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高寒草地土壤产漆酶真菌筛选及其生物功能的研究

2020-12-08阅读(557)

高寒草地土壤产漆酶真菌筛选及其生物功能的研究

论文摘要

漆酶与木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶共同构成木质素降解酶系,在土壤腐殖质和有机质的形成过程中具有重要作用。为了探索和发现高寒草地土壤耐低温产漆酶真菌资源,进一步认识漆酶对高寒草地土壤有机质转化的作用,本论文主要开展了高寒草地土壤产漆酶真菌筛选、优良菌株生物学特性、漆酶的酶学性质以及对土壤有机质的矿化作用等4个方面的研究。研究结果如下:1、采用底物显色法从高寒草地土壤中筛选了9株产漆酶真菌,采用ITS-rDNA方法进行分子鉴定,鉴定结果为菌株1.9为Uncultured fungus clone.、2.1a为Scytalidium、310b为Marasmius tricolor、2.1c为Saccharicola、2.3a为fungal sp、2.4d为Saccharicola、10a为Marasmiusrotalis、3.7c为Alternaria.、WB为Verticillium longisporum。除菌株3.7c以外,其余8株菌株在以愈创木酚、蒽酮、邻联甲苯胺、联苯胺为底物的选择性培养基上都能产生氧化带;漆酶酶活力测定结果表明,菌株310b产漆酶的酶活力为1.62IU,与其余8个菌株相比酶活力最高,且差异显著（P<0.05）。2、以产漆酶活力最高的菌株Marasmius tricolor310b为研究对象,在不同条件下（温度、碳源、氮源、pH以及盐浓度）测定了菌落生长直径,结果表明,供试菌株310b在30℃,pH值为4.8,不添加NaCl的条件下生长最快,且差异显著（P<0.05）;以不加碳源为对照,添加蔗糖和糊精2种碳源后,菌落生长最快（P<0.05）;赖氨酸和尿素两种氮源对菌株的生长具有明显的抑制作用（P<0.05）。3、在不同温度、初始pH、金属离子和非营养有机物条件下,测定了菌株Marasmius tricolor310b产漆酶的酶活力。结果表明:菌株310b产酶最适反应温度为35℃,在0-45℃可保持较高酶活力;最适反应pH为4.5,在4.0-7.0范围内保持较高酶活;与对照相比Fe2+、Fe3+对酶活力有抑制作用（P<0.05）;乙醇可以增加酶活力（P<0.05）,而已腈、H2O2、SDA、EDTA对酶活力有抑制作用（P<0.05）,其中H2O2的抑制作用最强,添加丙酮对酶活力没有影响。4、通过测定土壤CO2释放量、土壤有机碳矿化速率、土壤有机碳含量、土壤微生物生物量碳含量以及土壤微生物呼吸熵。结果表明:添加产漆酶真菌菌株310b菌悬液后,上述各指标值均高于对照组,且都呈现规律性变化,说明产漆酶真菌菌株310b产生的漆酶对土壤有机质的形成转化过程具有促进作用。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 缩写词
  • 第1章 前言
  •   1.1 漆酶概述
  •   1.2 漆酶来源
  •   1.3 漆酶的功能及应用
  •     1.3.1 漆酶在生物体中的功能
  •     1.3.2 漆酶在食品领域的应用
  •     1.3.3 漆酶在动物营养方面的应用
  •     1.3.4 漆酶在工业污染物处理及生物修复方面的应用
  •     1.3.5 漆酶在生物质利用方面的应用
  •     1.3.6 漆酶在土壤腐殖质形成过程中的应用
  •     1.3.7 漆酶在生态系统物质循环方面的应用
  •   1.4 漆酶的研究方法
  •   1.5 高寒草地产漆酶真菌研究现状
  •   1.6 本文的研究意义和研究内容
  •     1.6.1 研究意义
  •     1.6.2 研究内容
  •     1.6.3 研究路线
  • 第2章 高寒草地产漆酶真菌的筛选及分子鉴定
  •   2.1 材料与方法
  •     2.1.1 供试菌株
  •     2.1.2 主要试剂
  •     2.1.3 主要仪器
  •     2.1.4 培养基及其配制
  •     2.1.5 实验设计
  •     2.1.6 研究方法
  •     2.1.7 数据处理及分析
  •   2.2 结果与分析
  •     2.2.1 产漆酶菌株的DNA-ITS分子鉴定结果
  •     2.2.2 供试菌株在不同底物选择性培养基上的显色情况
  •     2.2.3 供试菌株在底物选择性培养基上出现氧化带的时序
  •     2.2.4 供试菌株在底物选择性培养基上的生长情况及氧化带大小
  •     2.2.5 产漆酶菌株310b产生漆酶活力
  •   2.3 讨论
  •   2.4 结论
  • 第3章 菌株Marasmius tricolor310b的生物学特性研究
  •   3.1 材料与方法
  •     3.1.1 供试菌株
  •     3.1.2 主要试剂
  •     3.1.3 主要仪器
  •     3.1.4 培养基及其配制
  •     3.1.5 实验设计
  •     3.1.6 研究方法
  •     3.1.7 数据处理及分析
  •   3.2 结果与分析
  •     3.2.1 不同NaCl浓度对菌株310b菌落生长的影响
  •     3.2.2 不同pH对菌株310b菌落生长的影响
  •     3.2.3 温度对菌株310b菌落生长的影响
  •     3.2.4 不同碳源对菌株310b菌落生长的影响
  •     3.2.5 不同氮源对菌株310b菌落生长的影响
  •   3.3 讨论
  •   3.4 结论
  • 第4章 菌株Marasmius tricolor310b产漆酶酶学性质的研究
  •   4.1 材料与方法
  •     4.1.1 供试菌株
  •     4.1.2 主要试剂
  •     4.1.3 主要仪器
  •     4.1.4 培养基及其配制
  •     4.1.5 实验设计
  •     4.1.6 研究方法
  •     4.1.7 数据处理及分析
  •   4.2 结果与分析
  •     4.2.1 最适温度和对温度的稳定性
  •     4.2.2 最适pH和对pH的稳定性
  •     4.2.3 不同离子对漆酶活力的影响
  •     4.2.4 非营养有机物对漆酶活力的影响
  •   4.3 讨论
  •   4.4 结论
  • 第5章 菌株Marasmius tricolor 310b对土壤有机质矿化作用的研究
  •   5.1 材料与方法
  •     5.1.1 供试菌株、土壤样品及植物样品
  •     5.1.2 主要试剂
  •     5.1.3 主要试剂的配制
  •     5.1.4 主要仪器
  •     5.1.5 培养基及其配制
  •     5.1.6 实验设计
  •     5.1.7 研究方法
  •     5.1.8 数据处理及分析
  •   5.2 结果与分析
  •     5.2.1 碳矿化速率
  •     5.2.2 土壤有机碳含量
  •     5.2.3 微生物量碳含量
  •     5.2.4 微生物呼吸熵
  •   5.3 讨论
  •   5.4 结论
  • 全文总结
  • 研究展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简历

    • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 李欣

    导师: 芦光新

    关键词: 高寒草地,产漆酶真菌,生物学特性,酶学特性,生物功能

    来源: 青海大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 自然地理学和测绘学,畜牧与动物医学

    单位: 青海大学

    分类号: S812.2

    DOI: 10.27740/d.cnki.gqhdx.2019.000273

    总页数: 82

    文件大小: 6246K

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