导读:本文包含了层黏素受体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:胆管癌,层黏素受体,Fas配体,RNA干扰
层黏素受体论文文献综述
高占峰,李天宇,王曙光[1]（2012）在《抑制层黏素受体过表达在胆管癌细胞免疫逃逸中的作用》一文中研究指出目的探讨抑制层黏素受体(LNR)过表达下调Fas配体基因表达在胆管癌免疫逃逸中的作用。方法采用流式细胞仪分选出过表达层黏素受体的胆管癌细胞QBC939,用脂质体转染法转染层黏素受体RNA干扰质粒和阴性对照质粒各6μg至过表达层黏素受体的胆管癌细胞QBC939中,用实时荧光定量PCR法检测未转染组、阴性组和阳性组QBC939细胞Fas配体基因的表达情况。结果分选后的QBC939细胞层黏素受体的表达率高达95%,继续转染层黏素受体RNA干扰质粒后,其FasL基因表达水平较未转染组和转染阴性对照质粒组明显降低。结论 LNR过表达在胆管癌免疫逃逸中的作用可能是通过Fas-FasL信号通路实现的。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2012年04期）
高占峰,李天宇,王曙光[2]（2012）在《层黏素受体靶向RNA干扰质粒载体的构建》一文中研究指出目的构建层黏素受体RNA干扰质粒,为探讨抑制层黏素受体过表达在胆管癌免疫逃逸中的作用奠定基础。方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入pGenesil-3获得RNA干扰载体pGenesil-shLNR。脂质体法将pGenesil-shLNR导入胆管癌细胞QBC939,免疫组化法检测对胆管癌细胞QBC939LNR表达的抑制情况。结果所构建的载体pGenesil-shLNR能够干扰QBC939细胞中LNR的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G-418筛选稳定转化的细胞株。结论成功构建了抑制胆管癌细胞QBC939表达LNR的RNA干扰质粒载体。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2012年03期）
邓小明,王曙光,张丰深,孙海,杨星[3]（2011）在《KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体的影响》一文中研究指出目的研究KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体(LNR)表达的影响。方法体外培养人胆管癌QBC939细胞,分为两组:转染空载体pIRES2-EGFP对照组和转染重组真核载体pIRES2-EGFP-KAI1实验组。采用脂质体转染法分别将空载体和重组真核载体转染到QBC939细胞,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株。通过RT-PCR、Western blotting和细胞免疫组化法,分别检测KAI1、LNR的mRNA及蛋白表达水平。结果实验组的KAI1 mRNA、蛋白表达量(分别为0.49±0.071、.06±0.05)均显着高于对照组(分别为0.22±0.02、0.59±0.02,P<0.01);实验组的LNR mRNA、蛋白表达量(分别为0.38±0.04、0.29±0.03)均显着低于对照组(分别为0.73±0.05、0.68±0.02,P<0.05)。与对照组比较,实验组KAI1蛋白在胞质的着色明显增强、LNR着色减弱。结论体外胆管癌QBC939细胞过表达KAI1可导致LNR mRNA和蛋白表达下调。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2011年02期）
邓小明[4]（2008）在《KAI1/CD82在层黏素受体介导胆管癌侵袭和转移中的作用初步探讨》一文中研究指出胆管癌是常见的胆道恶性肿瘤之一,其发病率有呈逐年上升的趋势,而影响其治疗和病人远期生存率的主要因素是肿瘤的局部侵袭和转移。肿瘤的侵袭和转移是多基因参与、多步骤完成的复杂过程,其中肿瘤细胞黏附、运动能力的改变,以及与细胞外基质间的相互作用是肿瘤发生侵袭转移的基础,也是肿瘤侵袭转移的关键环节。探讨影响这些环节的调控因素将有助于我们更深入的理解胆管癌侵袭和转移的机制。层黏素受体(laminin receptor,LNR)是介导细胞与细胞外基质层黏素(laminin,LN)黏附的跨膜糖蛋白受体,在几乎所有恶性实体肿瘤中表达上调,并与肿瘤的侵袭转移密切相关。LNR与LN特异性结合能诱导肿瘤细胞或宿主细胞分泌IV型胶原酶和基质金属蛋白酶(如MMP-2、MMP-9)等蛋白水解酶,降解基底膜中的LN和IV型胶原蛋白有助于肿瘤细胞的侵袭和转移。Givant-Horwitz等研究表明高转移性肿瘤细胞LNR表达上调还可诱导一系列跨膜信号传导系统的变化,引起细胞外信号调节激酶、c-Jun N-端蛋白激酶和p38 MAPK引发信号级联反应,促进肿瘤细胞的分裂和转移。我们前期研究表明,胆管癌中LNR表达上调并在多个环节介导胆管癌侵袭和转移,而运用LNR反义寡聚核苷酸转染高转移性胆管癌细胞,则能明显抑制LNR表达上调对胆管癌侵袭能力的促进作用。但是什么原因导致LNR表达上调?其分子机制如何?这是深入研究LNR表达上调介导胆管癌侵袭和转移机制的重要环节。KAI1/CD82是新近发现的特异性肿瘤转移抑制基因,定位于人染色体11p11.2,编码含267个氨基酸的蛋白质分子,相对分子量为29.61kD,属于跨膜4超家族(trans- membrane 4 superfamily, TM4SF)成员。KAI1/CD82在前列腺癌、肺癌、乳腺癌、消化管肿瘤、胰腺癌、膀胱癌等大多数肿瘤中表达减少或缺失,且与肿瘤侵袭转移密切相关。KAI1/CD82和其他TM4SF成员与整合素形成复合体,通过PKC、Rho GTPases、Src激酶家族等信号通道介导细胞的黏附,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而抑制转移。Bo He等将KAI1/CD82转染前列腺癌Du145细胞后,发现细胞表面整合素α6减少,降低细胞与细胞外基质LN的黏附而抑制细胞的迁移能力。而LNR与α6共表达、交互影响,并能免疫共沉淀。由此我们推测,胆管癌中LNR表达上调可能与KAI1/CD82表达减少或缺失有关。深入研究KAI1/CD82在LNR介导胆管癌侵袭和转移中的作用,有助于我们深刻理解胆管癌侵袭和转移的调控机制,从而为寻求新的肿瘤治疗策略和方法提供理论依据。本课题正是基于KAI1/CD82和LNR均与肿瘤侵袭转移密切相关以及KAI1/CD82表达减少或缺失可能导致LNR表达上调的设想,以临床胆管癌组织标本和胆管癌细胞系QBC939为研究对象,探讨KAI1/CD82在LNR介导胆管癌侵袭和转移中的作用。实验设计如下:首先,采用免疫组织化学方法检测KAI1/CD82在胆管癌组织标本中的表达情况,并分析其表达水平及与临床病理参数的关系;其次,采用免疫组织化学方法检测分析在不同KAI1/CD82胆管癌组织中LNR的表达差异,分析两者的关系;最后,利用基因工程技术构建含人KAI1/CD82全长基因的重组真核表达质粒pIRES2- EGFP-KAI1/CD82,并经酶切和测序鉴定证实构建成功,通过脂质体转染胆管癌QBC939细胞,免疫细胞化学、Western blot检测胆管癌QBC939细胞过表达KAI1/CD82后LNR蛋白表达的变化。结果:1.KAI1/CD82在胆管癌组织中的阳性表达率(31.3%,15/48)明显低于其在正常胆管组织中的表达(87.5%,7/8),两者间差异显着(χ2=6.891,P<0.01)。分化程度越高,KAI1/CD82阳性表达率越高(χ2=3.911,P<0.05),KAI1/CD82在有转移组的阳性表达率较在无转移组的低(χ2=5.765,P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤的部位和病理类型均无关(P>0.05)。这些结果表明,KAI1/CD82表达减少或缺失可能参与了胆管癌的侵袭转移,其表达下降或许可以作为胆管癌恶性程度的一个分子标志。2.LNR蛋白在胆管癌组织的阳性表达率为54.2%(26/48),分化程度越低,LNR阳性表达率较高(χ2=6.970,P<0.05),有转移组较无转移组明显升高(χ2 =9.952,P<0.01),而与患者性别、年龄、肿瘤部位及病理类型无关(P>0.05)。提示LNR表达上调介导了胆管癌的侵袭转移。3.KAI1/CD82表达阳性的胆管癌组织LNR阳性表达率为20.0%(3/15),而KAI1/ CD82表达阴性的胆管癌组织LNR阳性表达率为69.7%(23/33),两者比较差异显着(χ2=10.259,P<0.01)。胆管癌组织中KAI1/CD82和LNR表达呈负相关(γ=-0.462,P<0.01)。提示KAI1/CD82表达减少或缺失可能导致LNR表达上调,进而介导胆管癌的侵袭转移。4.经过酶切、基因测序鉴定,真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1/CD82含有KAI1/CD82全长基因序列,说明质粒构建成功。5.通过脂质体分别转染pIRES2-EGFP-KAI1/CD82重组质粒及pIRES2-EGFP空载体至胆管癌QBC939细胞,免疫细胞化学和Western blot的方法检测转染后KAI1/ CD82、LNR蛋白的表达,结果显示:转染重组质粒的实验组KAI1/CD82蛋白的表达水平明显高于转染空载体的对照组(P<0.05),而LNR蛋白的表达水平较转染空载体的对照组降低(P<0.05),说明胆管癌QBC939细胞过表达KAI1/CD82可降低LNR蛋白表达。结论:1.胆管癌组织中KAI1/CD82表达减少或缺失。2.胆管癌组织中KAI1/CD82表达与胆管癌分化程度、侵袭转移密切相关。3.胆管癌组织中KAI1/CD82、LNR表达呈负相关。4.成功构建了重组真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1/CD82,并经酶切和测序鉴定证实构建成功。5.胆管癌中LNR表达上调可能与KAI1/CD82表达减少或缺失有关。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2008-11-01）
高占峰[5]（2008）在《层黏素受体过表达在胆管癌细胞免疫逃逸过程中的作用初步探讨》一文中研究指出肿瘤的侵袭和转移是一个多环节、多阶段的过程,除与肿瘤细胞本身粘附、运动、增殖、降解细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)及肿瘤血管生成等有关外,机体的免疫系统在该过程中也具有重要作用。肿瘤细胞通过逃避机体的免疫监视和攻击,进而在体内不受限制的生长和发生远处转移。Fas/FasL系统是体内介导细胞凋亡的一对糖蛋白分子,在免疫自稳、免疫特赦,维持眼、睾丸、胎盘等生理性免疫赦免组织的正常功能,以及恶性肿瘤的发生发展中意义显着。在肿瘤细胞中,Fas表达下降, Fas配体(Fas ligand,FasL)表达增加,直接参与或间接促进了肿瘤逃避机体免疫系统的监视,从而有利于肿瘤细胞的进展和转移。细胞跨膜糖蛋白层黏素受体(laminin receptor, LNR)过表达是恶性实体肿瘤侵袭和转移过程中的共同现象,鉴于Fas/FasL介导的免疫逃逸在侵袭和转移中可能发挥重要作用,我们推测,LNR过表达可能是通过对Fas/FasL系统的调节,参与了肿瘤细胞的免疫逃逸过程,进而发挥了对侵袭和转移的促进作用。肿瘤细胞表面的细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是参与介导细胞间粘附、识别的重要因子。它是淋巴细胞相关抗原-1(lymphocyte function associated antigen-1,LFA-1)的主要配体,是细胞粘附迁移及提呈抗原的重要介导分子。肿瘤细胞膜表面ICAM-1表达减少或丢失,将使肿瘤细胞逃避细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞等免疫活性细胞的识别和杀伤作用。鉴于LNR过表达介导肿瘤侵袭和转移的多个重要环节,LNR和ICAM-1在肿瘤细胞之间的关系密切,LNR有可能会通过ICAM-1在介导免疫逃逸的过程中发挥作用。因此我们推想,LNR过表达可能通过改变ICAM-1等细胞表面重要分子的表达,干扰免疫活性细胞对肿瘤细胞的识别和结合,通过Fas/FasL信号通路的介导,阻碍免疫活性细胞对肿瘤细胞的攻击,促进肿瘤细胞的免疫逃逸。通过下调肿瘤细胞层黏素受体的表达,干扰肿瘤细胞中免疫逃逸的信号通路,将有可能降低肿瘤细胞的免疫逃逸能力,从而可能达到限制其侵袭和转移的目的。课题研究内容及实验设计如下:一、LNR过表达对胆管癌细胞生物学行为的影响。用流式细胞技术(Flow cytometry,FCM)检测胆管癌细胞层黏素受体的表达并分选高表达层黏素受体的胆管癌细胞亚群;用HE染色、扫描电镜及透射电镜观察分选前、后两组细胞形态学的变化;用细胞骨架染色法观察两组细胞的骨架蛋白变化;用随机运动实验和侵袭实验观察两组细胞的侵袭和转移能力变化。二、LNR过表达对胆管癌细胞免疫逃逸相关因子的影响。设计层黏素受体RNA干扰(RNA interfere,RNAi)序列,构建RNAi质粒,经测序、鉴定符合实验设计要求后转染至高表达层黏素受体胆管癌细胞亚群中,沉默层黏素受体在基因和蛋白水平表达。用定量PCR、western blot以及明胶酶谱法检测胆管癌细胞转染前、后的某些基因(FasL、MMP-2、MMP-9、ICAM-1等)功能改变。叁、LNR过表达对胆管癌细胞ICAM-1表达的影响及其机制。用基质金属蛋白酶特异性抑制剂(GM6001)抑制基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的活性,观察两组细胞的ICAM-1表达变化并分析可能的机制。四、胆管癌LNR过表达对免疫活性细胞的影响。建立胆管癌细胞与人Jurkat细胞Transwell?小室旁分泌共培养模型,用TUNEL法检测胆管癌细胞转染层黏素受体RNA干扰质粒前、后对Jurkat细胞凋亡的影响,并分析层黏素受体可能参与胆管癌免疫逃逸的分子机制。本组实验主要的结果如下:1.用流式细胞技术成功分选出高表达层黏素受体的胆管癌细胞亚群。用HE染色观察分选前、后两组细胞形态学的变化。结果,两组细胞HE染色可见,细胞体均呈圆形、椭圆形、纺锤形,偶见多角形,大小不一,折光性强;细胞膜清晰、完整,核质较大;胞核界限清楚,可见一至多个核仁,核分裂相多见。总体上看,高表达层黏素受体胆管癌细胞亚群的胞体较低表达层黏素受体胆管癌细胞的胞体伸展,胞膜表面突起增多,异型性更明显。2.细胞骨架蛋白染色观察,两组胆管癌细胞质内清晰可见骨架蛋白(微丝、微管和中间纤维)呈蓝色丝网状结构,近核侧较致密,相邻细胞间有骨架束彼此穿行。整体上看两组细胞骨架结构分布类似,排列较规则,而高表达层黏素受体胆管癌细胞亚群细胞骨架结构明显紊乱,斑点状肌动蛋白小体、胞体突起及胞膜表面长丝状结构增多。3.扫描电镜和透射电镜下,胆管癌细胞均呈大小不等的椭圆形或短梭形,但高表达层黏素受体胆管癌细胞亚群的胞体表面突起较低表达层黏素受体胆管癌细胞明显增多,片状伪足宽厚,丝状伪足细长而密集。4.随机运动实验和侵袭实验表明高表达层黏素受体胆管癌细胞亚群的运动和侵袭能力较低表达层黏素受体胆管癌细胞明显增强。5.成功构建层黏素受体RNAi质粒,经测序、鉴定符合实验设计要求。6.高表达层黏素受体胆管癌细胞亚群转染层黏素受体RNAi质粒后,伴随胆管癌细胞层黏素受体表达的下调,胆管癌细胞的黏附能力下降,胆管癌细胞的MMP-2、MMP-9、uPA mRNA及蛋白表达降低,而胆管癌细胞表面ICAM-1的mRNA及蛋白表达却增加。用基质金属蛋白酶特异性抑制剂(GM6001)抑制MMP-2和MMP-9的活性后,胆管癌细胞表面ICAM-1的蛋白表达较对照组明显增加。说明胆管癌细胞层黏素受体高表达可增加MMP-2、MMP-9活性,可能降解肿瘤细胞表面ICAM-1,进而逃避机体免疫细胞的杀伤,促进胆管癌细胞免疫逃逸。7.转染层黏素受体RNAi质粒至高表达层黏素受体的胆管癌细胞亚群中后发现胆管癌的层黏素受体表达下降,与此同时,胆管癌FasL在基因和蛋白水平的表达也均随之降低。本实验可初步得出在胆管癌细胞中层黏素受体过表达可能与FasL的表达有内在的联系。8.人Jurkat细胞与胆管癌细胞共培养后,Jurkat细胞的凋亡指数明显增加。层黏素受体RNA干扰质粒转染胆管癌细胞能减弱胆管癌细胞诱导Jurkat细胞的凋亡。初步证明胆管癌细胞层黏素受体过表达可能在胆管癌细胞免疫逃逸过程中发挥重要作用。综上所述,本研究主要结论如下:1.胆管癌细胞中层黏素受体高表达可明显增强其侵袭和转移能力。2.胆管癌细胞LNR过表达,通过分泌MMP-2、MMP-9及uPA等蛋白分子,降解胆管癌细胞表面的黏附分子(ICAM-1)等物质,将使胆管癌细胞逃避细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞等免疫活性细胞的识别和杀伤作用,进而可促进胆管癌细胞的侵袭和转移。3.胆管癌细胞LNR过表达,可上调胆管癌细胞FasL的表达。胆管癌细胞层黏素受体高表达可能通过Fas/FasL信号通路增强其逃避机体免疫监视能力,同时胆管癌细胞LNR过表达可能通过Fas/FasL信号通路诱导T淋巴细胞凋亡,进而促进胆管癌细胞转移。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2008-05-01）
李大江,陈健,陈长宏,王曙光[6]（2006）在《层黏素受体下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9、u-PA蛋白表达的影响》一文中研究指出目的研究层黏素受体(LNR)反义硫代磷酸寡核苷酸片段(AsODN)对人胆管癌QBC939细胞基质蛋白水解酶-2(MMP-2)、基质蛋白水解酶-9(MMP-9)以及尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激酶(u-PA)蛋白表达的影响。方法应用Western blotting分析浓度12μmol/L的LNR AsODN作用48h后,QBC939细胞MMP-2、MMP-9以及u-PA蛋白表达水平。结果LNR AsODN能明显抑制人胆管癌细胞表达MMP-2、MMP-9以及u-PA,与对照组相比,MMP-2、MMP-9、u-PA蛋白表达下降分别为21.8%、16.5%和9.0%(P<0.05)。结论胆管癌细胞QBC939蛋白水解酶MMP-2、MMP-9以及u-PA基因表达水平与层黏素受体的表达水平明显相关,LNR AsODN表达能够使胆管癌细胞蛋白水解酶基因表达下降,提示层黏素受体在介导胆管癌转移中发挥重要作用。(本文来源于《消化外科》期刊2006年06期）
李大江[7]（2006）在《层黏素受体在介导胆管癌细胞转移过程中所致内皮细胞屏障丧失分子机制的初步探讨》一文中研究指出肿瘤的转移是一个多步骤、多环节的复杂过程。在这一过程中,转移性肿瘤细胞突入或游出淋巴或血流的管壁是实现转移的关键步骤之一。有关肿瘤细胞如何突破内皮细胞屏障(endothelial barrier)却知之甚少。细胞跨膜糖蛋白层黏素受体(laminin receptor,LNR),有可能在介导肿瘤细胞引发内皮细胞屏障丧失中发挥重要作用。层黏素受体是最重要的细胞黏附分子受体之一,因此我们推想,下调胆管癌细胞层黏素受体的表达,干扰胆管癌细胞与内皮细胞间信息传递,将有可能消除或降低胆管癌突入或游出淋巴或血循环的能力,从而达到限制转移的目的。本实验设计如下:首先,流式细胞技术检测层黏素受体在高低转移胆管癌细胞亚群的表达,并通过设计层黏素受体反义寡核苷酸,转染到高转移性胆管癌细胞亚群,下调层黏素受体表达。其次,建立胆管癌细胞与人脐静脉内皮细胞直接接触以及Transwell~(?)小室旁分泌共培养模型,光镜及电镜观察内皮细胞在与胆管癌细胞共培养条件下形态改变,免疫荧光、激光共聚焦技术、定量PCR、western blot以及明胶酶谱法检测内皮细胞在与胆管癌细胞共培养条件下功能的改变。最后,下调胆管癌细胞层黏素受体表达后,观察其与人脐静脉内皮细胞共培养后,内皮细胞形态与功能的改变,并分析层黏素受体可能参与的信号传导通路。本组实验主要的结果及结论如下:1.不同胆管癌转移亚群,层黏素受体表达存在着显着的差别。胆管癌细胞层黏素受体高表达与其体外高侵袭性呈正相关。2.层黏素受体反义寡核苷酸转染胆管癌细胞高转移亚群后可下调该细胞层黏素受体的表达,且下调作用呈剂量依赖性。3.光镜下,胆管癌细胞与内皮细胞的黏附很快,大部分黏附于相邻内皮细胞的交界处。人脐静脉内皮细胞与胆管癌细胞Transwell~(?)小室共培养后,内皮细胞有形成管腔的趋势。扫描电镜下,胆管癌细胞与内皮细胞黏附后,相邻内皮细胞从连接处收缩,形成间隙,暴露出下面的基质,内皮细胞出现“窗口”样孔隙。4.胆管癌细胞高转移亚群转染层黏素受体反义寡核苷酸后,伴随胆管癌细胞层黏素受体的下调,胆管癌细胞与内皮细胞的黏附能力下降。5.人脐静脉内皮细胞与胆管癌细胞共培养后,内皮细胞F-actin、pp125FAK表达增强,层黏素受体反义寡核苷酸转染胆管癌细胞能其下调对内皮细胞的上述作用。6.人脐静脉内皮细胞与胆管癌细胞共培养后,内皮细胞MMP-2、MMP-9、uPAmRNA及蛋白表达增加,内皮细胞分泌MMP-2、MMP-9增加。层黏素受体反义寡核苷酸转染胆管癌细胞能减弱其对内皮细胞的上述作用。综上所述,本研究主要结论如下:1.层黏素受体是介导人脐静脉内皮细胞与胆管癌细胞黏附的重要介质。胆管癌细胞层黏素受体高表达可增强其与内皮细胞及细胞外基质的黏附能力,促进胆管癌转移。2.人脐静脉内皮细胞微丝肌动蛋白在胆管癌细胞的作用下聚合与解聚,引起收缩,导致内皮细胞间连接破坏,层黏素受体pp125FAK途径是其重要的信号传导通路。3.人脐静脉内皮细胞pp125FAK-MAPK-ERK信号途径通过层黏素受体被胆管癌细胞激活,内皮细胞蛋白水解酶mRNA及蛋白表达增强而加速内皮下基质的降解,促进胆管癌的转移。4.旁分泌途径在层黏素受体介导胆管癌细胞转移过程中所致内皮细胞屏障丧失的分子机制中亦起着重要作用。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2006-11-01）
层黏素受体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建层黏素受体RNA干扰质粒,为探讨抑制层黏素受体过表达在胆管癌免疫逃逸中的作用奠定基础。方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入pGenesil-3获得RNA干扰载体pGenesil-shLNR。脂质体法将pGenesil-shLNR导入胆管癌细胞QBC939,免疫组化法检测对胆管癌细胞QBC939LNR表达的抑制情况。结果所构建的载体pGenesil-shLNR能够干扰QBC939细胞中LNR的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G-418筛选稳定转化的细胞株。结论成功构建了抑制胆管癌细胞QBC939表达LNR的RNA干扰质粒载体。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
层黏素受体论文参考文献
[1].高占峰,李天宇,王曙光.抑制层黏素受体过表达在胆管癌细胞免疫逃逸中的作用[J].临床和实验医学杂志.2012
[2].高占峰,李天宇,王曙光.层黏素受体靶向RNA干扰质粒载体的构建[J].临床和实验医学杂志.2012
[3].邓小明,王曙光,张丰深,孙海,杨星.KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体的影响[J].解放军医学杂志.2011
[4].邓小明.KAI1/CD82在层黏素受体介导胆管癌侵袭和转移中的作用初步探讨[D].第叁军医大学.2008
[5].高占峰.层黏素受体过表达在胆管癌细胞免疫逃逸过程中的作用初步探讨[D].第叁军医大学.2008
[6].李大江,陈健,陈长宏,王曙光.层黏素受体下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9、u-PA蛋白表达的影响[J].消化外科.2006
[7].李大江.层黏素受体在介导胆管癌细胞转移过程中所致内皮细胞屏障丧失分子机制的初步探讨[D].第叁军医大学.2006