产甲壳素酶菌株的筛选、鉴定及其酶解产物分析

产甲壳素酶菌株的筛选、鉴定及其酶解产物分析

论文摘要

以甲壳素为唯一碳源,从自然发酵的麻虾酱中筛选到1株产甲壳素酶的放线菌X1。通过形态学、分子生物学以及生理生化实验鉴定为淀粉酶链霉菌(Streptomyces diastaticus),命名为S. diastaticus strain CS 1801。在30℃条件下培养7 d,该菌株所产甲壳素酶活力为117.4 U/L。利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱仪对发酵液中成分进行分析,确定甲壳素在淀粉酶链霉菌CS1801作用下分解成壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖和壳六糖。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 初筛
  •     1.3.2 复筛
  •     1.3.3 ELISA法酶活测定
  •     1.3.4 菌种鉴定?
  •       1.3.4. 1 形态学鉴定
  •       1.3.4. 2 生理生化鉴定
  •       1.3.4. 3 分子生物学鉴定
  •     1.3.5 发酵液可溶性糖成分分析
  •       1.3.5. 1 Chitosan标准品溶液配制
  •       1.3.5. 2 UPLC条件
  •       1.3.5. 3 质谱条件
  • 2 结果与分析
  •   2.1 形态学鉴定
  •   2.2 生理生化鉴定
  •     2.2.1 生理生化实验结果
  •     2.2.2 碳源利用实验结果
  •   2.3 分子生物学鉴定
  •     2.3.1 PCR扩增产物电泳图
  •     2.3.2 系统进化发育树
  •   2.4 UPLC-Q-TOF-MS分析
  •     2.4.1 UPLC分析
  •     2.4.2 质谱分析
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 徐田甜,陈彬,侯是媛,曹丹,许晨磊,齐斌,郑丽雪,王立梅

    关键词: 甲壳素酶,链霉菌,酶联免疫吸附实验,超高效液相色谱串联质谱

    来源: 食品科学 2019年22期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,一般化学工业

    单位: 苏州大学医学部药学院,常熟理工学院发酵工程技术研究中心

    基金: 江苏省科技厅重点研发计划项目(BE2017316,BE2017326,BE2018320),苏州市科技计划项目(SS201818,SS2019031)

    分类号: TQ925

    页码: 207-212

    总页数: 6

    文件大小: 2764K

    下载量: 201

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