导读:本文包含了受磷蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,心肌,大鼠,高血压,近交,阿霉素,磷酸化。
受磷蛋白论文文献综述
王威,王月,张美香,殷文江,李周儒[1]（2018）在《兔后肢失用后兰诺定受体与受磷蛋白mRNA转录水平的变化》一文中研究指出探讨参与肌浆网中钙离子释放的兰诺定受体(ryanodine receptor,RyR)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)的mRNA转录水平与失用性肌萎缩的关系。将依次编号的30只新西兰大白兔按随机数字法分为6组。分别设置为对照组和实验组5组。实验组采用长腿石膏固定法建立兔失用性肌肉萎缩模型,于2周、4周、6周、8周、10周分别处死兔子5只。对照组于第10周处死兔子5只。取固定侧肌肉组织,用定时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)法测定兔固定侧肌肉的RyR与PLN的基因转录水平。RyR的mRNA转录水平在第2周升高,自第2周开始转录水平逐渐下降。PLN的mRNA转录水平表现为逐渐下降的趋势。在失用性萎缩发展过程中,PLN和RyR mRNA随着肌肉萎缩程度的不断加深呈现趋势性变化,可望用于失用性肌萎缩程度的推断。(本文来源于《科学技术与工程》期刊2018年27期）
李洁白,王臻,董昕,沈晓旭[2]（2018）在《补阳还五汤对舒张性心衰大鼠心肌钙转运蛋白SERCA2a及受磷蛋白的影响》一文中研究指出目的运用补阳还五汤对舒张性心衰(diastolic heart failure,DHF)模型大鼠进行干预,观察补阳还五汤对DHF大鼠左心室舒张功能的影响,检测钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白(sarcoplasmic reticulum Ca~(2+)-ATPase2a,SERCA2a)及受磷蛋白(phospholamban,PLB)的表达量,初步探寻补阳还五汤治疗DHF的药物干预靶点。方法选用60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组15只和模型组45只,利用腹主动脉缩窄法建立舒张性心衰大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、中药组、西药组,每组11只。其中中药组、西药组灌胃给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水,各组均每日灌胃1次。药物干预8周后,观察药物对超声舒张功能相关指标的影响,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测SERCA2a和PLB的蛋白表达量。结果与模型组相比,中药组大鼠一般状况好转,超声心动图检测二尖瓣环舒张早期运动速度/二尖瓣环舒张晚期运动速度(e’/a’)显着提高(P<0.01)。模型组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量与假手术组相比均有下降(P<0.05),而中药组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量较模型组则升高(P<0.05)。各项结果中药组与西药组差异均无统计学差异(P>0.05)。结论补阳还五汤可改善DHF大鼠左室舒张功能,在一定程度上延缓病情发展,且其的潜在作用靶点可能是心肌钙转运蛋白SERCA2a与PLB。(本文来源于《环球中医药》期刊2018年07期）
王丹宁[3]（2018）在《受磷蛋白及钙-ATP酶的生成、转运，对正常及心肌梗死大鼠心肌细胞钙调控的影响》一文中研究指出第一章成年SD大鼠原代心肌细胞分离培养,PLB及SERCA2a重组腺病毒载体的纯化及转染研究目的分离得到成年大鼠原代心肌细胞并成功培养,分离、纯化包含犬PLB和SERCA的腺病毒载体,并转染至分离成功的大鼠原代心肌细胞中;研究方法采用Lan'gendorff灌流法及Liberase酶解法分离得到成年SD大鼠原代心肌细胞,进一步分离纯化包含犬PLB和SERCA的腺病毒载体,并转染至培养的原代心肌细胞中,观察细胞存活时间及细胞状态,通过免疫组化法、western blot、calcium-imaging观察未转染细胞及转染成功后,心肌细胞PLB及SERCA分布、单个细胞功能等。研究结果1.成功分离出大鼠原代心肌细胞,分离存活率稳定在70-80%,并可稳定培养3-5天;2.包含犬PLB和SERCA2a的腺病毒载体经分离纯化,效价比较高,并可成功转染cos-1细胞,肉眼观测转染成功率达80%以上,western blot检测到新生蛋白成功表达,且含量随病毒浓度增加呈递增趋势;结论Lan'gendorff灌流法分离大鼠原代心肌细胞方法有效可行,成功率高,分离纯化重组腺病毒载体方法成熟且转染率高,分离及转染后原代心肌细胞状态稳定,可进行后续实验。第二章正常SD大鼠原代心肌细胞中新生PLB及SERCA2a运输途径及其对心肌细胞自发钙活动、钙离子通道的影响研究目的通过观察大鼠原代心肌细胞培养24h、48h、72h后,观察新生PLB和SERCA从细胞核到细胞质的转运途径,探讨该新生转运途径对心肌细胞自发钙活动及L型钙离子通道的影响;研究方法健康成年SD大鼠8只,采用Lan'gendorff灌流法及Liberase酶解法分离得到成年SD大鼠原代心肌细胞,包含犬PLB和SERCA的腺病毒载体转染至培养的原代心肌细胞中,观察转染后24h、48h、72h存活细胞状态,通过免疫组化法、western blot、calcium-imaging、膜片钳等方法观察心肌细胞中新生成的PLB及SERCA分布、由细胞核向细胞质转运的途径、对细胞钙离子电流的影响等。结果以x±s表示,多组之间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用方差分析,不同距离/时间点资料的比较应用重复测量方差分析,p<0.05表示差异具有统计学意义,所有统计学分析采用SPSS 24.0软件完成。研究结果1.8只SD大鼠均成功分离出原代心肌细胞,转染成功,并可培养24h、48h、72h;2.正常原代心肌细胞中,PLB在核膜及肌浆网上均有分布,且两者分布含量大于2:1;SERCA2a在核膜及肌浆网上同样均有分布,且两者分布含量约为1:1,p<0.05;3.包含犬PLB/SERCA2a的重组腺病毒转染培养的心肌细胞后,24h荧光染色结果可见PLB主要局限在核膜上,而SERCA2a已经开始由核膜向外扩散,观察48h荧光染色结果发现,PLB仍然以核膜为主,部分分布在肌浆网上,SERCA2a则已经完全分布至肌浆网,接近自身稳态的分布;72h观察两者均已达到稳态分布,western blot结果与荧光染色观察结果一直,细胞内新生的PLB/SERCA2a含量随着时间延长呈递增趋势;4.对比转染前后心肌细胞钙成像及全细胞膜片钳实验结果,转染后心肌细胞自发钙活动并未发生明显改变,L型钙通道电流没有明显影响,差异没有统计学意义;结论正常大鼠心肌细胞中新生PLB及SERCA2a遵循NEST途径转运,PLB在转运途中在核膜上的滞留及其自身的分布特点对正常心肌细胞的钙调控未见明显影响。第叁章心肌梗死SD大鼠原代心肌细胞PLB及SERCA2a的运输途径,及其对心肌细胞自发钙活动、钙离子电流的影响研究目的心肌梗死大鼠原代心肌细胞培养24h、48h、72h后,观察新生PLB和SERCA从细胞核到细胞质转运途径,探讨该新生转运途径对心肌细胞自发钙活动及钙离子通道的影响;研究方法健康成年SD大鼠8只,结扎前降支构建梗死模型,造模成功后饲养4周,采用Lan'gendorff灌流法及Liberase酶解法分离得到成年SD大鼠原代心肌细胞,将含犬PLB和SERCA的腺病毒载体转染至培养的原代心肌细胞中,观察转染后24h、48h、72h,存活细胞状态,通过免疫组化法、western blot法、calcium-imaging、全细胞膜片钳等方法观察心肌细胞中新生成的PLB及SERCA分布、由细胞核向细胞质转运的途径、对心肌细胞自发钙活动、相关电生理功能的影响等。结果以x±s表示,多组之间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用方差分析,不同距离/时间点资料的比较应用重复测量方差分析,p<0.05表示差异具有统计学意义,所有统计学分析采用SPSS 24.0软件完成研究结果1.8只心梗大鼠均成功分离出原代心肌细胞,转染后可成功培养24h、48h、72h;2.心梗鼠的腺病毒转染后的原代心肌细胞中,24h荧光染色结果可见PLB主要局限在核膜上,而SERCA2a已经开始由核膜向外扩散,观察48h荧光染色结果发现,PLB仍然以核膜为主,SERCA2a则已经完全分布至肌浆网,接近自身稳态的分布;72h观察两者均已达到稳态分布,western blot结果与荧光染色观察结果一直,细胞内新生的PLB/SERCA2a含量随着时间延长呈递增趋势;3.对比转染前后心梗鼠心肌细胞钙成像实验结果,转染后的心肌细胞自发钙活动明显增加,荧光强度较未转染的心肌细胞增强(p<0.05,差异具有统计学意义);采用全细胞膜片钳记录未转染及转染后24小时的心肌细胞L型钙通道电流,分别记录转染、未转染细胞各12个,记录到的钙电流在转染后,较未转染细胞的钙电流减少,p<0.05,差异具有统计学意义。结论心梗大鼠心肌细胞中新生PLB及SERCA2a同样遵循NEST途径转运,PLB在转运途中在核膜上的滞留时间较正常细胞延长,与未转染细胞对比,心肌细胞自发钙活动明显增加,L型钙通道电流减少,可能与梗死后心肌细胞的电不稳定性相关。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2018-05-01）
樊华,杨爱玲,王佑华,彭珑萍,丛丽烨[4]（2018）在《扩心方对扩张型心肌病大鼠肌浆网Ca~(2+)-ATP酶及受磷蛋白的影响》一文中研究指出目的:研究扩心方对阿霉素诱导扩张型心肌病模型大鼠心功能、心肌损伤的保护作用,探讨扩心方作用机制。方法:50只Wistar大鼠腹腔注射阿霉素6周建立DCM模型,开始造模4周后随机分为模型组,扩心方高、中、低剂量组,卡托普利组(每组各10只),连续灌胃给药四周,另设10只正常对照。正常组和模型组以生理盐水灌胃。治疗结束后,对各组大鼠进行心脏超声检查,病理形态学检测,以及用反转录-聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法分别检测心肌组织中SERCA2α、PLB的m RNA和蛋白含量。结果:与正常对照组相比,模型组心功能减弱,出现心肌病理损害,SERCA2α与PLB表达异常;与模型组相比,扩心方组可以改善DCM大鼠的心功能、心肌病理学形态,同时,提高SERCA2αm RNA和蛋白表达、抑制PLB m RNA和蛋白表达。结论:扩心方能提高DCM大鼠的左心室射血分数和缩短率,减轻心肌损伤,改善心功能,同时调控DCM大鼠SERCA2α、PLB的表达。提示扩心方改善DCM大鼠心功能的作用机制,可能与纠正心肌肌浆网钙调控相关蛋白-SERCA2α、PLB的异常表达相关。(本文来源于《世界科学技术-中医药现代化》期刊2018年02期）
刘梦娜,汪凯,任安经,章卫平,吕建新[5]（2016）在《受磷蛋白重组腺病毒的制备与鉴定》一文中研究指出目的构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具。方法将RT-PCR获得的受磷蛋白PLB cDNA克隆至pShuttle-CMV载体,PmeⅠ酶切线性化后,电转化至含有腺病毒骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,从而获得重组腺病毒载体,PacⅠ酶线性化该重组载体,转染293细胞进行病毒的包装和扩增,经超离心对重组病毒Ad-PLB进行纯化;测定病毒效价后,体外感染大鼠心肌细胞H9C2,Western blot法验证腺病毒病毒介导的重组PLB蛋白表达。结果成功构建了重组腺病毒载体,体外包装制备了PLB的重组腺病毒,扩增纯化后的病毒效价达6.25×10~(10)/ml,能有效介导PLB在心肌细胞中的重组表达。结论过表达受磷蛋白PLB的重组腺病毒载体构建成功,为之后受磷蛋白PLB的相关生物学功能研究奠定了基础。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2016年10期）
钟鑫,王喜尧,梁晓辉,杨东晓,王育文[6]（2016）在《NCA对受磷蛋白敲除小鼠心肌兴奋-收缩偶联的作用》一文中研究指出目的:硝酰基(HNO)在轻微增加细胞内钙的基础上可以显着增加心肌肌丝对钙离子的反应性。本研究中,我们应用崭新的HNO供体乙酸1-亚硝基环己酯(NCA)来观察HNO对受磷蛋白敲除(PLB-KO)小鼠心室梳状肌的作用。方法:小鼠右心室的完整梳状肌被连接在张力换能器与刺激电极之间,肌小节长度设定在2.2~2.3μm之间,K-H液表面灌流后,Fura-2经玻璃微电极负载进行离子透入法检测[Ca~(2+)]i,同时测定心肌收缩张力的变化。结果:PLB-KO小鼠心室梳状肌比野生型(WT)小鼠具有更高的钙瞬变及收缩力,同时展示负性收缩力-收缩频率相关性(FFR)。NCA(2.5μmol/L)在不同浓度细胞外钙([Ca~(2+)]o)条件下增加PLB-KO及WT小鼠心肌收缩力,但并不影响PLB-KO小鼠的负性FFR。稳态条件下2组小鼠去肌膜梳状肌的收缩力-钙离子相关性无显着性差异,NCA则增加去肌膜梳状肌的钙离子的反应性。结论:NCA提供的HNO通过增加PLB-KO及WT小鼠心肌肌丝对钙离子的反应性而增强心肌收缩力;心肌细胞内钙瞬变的增加伴随收缩力的增强表明HNO可改善钙离子活性,进一步证实HNO作为正性肌力药物的作用效果。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2016年03期）
孙黎明,汪文杰,陈开祥,周哲,王怡练[7]（2013）在《前胡丙素对自发性高血压大鼠心肌受磷蛋白表达及磷酸化水平的影响》一文中研究指出目的:探讨前胡丙素对自发性高血压大鼠(SHR)心肌重构的影响及可能机制。方法:SHR 20只,完全随机分为药物组[前胡丙素20 mg/(kg.d)灌胃,n=10],对照组(n=10),另设SD大鼠10只为正常组,干预8周,计算心脏质量指数及左室质量指数,光镜观察左心室心肌细胞形态和结构的变化,透射电镜观察心肌细胞超微结构及线粒体损伤情况,然后取左心室心肌制备匀浆,提取RNA,用半定量RT-PCR法测定受磷蛋白的基因表达水平,用液体闪烁计数法测定受磷蛋白的磷酸化水平。结果:与对照组比较,药物组用前胡丙素治疗8周后,心脏及左室质量指数明显下降(P<0.05),SHR心肌肥厚等病理改变明显改善,左心室心肌受磷蛋白mRNA表达上调(P<0.05),心肌受磷蛋白磷酸化水平增加(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:前胡丙素有改善心肌重构作用,可能是通过上调SHR心肌肌浆网受磷蛋白表达及磷酸化水平而实现的。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2013年04期）
陈开祥,周新华,秦爱建[8]（2012）在《受磷蛋白磷酸化位点Ser16在大鼠心力衰竭中的作用及机制》一文中研究指出心力衰竭是各种心脏疾病的终末阶段,研究心力衰竭的发生机制对该病的防治极其重要。心肌舒缩功能与肌浆网钙泵(SERCA2a)的活性密切相关,SERCA2a活性主要由受磷蛋白(PLB)调控,PLB是心脏心肌收缩和β-肾上腺素能激活的基本调节蛋白[1]。本实验通过建立异丙肾上腺素诱导心力衰竭大鼠模型,观察心力衰竭大鼠(本文来源于《实用临床医药杂志》期刊2012年24期）
汪文杰,孙黎明[9]（2012）在《前胡丙素对自发性高血压大鼠血压及心肌受磷蛋白表达的影响》一文中研究指出目的探讨前胡丙素对自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响及可能机制。方法选择SHR 20只,随机分为药物组(n=10),对照组(n=10),另选SD大鼠10只为SD组。药物组给予前胡丙素20mg/kg-1.d-1灌胃,其余对照组和SD组同等容积聚乙二醇400灌胃,干预8周,运用透射电镜观察心肌细胞超微结构及线粒体损伤情况,并用半定量反转录PCR(RT-PCR)法测定受磷蛋白(PLB)的基因表达水平。结果治疗前药物组大鼠的收缩压[(184.3±19.7)mm Hg]与对照组[(183.3±17.2)mmHg]接近,与SD组相比明显升高,差异有统计学意义,治疗后药物组大鼠收缩压[(149.3±12.6)mm Hg]比对照组大鼠心肌[(201.0±11.0)mm Hg]低(P<0.05),对照组PLB表达水平与SD组相比有明显的降低,治疗后药物组大鼠心肌PLB的表达较对照组上调(P<0.05)。结论前胡丙素有一定的降压作用,可能是通过上调SHR心肌肌质网PLB的基因表达。(本文来源于《重庆医学》期刊2012年14期）
陈开祥,祝宝华,秦爱建[10]（2012）在《受磷蛋白磷酸化位点Ser~(16)在心肌缺氧预适应中的作用》一文中研究指出目的探讨由蛋白激酶A(PKA)介导的受磷蛋白磷酸化位点16-丝氨酸(PLB-Ser16)在缺氧预适应中对心肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的调控作用。方法体外培养的乳鼠心肌细胞随机分成四组:正常培养(C)组,缺氧-复氧损伤(H-R)组、缺氧预适应(HP)组和H-89干预(H-89)组。检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)、[Ca2+]i和细胞凋亡率。用免疫印迹法和放射自显影法测定PLB的蛋白表达和磷酸化水平。结果 H-R组的LDH值、[Ca2+]i及细胞凋亡指数均显着高于C组和HP组(P<0.05);H-R组PLB的蛋白表达和磷酸化水平较C组均降低(P<0.05),HP组较C组增加(P<0.05);H-89组的LDH值、胞内钙荧光强度值及细胞凋亡指数均较HP组明显升高(P<0.05),而PLB的蛋白表达和磷酸化水平显着下调(P<0.05)。结论缺氧预适应对心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用可能与PLB磷酸化水平上调有关;PKA抑制剂H-89可降低这种心肌保护作用。(本文来源于《江苏医药》期刊2012年08期）
受磷蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的运用补阳还五汤对舒张性心衰(diastolic heart failure,DHF)模型大鼠进行干预,观察补阳还五汤对DHF大鼠左心室舒张功能的影响,检测钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白(sarcoplasmic reticulum Ca~(2+)-ATPase2a,SERCA2a)及受磷蛋白(phospholamban,PLB)的表达量,初步探寻补阳还五汤治疗DHF的药物干预靶点。方法选用60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组15只和模型组45只,利用腹主动脉缩窄法建立舒张性心衰大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、中药组、西药组,每组11只。其中中药组、西药组灌胃给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水,各组均每日灌胃1次。药物干预8周后,观察药物对超声舒张功能相关指标的影响,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测SERCA2a和PLB的蛋白表达量。结果与模型组相比,中药组大鼠一般状况好转,超声心动图检测二尖瓣环舒张早期运动速度/二尖瓣环舒张晚期运动速度(e’/a’)显着提高(P<0.01)。模型组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量与假手术组相比均有下降(P<0.05),而中药组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量较模型组则升高(P<0.05)。各项结果中药组与西药组差异均无统计学差异(P>0.05)。结论补阳还五汤可改善DHF大鼠左室舒张功能,在一定程度上延缓病情发展,且其的潜在作用靶点可能是心肌钙转运蛋白SERCA2a与PLB。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
受磷蛋白论文参考文献
[1].王威,王月,张美香,殷文江,李周儒.兔后肢失用后兰诺定受体与受磷蛋白mRNA转录水平的变化[J].科学技术与工程.2018
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[4].樊华,杨爱玲,王佑华,彭珑萍,丛丽烨.扩心方对扩张型心肌病大鼠肌浆网Ca~(2+)-ATP酶及受磷蛋白的影响[J].世界科学技术-中医药现代化.2018
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[8].陈开祥,周新华,秦爱建.受磷蛋白磷酸化位点Ser16在大鼠心力衰竭中的作用及机制[J].实用临床医药杂志.2012
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[10].陈开祥,祝宝华,秦爱建.受磷蛋白磷酸化位点Ser~(16)在心肌缺氧预适应中的作用[J].江苏医药.2012
论文知识图
