MDA技术在转基因检测中的研究与应用

MDA技术在转基因检测中的研究与应用

论文摘要

PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因玉米有证标准物质Bt11粉末的单颗粒痕量样品释出DNA进行扩增,结合PCR扩增检测,玉米粉末颗粒中内源参照基因的检出率达到70%以上,转基因特异性序列检出与内源参照基因检出的比值,与标准物质标称值基本相符,为建立基于MDA技术转基因植物及其产品粉末颗粒等痕量样品检测方法奠定了基础,同时也为加工产品中复合性状转基因作物的检测提供了潜在的解决方案。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 非转基因玉米PCR检测灵敏度的确定
  •   1.2 MDA与PCR技术相结合与单一PCR技术最低检测模板量的比较
  •   1.3 单颗粒痕量DNA检测方法检测Bt11
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 试剂
  •   3.3 DNA样品的提取与梯度稀释
  •   3.4 MDA扩增体系
  •   3.5 单颗粒痕量样品细分
  •   3.6 引物与PCR反应体系
  •   3.7 琼脂糖凝胶电泳检测
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 马晓娇,李亮,宛煜嵩,金芜军

    关键词: 非转基因玉米,转基因玉米,检测

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

    专业: 生物学,农业基础科学

    单位: 中国农业科学院生物技术研究所

    基金: 国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08012003)资助

    分类号: S188

    DOI: 10.13417/j.gab.038.002207

    页码: 2207-2214

    总页数: 8

    文件大小: 1536K

    下载量: 109

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