关。

论文目录

  • 1 材料与仪器
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 细胞株
  •   1.3 药物与试剂
  •   1.4 主要仪器
  • 2 方法
  •   2.1 桂郁金醇提物含药血清的制备
  •   2.2 HUVEC细胞培养
  •   2.3 细胞传代及种板
  •   2.4 过氧化氢(H2O2)浓度的筛选
  •   2.5 不同浓度含药血清对HUVEC细胞存活率的影响
  •   2.6 6%、15%含药血清对H2O2损伤的HUVEC细胞活性的影响
  •   2.7 HUVEC细胞上清液的制备及指标检测
  •   2.8 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤的HUVEC细胞中BcL-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达的影响
  •   2.9 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤的HUVEC细胞凋亡的检测
  •   2.10 统计学处理
  • 3 结果
  •   3.1 不同浓度H2O2对HUVEC细胞增殖的影响
  •   3.2 不同浓度含药血清作用不同时间对HUVEC细胞存活率的影响
  •   3.3 6%、15%桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤HUVEC细胞存活率的影响
  •   3.4 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤HUVEC细胞上清液中LDH、MDA、SOD、GSH-Px、NO的影响
  •   3.5 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤HUVEC细胞上清液中t-PA和PAI-1水平的影响
  •   3.6 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤HUVEC细胞上清液中IL-6、TNF-α水平的影响
  •   3.7 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤HUVEC细胞凋亡的影响
  •   3.8 桂郁金醇提物含药血清对H2O2损伤HUVEC细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达的影响
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 唐丽清,覃琴,冯柏林,白鹭,李鸿,杨秀芬

    关键词: 桂郁金醇提物,人脐静脉内皮细胞,过氧化氢,含药血清,保护作用

    来源: 中药材 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 广西中医药大学药学院药理学教研室

    基金: 国家自然科学基金(81260652,81060353),广西自然科学基金重点项目(2015GXNSFDA139023),广西八桂学者“中药创新理论与药效研究”(桂科政字[2013]25号),广西壮瑶药重点实验室(桂科基字[2014]32号),壮瑶药协同创新中心(桂教科研[2013]20号),广西重点学科壮药学(桂教科研[2013]16号),硕士研究生科研创新项目(YCSW2018168)

    分类号: R285.5

    DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2019.11.034

    页码: 2651-2657

    总页数: 7

    文件大小: 789K

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